產(chǎn)品名稱：霍亂弧菌O139型PCR試劑盒

如需詳細的完整說明書，可聯(lián)系客服免費索取。

本產(chǎn)品就是根據(jù)PCR原理專門開發(fā)的試劑盒，它具有下列特點：

1. 即開即用，用戶只需要提供樣品DNA模板。

2. 提供陽性對照，便于區(qū)分假陰性樣品。

3. 產(chǎn)品精心優(yōu)化且特異性高，引物是根據(jù)高度保守區(qū)設計，不會跟除此之外的其它微生物DNA發(fā)生交叉反應。

4. PCR mix中含上樣染料，PCR后可以直接上樣電泳。

5. 本產(chǎn)品足夠50次20μL體系的PCR反應。

6. 本產(chǎn)品只能用于定性實驗，不能用于定量。

7. 本產(chǎn)品只能用于科研

包裝規(guī)格及成分（具體信息詳見說明書）：

霍亂弧菌O139型PCR試劑盒的制備　

1. 用自選方法純化N+2個樣品的DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)核酸提取試劑盒兼容。

2. 如果有N個樣品，則需要做N+2個提取，包括一個樣品制備陽性對照和一個樣品制備陰性對照。樣品制備陽性對照是在適量水（取決于試劑盒要求的樣品起始量）中加 10μL 差異支原體 PCR 陽性對照的 1000 倍稀釋液而得，樣品制備陰性對照是直接用水。提取結束后最后得到模板 DNA 放冰上待用。

電泳分析　
1. 取 5-10uL 擴增產(chǎn)物進行常規(guī)瓊脂糖電泳，檢測擴增效果，由于擴增產(chǎn)物較短，建議用 1.5%-2.0%的瓊脂糖凝膠。

2. 陽性樣品預期得到的擴增產(chǎn)物長度為 200bp 左右。如果兩個陰性對照（樣品制備陰性對照或 PCR 陰性對照）有此擴增產(chǎn)物，說明環(huán)境污染，則整個實驗無效，不需要分析實驗結果。

3. 如果所有樣品和 PCR 陽性對照均無此擴增產(chǎn)物，則說明有系統(tǒng)性的問題（試劑、設備、程序、操作等），需要重復并排查原因。

4. 如果沒有上述兩種情況，則實驗有效，可以分析樣品的擴增結果。N+2 個樣品中有擴增產(chǎn)物的判定為陽性，無則判定為陰性。

霍亂弧菌O139型PCR試劑盒樣本采集、存放及運輸：

1、樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；

2、運輸及保存：低溫運輸，-20℃保存，保存期限一年。陽性對照需單獨放置，不要污染其他試劑。

3、運輸：采用泡沫箱加冰密封進行運輸。

4、自備試劑：樣品DNA。

霍亂弧菌O139型PCR試劑盒注意事項：

1.整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。

2.為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。

3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。

4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。

5.試劑盒內所配陰性和陽性對照在第一次使用前應全部轉移至標本準備區(qū)，并單獨存放。

6.為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。

7.儀器擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。

8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。

9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。

霍亂弧菌O139型PCR試劑盒相關產(chǎn)品如下：