細(xì)胞名稱：人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細(xì)胞NK92/LUC(帶熒光素酶)
細(xì)胞代次：P4
細(xì)胞規(guī)格：T25瓶（包郵）/2冷凍管（需加干冰運(yùn)輸費(fèi)）
細(xì)胞凍存：無血清凍存液
細(xì)胞傳代：第一次建議1:2
細(xì)胞收到后處理
培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是運(yùn)輸細(xì)胞的最好辦法。收到細(xì)胞用75%酒精噴灑整個(gè)細(xì)胞瓶，消毒后放到超凈臺(tái)內(nèi)嚴(yán)格無菌操作，將細(xì)胞瓶放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中靜置3-4小時(shí)以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)后再做處理。顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存（最好40x,100x,200x各一張），前三天照片是重要售后依據(jù)，不提供照片默認(rèn)收到狀態(tài)良好。（換液后將瓶蓋擰松）
人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細(xì)胞NK92/LUC(帶熒光素酶)，培養(yǎng)步驟
a、細(xì)胞傳代：如果未超過80%匯合度時(shí)，將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中，留5ml完全培養(yǎng)基，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)；如果細(xì)胞密度超80%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)，傳代具體步驟如下：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液約1-2ml至培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上完全培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞，使之完全脫落后吸出，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL完全培養(yǎng)基重懸。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2的比例進(jìn)行分瓶傳代（兩個(gè)T25瓶），補(bǔ)充新的完全培養(yǎng)基至5-8ml/瓶，最后放入到37℃、5%CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
b、細(xì)胞凍存：
1、細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí)，棄T25培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后加入5ml完全培養(yǎng)液終止消化，再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1000rpm離心 5min；
3、 棄上清，沉淀細(xì)胞加入1ml的雅吉生物無血清凍存液（貨號(hào)：C7001），混勻后加入凍存管中。
4、 將凍存細(xì)胞直接放入-80℃冰箱即可，如后期要將細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮罐中，則需在-80℃冰箱 中存放24小時(shí)以上再轉(zhuǎn)入液氮罐中。
C、細(xì)胞復(fù)蘇：
1、從液氮中取出細(xì)胞凍存管（注意佩戴防護(hù)面具），快速將其置入 37℃水浴中解凍， 直至凍存管中無結(jié)晶，然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁；
2、將凍存管中的細(xì)胞移至含 5ml 完全培養(yǎng)基的15ml離心管中，1000rpm離心5min；
3、棄上清，沉淀用5ml完全培養(yǎng)基重懸，接種至T25培養(yǎng)瓶，放于37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4、第二天，換用新鮮完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
注意事項(xiàng)：有些細(xì)胞貼壁不牢，在運(yùn)輸過程中容易發(fā)生細(xì)胞脫落，這是正常現(xiàn)象。如脫離較多可將培養(yǎng)瓶所有培養(yǎng)液收集至離心管，1000rpm離心5min，收集上清作過渡培養(yǎng)（后期對(duì)比培養(yǎng)），沉淀加入胰酶1-2ml，輕輕吹打，重懸，消化1-2分鐘后，加5ml完全培養(yǎng)基終止反應(yīng)。再離心，棄上清，加1-2ml完全培養(yǎng)基重懸。然后按1:2比例進(jìn)行分瓶傳代（兩個(gè)T25），補(bǔ)充新的完全培養(yǎng)基至5-8ml/瓶，最后放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細(xì)胞NK92/LUC(帶熒光素酶),售后服務(wù)
1. 細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問題，細(xì)胞丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴(yán)重漏液等，重發(fā)；
2. 細(xì)胞污染問題，請(qǐng)?jiān)谑盏疆a(chǎn)品48小時(shí)內(nèi)，給我們提出真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，核實(shí)后重發(fā)；
3. 常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置24小時(shí)后，干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇后24小時(shí)后，絕大多數(shù)細(xì)胞未存活，（需提供真實(shí)清晰的細(xì)胞狀態(tài)照片），重發(fā)；
4. 干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇后24小時(shí)后或常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置4小時(shí)候并且未開封，出現(xiàn)污染，重發(fā)；
5. 細(xì)胞活性問題，請(qǐng)?jiān)谑盏疆a(chǎn)品7天內(nèi)給我們提出真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，用臺(tái)盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力，核實(shí)后予重發(fā)；
6. 細(xì)胞收到當(dāng)天以及第2,3天請(qǐng)拍照，3天未告知的，視為產(chǎn)品合格。4-7天內(nèi)出現(xiàn)問題有提供收到細(xì)胞前3天照片和細(xì)胞出現(xiàn)問題時(shí)照片以及細(xì)胞相關(guān)操作的詳細(xì)步驟的，并跟技術(shù)人員溝通的，由技術(shù)人員判定為我方責(zé)任的，重發(fā)。技術(shù)人員判定為雙方承擔(dān)責(zé)任的由雙方進(jìn)行協(xié)商處理或者按合同價(jià)的50%收費(fèi)重發(fā)。
2）細(xì)胞出現(xiàn)問題，不予以重發(fā)的情況有哪些？
1. 客戶造成細(xì)胞污染，不重發(fā)；
2. 客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
3. 非本庫推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
4. 細(xì)胞狀態(tài)不好，未提供細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的，不重發(fā)；
5. 細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的，不重發(fā)；
6. 細(xì)胞收到2天內(nèi)，未告知，不重發(fā)；
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| GT1210LUC | MV411/LUC | 人慢性骨髓單核細(xì)胞性白血病MV411/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | IMDM+10%FBS |
| GT1211LUC | NALM6/LUC | 人前B急性淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞NALM6/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S懸浮 |
| GT1212LUC | NCCIT/LUC | 人畸胎癌細(xì)胞NCCIT/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640（含NaHCO31.5g/L)+10%FBS+1%PS貼壁 |
| GT1213LUC | NCIH1299/LUC | 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCIH1299/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%（10mM）HEPES+1%丙酮酸鈉+1%P/S貼壁 |
| GT1214LUC | NCIH1395/LUC | 人肺腺癌細(xì)胞NCIH1395/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S+1%丙酮酸鈉+1%L-谷氨酰胺貼壁 |
