新型冠狀病毒（2019-nCoV）假病毒核糖核酸標準物質作為測量標準，參與從 RNA 提取至核酸擴增檢測全過程，用于新型冠狀病毒特征基因的定性和定量測量、方法驗證以及實驗室質量控制。?

一、樣品制備?

本標準物質是將新型冠狀病毒重要特征基因核殼蛋白 N 基因（全長）、包膜蛋白 E 基因（全長）和開放閱讀框 1ab（ORF1ab）基因片段（基因組坐標：13201-15600 和 18500-19000，GenBank No.NC_045512）構建至慢病毒載體，轉染細胞后獲得假病毒顆粒，經(jīng)過純化后稀釋至一定濃度分裝。?

二、溯源性及定值方法?

采用數(shù)字 PCR 方法對 N、E 和 ORF1ab 基因進行拷貝數(shù)濃度測定，作為標準物質的標準值。本標準物質通過使用滿足計量學特性要求、經(jīng)確認的絕對定量測量方法和經(jīng)檢定校準的容量計量器具，確保本標準物質的量值溯源至可作為任何一個量制基本單位的實體數(shù)基本單位“一”（符號：1）以及體積的國家法定計量單位升（L）。?

三、特性量值及不確定度

四、均勻性及穩(wěn)定性評估參照 JJF1343 國家計量技術規(guī)范（等效 ISO 指南 35），采用數(shù)字 PCR 方法對該標準物質進行均勻性檢驗研究，結果表明均勻性良好，最小取樣量 140 μL。采用數(shù)字 PCR 方法對該標準物質進行了初步穩(wěn)定性研究，參考同類標準物質的穩(wěn)定性數(shù)據(jù)，自定值日期起，有效期暫定為 6 個月，研制單位將繼續(xù)跟蹤監(jiān)測該標準物質的穩(wěn)定性，有效期內如發(fā)現(xiàn)量值變化，將及時通知用戶。五、包裝、貯存及使用1.包裝規(guī)格：本標準物質采用 1.5mL 帶內蓋彩色凍存管包裝，每管 200μL，最小取樣量為 140 μL。2.保存條件及運輸：置于-70℃冰箱中保存。采用干冰運輸，收到標準物質后應檢查標準物質是否處于冰凍狀態(tài)。檢查無誤才可用于實驗。3.本標準物質相關實驗操作，須在生物安全二級實驗室實驗室（BSL-2/P2）條件下，佩戴乳膠手套和防護口罩，在生物安全柜中進行。4.本標準物質開瓶后一次性使用，不可反復凍融。使用前應從冰箱內取出，平衡至室溫并混勻。5.推薦使用 Qiagen 52904/52906 病毒 RNA 提取試劑盒提取 RNA。6.使用本標準物質進行 ORF1ab 基因測量時，請仔細核實擬使用的 PCR 引物序列在新型冠狀病毒基因組的坐標。引物序列不能超出“樣品制備”部分描述的基因組坐標范圍。7.進行梯度稀釋時，推薦使用專用 RNA 保存液進行稀釋。8.使用后的標準物質包裝瓶以及移液器吸頭等實驗材料應在丟棄前進行高壓滅菌。