細胞名稱：人大細胞肺癌細胞NCIH460/LUC(帶熒光素酶)
細胞代次：P4
細胞規(guī)格：T25瓶（包郵）/2冷凍管（需加干冰運輸費）
細胞凍存：無血清凍存液
細胞傳代：第一次建議1:2
細胞收到后處理
培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是運輸細胞的最好辦法。收到細胞用75%酒精噴灑整個細胞瓶，消毒后放到超凈臺內(nèi)嚴格無菌操作，將細胞瓶放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中靜置3-4小時以穩(wěn)定細胞狀態(tài)后再做處理。顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照保存（最好40x,100x,200x各一張），前三天照片是重要售后依據(jù)，不提供照片默認收到狀態(tài)良好。（換液后將瓶蓋擰松）
人大細胞肺癌細胞NCIH460/LUC(帶熒光素酶)，培養(yǎng)步驟
a、細胞傳代：如果未超過80%匯合度時，將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中，留5ml完全培養(yǎng)基，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)；如果細胞密度超80%，即可進行傳代培養(yǎng)，傳代具體步驟如下：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液約1-2ml至培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上完全培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細胞，使之完全脫落后吸出，然后將懸液轉移至15ml離心管中，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL完全培養(yǎng)基重懸。
4. 將細胞懸液按1：2的比例進行分瓶傳代（兩個T25瓶），補充新的完全培養(yǎng)基至5-8ml/瓶，最后放入到37℃、5%CO2的細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
b、細胞凍存：
1、細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時，棄T25培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細胞一次；
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后加入5ml完全培養(yǎng)液終止消化，再輕輕吹打細胞使之脫落，然后將懸液轉移至15ml離心管中，1000rpm離心 5min；
3、 棄上清，沉淀細胞加入1ml的雅吉生物無血清凍存液（貨號：C7001），混勻后加入凍存管中。
4、 將凍存細胞直接放入-80℃冰箱即可，如后期要將細胞轉入液氮罐中，則需在-80℃冰箱 中存放24小時以上再轉入液氮罐中。
C、細胞復蘇：
1、從液氮中取出細胞凍存管（注意佩戴防護面具），快速將其置入 37℃水浴中解凍， 直至凍存管中無結晶，然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁；
2、將凍存管中的細胞移至含 5ml 完全培養(yǎng)基的15ml離心管中，1000rpm離心5min；
3、棄上清，沉淀用5ml完全培養(yǎng)基重懸，接種至T25培養(yǎng)瓶，放于37℃,5%CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4、第二天，換用新鮮完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
注意事項：有些細胞貼壁不牢，在運輸過程中容易發(fā)生細胞脫落，這是正?，F(xiàn)象。如脫離較多可將培養(yǎng)瓶所有培養(yǎng)液收集至離心管，1000rpm離心5min，收集上清作過渡培養(yǎng)（后期對比培養(yǎng)），沉淀加入胰酶1-2ml，輕輕吹打，重懸，消化1-2分鐘后，加5ml完全培養(yǎng)基終止反應。再離心，棄上清，加1-2ml完全培養(yǎng)基重懸。然后按1:2比例進行分瓶傳代（兩個T25），補充新的完全培養(yǎng)基至5-8ml/瓶，最后放入37℃,5%CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
人大細胞肺癌細胞NCIH460/LUC(帶熒光素酶),售后服務
1. 細胞運輸途中遭遇的各種問題，細胞丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴重漏液等，重發(fā)；
2. 細胞污染問題，請在收到產(chǎn)品48小時內(nèi)，給我們提出真實的實驗結果，核實后重發(fā)；
3. 常溫發(fā)貨的細胞靜置24小時后，干冰凍存發(fā)貨的細胞復蘇后24小時后，絕大多數(shù)細胞未存活，（需提供真實清晰的細胞狀態(tài)照片），重發(fā)；
4. 干冰凍存發(fā)貨的細胞復蘇后24小時后或常溫發(fā)貨的細胞靜置4小時候并且未開封，出現(xiàn)污染，重發(fā)；
5. 細胞活性問題，請在收到產(chǎn)品7天內(nèi)給我們提出真實的實驗結果，用臺盼藍染色法鑒定細胞活力，核實后予重發(fā)；
6. 細胞收到當天以及第2,3天請拍照，3天未告知的，視為產(chǎn)品合格。4-7天內(nèi)出現(xiàn)問題有提供收到細胞前3天照片和細胞出現(xiàn)問題時照片以及細胞相關操作的詳細步驟的，并跟技術人員溝通的，由技術人員判定為我方責任的，重發(fā)。技術人員判定為雙方承擔責任的由雙方進行協(xié)商處理或者按合同價的50%收費重發(fā)。
2）細胞出現(xiàn)問題，不予以重發(fā)的情況有哪些？
1. 客戶造成細胞污染，不重發(fā)；
2. 客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
3. 非本庫推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
4. 細胞狀態(tài)不好，未提供細胞培養(yǎng)前3天照片的，不重發(fā)；
5. 細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的，不重發(fā)；
6. 細胞收到2天內(nèi)，未告知，不重發(fā)；
更多相關產(chǎn)品如下：人大細胞肺癌細胞NCIH460/LUC(帶熒光素酶)
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| GT1214LUC | NCIH1395/LUC | 人肺腺癌細胞NCIH1395/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S+1%丙酮酸鈉+1%L-谷氨酰胺貼壁 |
| GT1215LUC | NCIH1437/LUC | 人肺腺癌細胞NCIH1437/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%丙酮酸鈉+1%hepes貼壁 |
| GT1216LUC | NCIH146/LUC | 人小細胞肺癌細胞NCIH146/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S懸浮 |
| GT1217LUC | NCIH157/LUC | 人非小細胞肺腺癌細胞NCIH157/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1218LUC | NCIH1650/LUC | 人肺支氣管癌細胞/微浸潤肺腺癌NCIH1650/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%丙酮酸鈉+1%PS |
