金黃色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）是引起細(xì)菌性食物中毒的重要致病菌之一，也是引起奶牛乳房炎的主要因素之一，在乳及乳制品中有較高的檢出率。本標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)可用于乳及乳制品中金黃色葡萄球菌定量檢測的方法驗證和微生物實驗室測量質(zhì)量控制，也可以用于金黃色葡萄球菌選擇性培養(yǎng)基的生長率評價，為評價結(jié)果的可靠性提供計量溯源保障。?

一、 樣品制備?

選取金黃色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）標(biāo)準(zhǔn)菌株（菌株編號 ATCC 6538P），培養(yǎng)后與保護劑混合均勻，用移液器分裝至西林瓶進行凍干。隨后添加奶粉并壓蓋密封。?

二、 溯源性及定值方法?

本標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)由多家單位采用金黃色葡萄球菌涂布平板法（見附件 A）進行合作定值。通過對標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進行 10 倍系列稀釋后，對可進行計數(shù)的培養(yǎng)基平板上的菌落數(shù)量進行計數(shù)，采用公式計算得到金黃色葡萄球菌數(shù)量，其量值單位為 CFU/g（CFU，菌落形成單位 Colony-Forming Units）。通過使用滿足計量學(xué)特性要求、經(jīng)確認(rèn)的定量測量方法和經(jīng)檢定校準(zhǔn)的質(zhì)量、容量等計量器具，確保本標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的量值溯源至實體數(shù)基本單位“一”（符號：1）以及國家法定計量單位克（g）。?

三、 特性量值及不確定度

四、 均勻性及穩(wěn)定性評估?

參照 JJF1343 國家計量技術(shù)規(guī)范（等效 ISO 指南 35），采用金黃色葡萄球菌涂布平板法，按照隨機抽樣原則對樣品進行均勻性評估，方差分析結(jié)果表明，樣品均勻性良好；采用相同測量方法，按照先密后疏的原則對樣品進行穩(wěn)定性評估，趨勢分析結(jié)果表明，-20℃下可以長期穩(wěn)定保存，4℃下可以穩(wěn)定保存 7 天。標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)自定值之日起，有效期為 12 個月，研制單位將繼續(xù)跟蹤監(jiān)測該標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的穩(wěn)定性，有效期內(nèi)如發(fā)現(xiàn)量值變化，將及時通知用戶。?

五、 包裝、貯存及使用?

1.包裝與保存：本標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)采用棕色西林瓶包裝，-20℃避光保存。每瓶 0.50 g，計算時按照 0.50g 計算。采用干冰運輸，收到后請于-20℃冰箱中保存。?

2.使用：本標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)開瓶后應(yīng)當(dāng)一次性完全使用。使用前從-20℃取出并在室溫(20℃)下平衡 10分鐘，用天平精確稱量(4.49±0.01) g 無菌蒸餾水復(fù)溶凍干的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。用戶可參考附件 A 奶粉中金黃色葡萄球菌計數(shù)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)測量方法，使用 Baird-Parker 培養(yǎng)基進行測試。?

3.本標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)含有微生物，使用前應(yīng)佩戴口罩和乳膠手套；使用時應(yīng)注意防護，避免吸入或與皮膚接觸；使用后的剩余樣品、包裝瓶及取樣吸頭等消耗品應(yīng)按生物污染廢棄物進行高壓滅菌處置。