hRMECs(人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞),培養(yǎng)條件具體詳情可以咨詢我司客服
凍存條件 | 無血清凍存液(貨號:C7001)。 |
傳代方法 | 第一次建議1:2傳代 | 傳代情況 | 2天換液 |
備注 | 建議同時購買完培,同時購買非常優(yōu)惠 |
細胞收到后處理
培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是運輸細胞的最好辦法。收到細胞用75%酒精噴灑整個細胞瓶,消毒后放到超凈臺內(nèi)嚴格無菌操作,將細胞瓶放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中靜置3-4小時以穩(wěn)定細胞狀態(tài)后再做處理。顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照保存(最好40x,100x,200x各一張),前三天照片是重要售后依據(jù),不提供照片默認收到狀態(tài)良好。(換液后將瓶蓋擰松)
hRMECs(人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞),培養(yǎng)步驟
a、細胞傳代:如果未超過80%匯合度時,將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中,留5ml完全培養(yǎng)基,放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng);如果細胞密度超80%,即可進行傳代培養(yǎng),傳代具體步驟如下:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液約1-2ml至培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上完全培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細胞,使之完全脫落后吸出,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL完全培養(yǎng)基重懸。
4. 將細胞懸液按1:2的比例進行分瓶傳代(兩個T25瓶),補充新的完全培養(yǎng)基至5-8ml/瓶,最后放入到37℃、5%CO2的細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
b、細胞凍存:
1、細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時,棄T25培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細胞一次;
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后加入5ml完全培養(yǎng)液終止消化,再輕輕吹打細胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1000rpm離心 5min;
3、 棄上清,沉淀細胞加入1ml的雅吉生物無血清凍存液(貨號:C7001),混勻后加入凍存管中。
4、 將凍存細胞直接放入-80℃冰箱即可,如后期要將細胞轉(zhuǎn)入液氮罐中,則需在-80℃冰箱 中存放24小時以上再轉(zhuǎn)入液氮罐中。
C、細胞復(fù)蘇:
1、從液氮中取出細胞凍存管(注意佩戴防護面具),快速將其置入 37℃水浴中解凍, 直至凍存管中無結(jié)晶,然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁;
2、將凍存管中的細胞移至含 5ml 完全培養(yǎng)基的15ml離心管中,1000rpm離心5min;
3、棄上清,沉淀用5ml完全培養(yǎng)基重懸,接種至T25培養(yǎng)瓶,放于37℃,5%CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4、第二天,換用新鮮完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
注意事項:有些細胞貼壁不牢,在運輸過程中容易發(fā)生細胞脫落,這是正?,F(xiàn)象。如脫離較多可將培養(yǎng)瓶所有培養(yǎng)液收集至離心管,1000rpm離心5min,收集上清作過渡培養(yǎng)(后期對比培養(yǎng)),沉淀加入胰酶1-2ml,輕輕吹打,重懸,消化1-2分鐘后,加5ml完全培養(yǎng)基終止反應(yīng)。再離心,棄上清,加1-2ml完全培養(yǎng)基重懸。然后按1:2比例進行分瓶傳代(兩個T25),補充新的完全培養(yǎng)基至5-8ml/瓶,最后放入37℃,5%CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
hRMECs(人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞),款后條款:
1)細胞出現(xiàn)問題,可重發(fā)的情況有哪些?判定標(biāo)準是什么?
1. 細胞運輸途中遭遇的各種問題,細胞丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴重漏液等,重發(fā);
2. 細胞污染問題,請在收到產(chǎn)品48小時內(nèi),給我們提出真實的實驗結(jié)果,核實后重發(fā);
3. 常溫發(fā)貨的細胞靜置24小時后,干冰凍存發(fā)貨的細胞復(fù)蘇后24小時后,絕大多數(shù)細胞未存活,(需提供真實清晰的細胞狀態(tài)照片),重發(fā);
4. 干冰凍存發(fā)貨的細胞復(fù)蘇后24小時后或常溫發(fā)貨的細胞靜置4小時候并且未開封,出現(xiàn)污染,重發(fā);
5. 細胞活性問題,請在收到產(chǎn)品7天內(nèi)給我們提出真實的實驗結(jié)果,用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,核實后予重發(fā);
6. 細胞收到當(dāng)天以及第2,3天請拍照,3天未告知的,視為產(chǎn)品合格。4-7天內(nèi)出現(xiàn)問題有提供收到細胞前3天照片和細胞出現(xiàn)問題時照片以及細胞相關(guān)操作的詳細步驟的,并跟技術(shù)人員溝通的,由技術(shù)人員判定為我方責(zé)任的,重發(fā)。技術(shù)人員判定為雙方承擔(dān)責(zé)任的由雙方進行協(xié)商處理或者按合同價的50%收費重發(fā)。
