細(xì)胞名稱：人類星形膠質(zhì)瘤耐替莫唑胺細(xì)胞U251MGTMZ/LUC(帶熒光素酶)
細(xì)胞代次：P4
細(xì)胞規(guī)格：T25瓶（包郵）/2冷凍管（需加干冰運(yùn)輸費(fèi)）
細(xì)胞凍存：無血清凍存液
細(xì)胞傳代：第一次建議1:2
細(xì)胞收到后處理
培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是運(yùn)輸細(xì)胞的最好辦法。收到細(xì)胞用75%酒精噴灑整個(gè)細(xì)胞瓶，消毒后放到超凈臺(tái)內(nèi)嚴(yán)格無菌操作，將細(xì)胞瓶放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中靜置3-4小時(shí)以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)后再做處理。顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存（最好40x,100x,200x各一張），前三天照片是重要售后依據(jù)，不提供照片默認(rèn)收到狀態(tài)良好。（換液后將瓶蓋擰松）
人類星形膠質(zhì)瘤耐替莫唑胺細(xì)胞U251MGTMZ/LUC(帶熒光素酶)，培養(yǎng)步驟
a、細(xì)胞傳代：如果未超過80%匯合度時(shí)，將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中，留5ml完全培養(yǎng)基，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)；如果細(xì)胞密度超80%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)，傳代具體步驟如下：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液約1-2ml至培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上完全培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞，使之完全脫落后吸出，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL完全培養(yǎng)基重懸。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2的比例進(jìn)行分瓶傳代（兩個(gè)T25瓶），補(bǔ)充新的完全培養(yǎng)基至5-8ml/瓶，最后放入到37℃、5%CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
b、細(xì)胞凍存：
1、細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí)，棄T25培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后加入5ml完全培養(yǎng)液終止消化，再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1000rpm離心 5min；
3、 棄上清，沉淀細(xì)胞加入1ml的雅吉生物無血清凍存液（貨號(hào)：C7001），混勻后加入凍存管中。
4、 將凍存細(xì)胞直接放入-80℃冰箱即可，如后期要將細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮罐中，則需在-80℃冰箱 中存放24小時(shí)以上再轉(zhuǎn)入液氮罐中。
C、細(xì)胞復(fù)蘇：
1、從液氮中取出細(xì)胞凍存管（注意佩戴防護(hù)面具），快速將其置入 37℃水浴中解凍， 直至凍存管中無結(jié)晶，然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁；
2、將凍存管中的細(xì)胞移至含 5ml 完全培養(yǎng)基的15ml離心管中，1000rpm離心5min；
3、棄上清，沉淀用5ml完全培養(yǎng)基重懸，接種至T25培養(yǎng)瓶，放于37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4、第二天，換用新鮮完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
注意事項(xiàng)：有些細(xì)胞貼壁不牢，在運(yùn)輸過程中容易發(fā)生細(xì)胞脫落，這是正常現(xiàn)象。如脫離較多可將培養(yǎng)瓶所有培養(yǎng)液收集至離心管，1000rpm離心5min，收集上清作過渡培養(yǎng)（后期對(duì)比培養(yǎng)），沉淀加入胰酶1-2ml，輕輕吹打，重懸，消化1-2分鐘后，加5ml完全培養(yǎng)基終止反應(yīng)。再離心，棄上清，加1-2ml完全培養(yǎng)基重懸。然后按1:2比例進(jìn)行分瓶傳代（兩個(gè)T25），補(bǔ)充新的完全培養(yǎng)基至5-8ml/瓶，最后放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
人類星形膠質(zhì)瘤耐替莫唑胺細(xì)胞U251MGTMZ/LUC(帶熒光素酶),售后服務(wù)
1. 細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問題，細(xì)胞丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴(yán)重漏液等，重發(fā)；
2. 細(xì)胞污染問題，請(qǐng)?jiān)谑盏疆a(chǎn)品48小時(shí)內(nèi)，給我們提出真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，核實(shí)后重發(fā)；
3. 常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置24小時(shí)后，干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇后24小時(shí)后，絕大多數(shù)細(xì)胞未存活，（需提供真實(shí)清晰的細(xì)胞狀態(tài)照片），重發(fā)；
4. 干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇后24小時(shí)后或常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置4小時(shí)候并且未開封，出現(xiàn)污染，重發(fā)；
5. 細(xì)胞活性問題，請(qǐng)?jiān)谑盏疆a(chǎn)品7天內(nèi)給我們提出真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，用臺(tái)盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力，核實(shí)后予重發(fā)；
6. 細(xì)胞收到當(dāng)天以及第2,3天請(qǐng)拍照，3天未告知的，視為產(chǎn)品合格。4-7天內(nèi)出現(xiàn)問題有提供收到細(xì)胞前3天照片和細(xì)胞出現(xiàn)問題時(shí)照片以及細(xì)胞相關(guān)操作的詳細(xì)步驟的，并跟技術(shù)人員溝通的，由技術(shù)人員判定為我方責(zé)任的，重發(fā)。技術(shù)人員判定為雙方承擔(dān)責(zé)任的由雙方進(jìn)行協(xié)商處理或者按合同價(jià)的50%收費(fèi)重發(fā)。
2）細(xì)胞出現(xiàn)問題，不予以重發(fā)的情況有哪些？
1. 客戶造成細(xì)胞污染，不重發(fā)；
2. 客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
3. 非本庫(kù)推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
4. 細(xì)胞狀態(tài)不好，未提供細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的，不重發(fā)；
5. 細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的，不重發(fā)；
6. 細(xì)胞收到2天內(nèi)，未告知，不重發(fā)；
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| GT1283LUC | shsy5y轉(zhuǎn)染野生型/LUC | 人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞shsy5y轉(zhuǎn)染野生型/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 43%MEM+43%F-12(1:1)+10%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%NEAA+1%丙酮酸鈉+1%P/S |
| GT1284LUC | SIHa/LUC | 人子宮頸鱗癌細(xì)胞SIHa/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | MEM+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1285LUC | SKBR3/LUC | 人乳腺癌細(xì)胞（非三陰）SKBR3/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | McCOY's5A(或DMEM(含NaHCO31.5g/L))+10%FBS+1%P/S多數(shù)貼壁，少量懸浮 |
| GT1286LUC | SKHEP1/LUC | 人肝腹水腺癌細(xì)胞（肝竇內(nèi)皮）SKHEP1/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | MEM+10%FBS+1%P/S |
| GT1287LUC | sklu1/LUC | 人肺腺癌細(xì)胞sklu1/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | MEM+10%FBS+1%P/S |