| GT1219LUC | NCIH1688/LUC | 人經(jīng)典小細胞肺癌細胞NCIH1688/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+20%FBS+1%P/S細胞漲的慢2-3周發(fā)貨貼壁生長 |
| GT1220LUC | NCIH1703/LUC | 人肺癌細胞/鱗癌NCIH1703/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1221LUC | NCIH1944/LUC | 人肺腺癌細胞NCIH1944/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1222LUC | NCIH1975/LUC | 人肺腺癌細胞NCIH1975/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1223LUC | NCIH2009/LUC | 人肺腺癌細胞NCIH2009/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM/F12+5%FBS+5ug/ml胰島素+0.01mg/ml轉鐵蛋白+30Nm亞硒酸鈉+3.625ng/ml氫化可地松+4.5mM
L-谷氨酰胺+PS |
| GT1224LUC | NCIH2126/LUC | 人非小細胞肺癌細胞/巨細胞肺癌NCIH2126/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+2mML-Gln+1mM丙酮酸鈉+1%P/S |
| GT1225LUC | NCIH2228/LUC | 人非小細胞肺癌細胞NCIH2228/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS |
| GT1226LUC | NCIH226/LUC | 人肺鱗癌細胞NCIH226/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1227LUC | NCIH23/LUC | 人肺腺癌細胞NCIH23/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S+1%L-谷氨酰胺+1%丙酮酸鈉貼壁 |
| GT1228LUC | NCIH2452/LUC | 人胸膜雙相間皮瘤細胞NCIH2452/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S |
| GT1229LUC | NCIH292/LUC | 人肺癌細胞(淋巴結轉移)/肺粘液表皮樣癌NCIH292/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1230LUC | NCIH295R/LUC | 人腎上腺皮質細腺癌細胞NCIH295R/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | D/F12+10%FBS+1%ITS+5.35ug/ml亞油酸+1%P/S |
| GT1231LUC | NCIH358/LUC | 人非小細胞肺癌細胞P53缺失NCIH358/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1232LUC | NCIH446/LUC | 人小細胞肺癌細胞NCIH446/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%PS多數(shù)貼壁，少量懸浮 |
| GT1233LUC | NCIH460/LUC | 人大細胞肺癌細胞NCIH460/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S+1%L-谷氨酰胺+1%丙酮酸鈉貼壁 |
| GT1234LUC | NCIH520/LUC | 人肺鱗癌細胞NCIH520/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1235LUC | NCIH524/LUC | 人非小細胞肺癌細胞NCIH524/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1236LUC | NCIH661/LUC | 人大細胞肺癌細胞NCIH661/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1237LUC | NCIH82/LUC | 人小細胞肺癌細胞NCIH82/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%丙酮酸鈉+1%P/S懸浮生長 |
| GT1238LUC | NCIH929/LUC | 人骨髓瘤細胞NCIH929/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+0.05mMβ-Me（巰基乙醇）+1%P/S |
| GT1239LUC | NCIN87/LUC | 人胃腺癌細胞NCIN87/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S+1%L-谷氨酰胺+1%丙酮酸鈉貼壁 |
| GT1240LUC | ncm460/LUC | 人正常結腸上皮細胞ncm460/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
| GT1241LUC | NK92/LUC | 人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細胞NK92/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | MEMα+0.2mMInositol（肌醇）+0.1mMβ-mercaptoethanol（β巰基乙醇）β+0.02mMFolicAcid（葉酸）+100-200U/mLrecombinantIL-2白介素+12.5%HS(HYCLONE馬血清）+12.5%FBS+1%P/S |
| GT1242LUC | NK92MI/LUC | 人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細胞NK92MI/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | MEMα+肌醇0.2mM+β-巰基乙醇0.1mM+葉酸0.02mM+馬血清12.5%+FBS12.5%+P/S1% |
| GT1243LUC | NOZ/LUC | 人膽囊癌細胞NOZ/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1244LUC | NP69/LUC | 人鼻咽黏膜上皮細胞NP69/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 角質形成細胞培養(yǎng)體系（BW-010） |
| GT1245LUC | NPCHK1/LUC | 人鼻咽癌細胞系NPCHK1/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1246LUC | Nthyori31/LUC | 人甲狀腺正常細胞Nthyori31/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1247LUC | OCM1A/LUC | 人眼膜絡黑色素瘤細胞OCM1A/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
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