| GT1215LUC | NCIH1437/LUC | 人肺腺癌細(xì)胞NCIH1437/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%丙酮酸鈉+1%hepes貼壁 |
| GT1216LUC | NCIH146/LUC | 人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCIH146/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S懸浮 |
| GT1217LUC | NCIH157/LUC | 人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞NCIH157/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1218LUC | NCIH1650/LUC | 人肺支氣管癌細(xì)胞/微浸潤肺腺癌NCIH1650/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%丙酮酸鈉+1%PS |
| GT1219LUC | NCIH1688/LUC | 人經(jīng)典小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCIH1688/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+20%FBS+1%P/S細(xì)胞漲的慢2-3周發(fā)貨貼壁生長 |
| GT1220LUC | NCIH1703/LUC | 人肺癌細(xì)胞/鱗癌NCIH1703/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1221LUC | NCIH1944/LUC | 人肺腺癌細(xì)胞NCIH1944/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1222LUC | NCIH1975/LUC | 人肺腺癌細(xì)胞NCIH1975/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1223LUC | NCIH2009/LUC | 人肺腺癌細(xì)胞NCIH2009/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM/F12+5%FBS+5ug/ml胰島素+0.01mg/ml轉(zhuǎn)鐵蛋白+30Nm亞硒酸鈉+3.625ng/ml氫化可地松+4.5mM
L-谷氨酰胺+PS |
| GT1224LUC | NCIH2126/LUC | 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞/巨細(xì)胞肺癌NCIH2126/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+2mML-Gln+1mM丙酮酸鈉+1%P/S |
| GT1225LUC | NCIH2228/LUC | 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCIH2228/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS |
| GT1226LUC | NCIH226/LUC | 人肺鱗癌細(xì)胞NCIH226/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1227LUC | NCIH23/LUC | 人肺腺癌細(xì)胞NCIH23/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S+1%L-谷氨酰胺+1%丙酮酸鈉貼壁 |
| GT1228LUC | NCIH2452/LUC | 人胸膜雙相間皮瘤細(xì)胞NCIH2452/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S |
| GT1229LUC | NCIH292/LUC | 人肺癌細(xì)胞(淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移)/肺粘液表皮樣癌NCIH292/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1230LUC | NCIH295R/LUC | 人腎上腺皮質(zhì)細(xì)腺癌細(xì)胞NCIH295R/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | D/F12+10%FBS+1%ITS+5.35ug/ml亞油酸+1%P/S |
| GT1231LUC | NCIH358/LUC | 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞P53缺失NCIH358/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1232LUC | NCIH446/LUC | 人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCIH446/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%PS多數(shù)貼壁，少量懸浮 |
| GT1233LUC | NCIH460/LUC | 人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCIH460/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S+1%L-谷氨酰胺+1%丙酮酸鈉貼壁 |
| GT1234LUC | NCIH520/LUC | 人肺鱗癌細(xì)胞NCIH520/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1235LUC | NCIH524/LUC | 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCIH524/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1236LUC | NCIH661/LUC | 人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCIH661/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1237LUC | NCIH82/LUC | 人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCIH82/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%丙酮酸鈉+1%P/S懸浮生長 |
| GT1238LUC | NCIH929/LUC | 人骨髓瘤細(xì)胞NCIH929/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+0.05mMβ-Me（巰基乙醇）+1%P/S |
| GT1239LUC | NCIN87/LUC | 人胃腺癌細(xì)胞NCIN87/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S+1%L-谷氨酰胺+1%丙酮酸鈉貼壁 |
| GT1240LUC | ncm460/LUC | 人正常結(jié)腸上皮細(xì)胞ncm460/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
| GT1241LUC | NK92/LUC | 人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細(xì)胞NK92/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | MEMα+0.2mMInositol（肌醇）+0.1mMβ-mercaptoethanol（β巰基乙醇）β+0.02mMFolicAcid（葉酸）+100-200U/mLrecombinantIL-2白介素+12.5%HS(HYCLONE馬血清）+12.5%FBS+1%P/S |
| GT1242LUC | NK92MI/LUC | 人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細(xì)胞NK92MI/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | MEMα+肌醇0.2mM+β-巰基乙醇0.1mM+葉酸0.02mM+馬血清12.5%+FBS12.5%+P/S1% |
| GT1243LUC | NOZ/LUC | 人膽囊癌細(xì)胞NOZ/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1244LUC | NP69/LUC | 人鼻咽黏膜上皮細(xì)胞NP69/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 角質(zhì)形成細(xì)胞培養(yǎng)體系（BW-010） |
| GT1245LUC | NPCHK1/LUC | 人鼻咽癌細(xì)胞系NPCHK1/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1246LUC | Nthyori31/LUC | 人甲狀腺正常細(xì)胞Nthyori31/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1247LUC | OCM1A/LUC | 人眼膜絡(luò)黑色素瘤細(xì)胞OCM1A/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
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