本品產(chǎn)僅供科研

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產(chǎn)品名稱：細(xì)菌染料法qPCR試劑盒

產(chǎn)品規(guī)格：50次/盒

本產(chǎn)品就是根據(jù)PCR原理專門開發(fā)的試劑盒，它具有下列特點(diǎn)：

1. 即開即用，用戶只需要提供樣品DNA模板。

2. 提供陽性對照，便于區(qū)分假陰性樣品。

3. 產(chǎn)品精心優(yōu)化且特異性高，引物是根據(jù)高度保守區(qū)設(shè)計(jì)，不會(huì)跟除此之外的其它微生物DNA發(fā)生交叉反應(yīng)。

4. PCR mix中含上樣染料，PCR后可以直接上樣電泳。

5. 本產(chǎn)品足夠50次20μL體系的PCR反應(yīng)。

6. 本產(chǎn)品只能用于定性實(shí)驗(yàn)，不能用于定量。

7. 本產(chǎn)品只能用于科研

細(xì)菌染料法qPCR試劑盒樣品的制備　
1. 如果有N個(gè)樣品，必須設(shè)置N+2個(gè)提取反應(yīng)，多出的兩個(gè)中一個(gè)是 PC（樣品制備陽性對照），一個(gè)是 NC（樣品制備陰性對照）。可以用 10μL 牛乳頭瘤病毒 PCR 陽性對照（1×10E6 拷貝/μL，本試劑盒提供）再加上一定量的水作為制備的陽性對照（加水后其總體積跟樣品一樣，樣品體積多少取決于所用試劑盒的要求）?？梢杂盟鳛橹苽涞年幮詫φ?。

2. 用自選方法純化上述 N+2 個(gè)樣品的 DNA。本試劑盒跟市場上大多數(shù)細(xì)菌DNA提取試劑盒兼容。

電泳分析　

1. 取 5-10uL 擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行常規(guī)瓊脂糖電泳，檢測擴(kuò)增效果，由于擴(kuò)增產(chǎn)物較短，建議用 1.5%-2.0%的瓊脂糖凝膠。

2. 陽性樣品預(yù)期得到的擴(kuò)增產(chǎn)物長度為 200bp 左右。如果兩個(gè)陰性對照（樣品制備陰性對照或 PCR 陰性對照）有此擴(kuò)增產(chǎn)物，說明環(huán)境污染，則整個(gè)實(shí)驗(yàn)無效，不需要分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

3. 如果所有樣品和 PCR 陽性對照均無此擴(kuò)增產(chǎn)物，則說明有系統(tǒng)性的問題（試劑、設(shè)備、程序、操作等），需要重復(fù)并排查原因。

4. 如果沒有上述兩種情況，則實(shí)驗(yàn)有效，可以分析樣品的擴(kuò)增結(jié)果。N+2 個(gè)樣品中有擴(kuò)增產(chǎn)物的判定為陽性，無則判定為陰性。

細(xì)菌染料法qPCR試劑盒樣本采集、存放及運(yùn)輸：

1、樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；

2、運(yùn)輸及保存：低溫運(yùn)輸，-20℃保存，保存期限一年。陽性對照需單獨(dú)放置，不要污染其他試劑。

3、運(yùn)輸：采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。

4、自備試劑：樣品DNA。

細(xì)菌染料法qPCR試劑盒注意事項(xiàng)

1 所有操作嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行；

2試劑盒內(nèi)各種組分使用前應(yīng)自然融化，混勻并短暫離心；

3 反應(yīng)液應(yīng)避光保存；

4反應(yīng)中盡量避免氣泡存在，管蓋需蓋緊；

5使用一次性吸頭、一次性手套和各區(qū)專用工作服；

6 樣本處理、試劑配制、加樣需在不同區(qū)進(jìn)行，以免交叉污染；

7 實(shí)驗(yàn)完畢后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外燈處理工作臺和移液器；

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