| GT1288LUC | SKMEL1/LUC | 人惡性黑色素瘤細(xì)胞SKMEL1/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | MEM+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1289LUC | SKMEL2/LUC | 人皮膚黑色素瘤細(xì)胞SKMEL2/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | MEM+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1290LUC | SKMEL5/LUC | 人皮膚黑色素瘤細(xì)胞SKMEL5/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | MEM+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1291LUC | SKMES1/LUC | 人肺鱗癌細(xì)胞SKMES1/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | MEM+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1292LUC | SKNEP1/LUC | 人腎母細(xì)胞瘤細(xì)胞SKNEP1/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | McCOY's5A+10%FBS+1%P/S |
| GT1293LUC | SKNMC/LUC | 人神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞SKNMC/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | MEM+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1294LUC | SKNSH/LUC | 人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞SKNSH/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | MEM+10%FBS+1%NEAA+1%L-谷氨酰胺+1%P/S |
| GT1295LUC | SKOV3/LUC | 人卵巢癌細(xì)胞SKOV3/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | Mccoy`s5A+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1296LUC | SKOV3/ddp/LUC | 人卵巢癌細(xì)胞+耐順鉑SKOV3/ddp/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | Mccoy`s5A+10%FBS+1%P/S貼壁+ddp9.341ug/ml |
| GT1297LUC | smmc7721/LUC | 人肝癌細(xì)胞smmc7721/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S |
| GT1298LUC | SNB19/LUC | 人腦膠質(zhì)瘤SNB19/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1299LUC | snu1/LUC | 人胃癌細(xì)胞snu1/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10FBS+1%L-谷氨酰胺+1%丙酮酸鈉 |
| GT1300LUC | Snu182/LUC | 人肝癌細(xì)胞Snu182/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+20%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%丙酮酸鈉+1%P/S |
| GT1301LUC | SNU398/LUC | 人肝癌細(xì)胞SNU398/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁+懸浮 |
| GT1302LUC | SUDHL10/LUC | 人彌漫大B淋巴瘤細(xì)胞SUDHL10/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%丙酮酸鈉+1%P/S懸浮生長(zhǎng) |
| GT1303LUC | SUDHL4/LUC | 人彌漫大B淋巴瘤細(xì)胞SUDHL4/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%丙酮酸鈉+1%P/S懸浮生長(zhǎng) |
| GT1304LUC | SUDHL6/LUC | 人彌漫大B淋巴瘤細(xì)胞SUDHL6/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%丙酮酸鈉+1%P/S懸浮生長(zhǎng) |
| GT1305LUC | svhuc1/LUC | 人膀胱上皮細(xì)胞svhuc1/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | F12K+10%FBS+1%PS |
| GT1306LUC | SW1116/LUC | 人結(jié)腸腺癌細(xì)胞SW1116/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | L15+10%FBS+1%P/S貼壁生長(zhǎng)速度慢，80%要傳代或凍存，消化時(shí)間約5~15min |
| GT1307LUC | sw13/LUC | 人腎上腺皮質(zhì)小細(xì)胞癌細(xì)胞sw13/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | L15+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1308LUC | sw1353/LUC | 人軟骨肉瘤細(xì)胞sw1353/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | L15+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1309LUC | SW1990/LUC | 人胰腺癌細(xì)胞SW1990/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | L15+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1310LUC | SW48/LUC | 人結(jié)腸腺癌細(xì)胞SW48/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM+10%FBS+1%P/S貼壁生長(zhǎng) |
| GT1311LUC | sw480/LUC | 人結(jié)腸腺癌細(xì)胞sw480/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | L15+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1312LUC | SW579/LUC | 人甲狀腺癌細(xì)胞SW579/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | L15+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1313LUC | SW620/LUC | 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞SW620/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | L15+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1314LUC | SW6205/Fu/LUC | 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞氟尿嘧啶耐藥株SW6205/Fu/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | L15+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1315LUC | SW780/LUC | 人膀胱移行細(xì)胞癌SW780/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | L15+10%FBS+1%P/S |
| GT1316LUC | SW948/LUC | 人結(jié)腸腺癌細(xì)胞SW948/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | L15+10%FBS+1%P/S貼壁生長(zhǎng) |
| GT1317LUC | SW982/LUC | 人滑膜肉瘤細(xì)胞SW982/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | L15+10%FBS+1%P/S |
| GT1318LUC | T2(174xcemT2)/LUC | 人淋巴母細(xì)胞T2(174xcem.T2)/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S |
| GT1319LUC | T24/LUC | 人膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞T24/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | MACOY'S5A+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1320LUC | T47D/LUC | 人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞（非三陰）Her2陰性，ER陽性。T47D/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
| GT1321LUC | T98G/LUC | 人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤T98G/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | MEM+10%FBS+1%P/S |
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