以臺盼藍(lán)死/活細(xì)胞染色和顯微圖像識別為基本工作原理的細(xì)胞計數(shù)儀被廣泛應(yīng)用于生物技術(shù)?產(chǎn)業(yè)中,用于取代人工顯微鏡計數(shù)方法,具有操作簡便、測量快捷、參數(shù)多樣等優(yōu)點。本標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)?主要用于臺盼藍(lán)原理顯微圖像式細(xì)胞計數(shù)儀的活/死細(xì)胞濃度與活細(xì)胞比例測量項目的校準(zhǔn)或相關(guān)?檢測測量質(zhì)量評價等工作。
一、?樣品制備
本標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)候選物采用模擬臺盼藍(lán)原理的活/死細(xì)胞的高分子聚合物微球為原料,通過特殊工藝?進(jìn)行處理,得到一定細(xì)胞濃度與比例的微球溶液,在無菌潔凈環(huán)境條件下通過移液器進(jìn)行分裝。
二、?溯源性及定值方法
本溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的活/死細(xì)胞濃度與活細(xì)胞比例采用顯微鏡直接計數(shù)法進(jìn)行定值。通過使用顯微?鏡人工鏡檢計數(shù)細(xì)胞計數(shù)板固定體積內(nèi)總細(xì)胞模擬微球和活/死細(xì)胞模擬微球的數(shù)量,通過計算得到?活/死細(xì)胞濃度值與活細(xì)胞比例值。通過使用經(jīng)確認(rèn)的、滿足計量學(xué)特性要求的測量方法和經(jīng)檢定校?準(zhǔn)的顯微鏡、細(xì)胞計數(shù)板等計量器具,確保本標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的量值溯源至實體數(shù)基本單位“?一”(符號:1)。
三、?特性量值及不確定度
編號
名稱
標(biāo)準(zhǔn)值
擴展不確定度(k=2)
NIM-RM
臺盼藍(lán)染色原理模擬活/死細(xì)?胞濃度與比例標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(I)
活細(xì)胞濃度
1018?個/μL
145
活細(xì)胞比例
100.00%
0.44%
臺盼藍(lán)染色原理模擬活/死細(xì)?胞濃度與比例標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(II)
死細(xì)胞濃度
981?個/μL
54
0.03%
0.?14%
所賦特性量值的不確定度綜合考慮了顯微鏡細(xì)胞板直接計數(shù)法測量重復(fù)性、均勻性和穩(wěn)定性等?不確定度分量。
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