2)細胞出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
1. 客戶造成細胞污染,不重發(fā);
2. 客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
3. 非本庫推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
4. 細胞狀態(tài)不好,未提供細胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
5. 細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
6. 細胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);
歡迎新老客戶咨詢訂購:hRMECs(人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞)
更多細胞可以咨詢我司客服:
GT2174C | CCCHPF1 | 人胚肺成纖維細胞CCC-HPF-1 | 3000 | DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterG/LUCose)20%FBS |
GT2175C | MDAMB134VI | 人乳腺導(dǎo)管癌細胞MDA-MB-134-VI | 2800 | Leibovitz'sL-15+20%FBS無二氧化碳培養(yǎng) |
GT2176C | A549/ddp | 人肺腺癌耐順鉑株A549/ddp | 2500 | RPMI1640+10%FBS+1ug/ml/ddp |
GT2177C | 16HBEHBE135E6E7 | HBE135-E6E7人支氣管上皮樣細胞16HBE(ATCC?CRL-2741) | 2500 | KM培養(yǎng)基 |
GT2178C | HBEHBE135E6E7 | HBE135-E6E7人支氣管上皮樣細胞HBE(ATCC?CRL-2741) | 2500 | KM培養(yǎng)基 |
GT2179C | hRMECs | hRMECs(人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞) | 2500 | ECM專用培養(yǎng)基 |
GT2180C | PUMCHUVECT1 | SV40T轉(zhuǎn)化人臍靜脈內(nèi)皮細胞PUMC-HUVEC-T1 | 2500 | DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterG/LUCose)10%FBS40μU/L胰島素+40U/ml肝素+1%NEAA |
GT2181C | HMC | 人腎小球系膜細胞HMC | 2200 | DMEM(高糖)+10%FBS |
GT2182C | U266 | 人骨髓瘤細胞U266 | 2000 | RPMI1640+10%FBS |
GT2183C | OCM1 | OCM1人眼脈絡(luò)黑色素瘤細胞 | 2000 | DMEM(高糖)+10%FBS |
GT2184C | OV1063 | 人卵巢上皮細胞癌細胞OV-1063 | 2000 | RPMI1640(w/oHepes)10%FBS |
GT2185C | HELF | 人胚肺成纖維細胞HELF | 2000 | DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterG/LUCose)10%FBS |
GT2186C | T2 | 人淋巴母細胞T2(174×CEM.T2) | 1800 | RPMI1640+10%FBS |
GT2187C | A375S2 | 人黑色素瘤細胞A375.S2 | 1800 | DMEM/F12+10%FBS(GIBCO) |
GT2188C | HSF | 人皮膚成纖維細胞HSF | 1800 | DMEM(高糖)+15%FBS澳洲胎牛 |
GT2189C | EC9706 | 人食管癌細胞EC9706 | 1800 | DMEM(高糖)+10%FBS |
GT2190C | MKN74 | 人胃癌細胞MKN-74 | 1800 | RPMI1640+10%FBS |
GT2191C | D407 | D407人視網(wǎng)膜色素上皮細胞 | 1800 | DMEM+10%FBS |
GT2192C | ARO | 人甲狀腺癌細胞ARO | 1800 | 1640+10%FBS |
GT2193C | 293E | 穩(wěn)定表達EBNA1的人胚腎細胞293E | 1800 | IMDM:Iscove'sModiefiedDulbecco'sMedium10%FBS |
GT2194C | TE2 | TE-2人食管癌細胞 | 1800 | DMEM+10%FBS |
GT2195C | TE3 | TE-3人食管癌細胞 | 1800 | DMEM+10%FBS |
GT2196C | TE7 | TE-7人食管癌細胞 | 1800 | DMEM+10%FBS |
GT2197C | 293FT | 表達SV40T抗原人胚腎上皮細胞293FT | 1700 | DMEM(HG)+500ug/mlG418+10%FBS |
GT2198C | 143B | 人骨肉瘤細胞143B | 1700 | MEMwith0.015mg/ml5-bromo-2'-deoxyuridine,90%+10%FBS |
GT2199C | 8305C | 人甲狀腺未分化癌8305C | 1700 | EMEM+2mMGlutamine+1%NEAA+10%FBS. |
GT2200C | 293c18 | 人胚腎細胞293c18 | 1700 | DMEM-H+10%FBS |
GT2201C | GP293 | 人胚腎細胞GP293 | 1700 | DMEM(高糖)+10%FBS |
GT2202C | 58F | 鼻咽癌細胞株5-8F | 1700 | 1640+10%FBS |
GT2203C | PC3M | PC-3M人前列腺癌細胞 | 1700 | 1640+10%FBS |
GT2204C | TE354T | TE354.T人皮膚基底細胞癌 | 1700 | DMEM+10%FBS |
GT2205C | 610b | 鼻咽癌細胞株6-10b | 1700 | 1640+10%FBS |
GT2206C | TU686 | 人喉癌細胞TU686 | 1700 | DMEM+10%FBS |
GT2207C | NHE1 | NHE-1人鼻咽癌細胞 | 1700 | RPMI1640+10%FBS |
GT2208C | HPAFII | 人胰腺癌細胞HPAF-II | 1600 | MEM+10%FBS |
GT2209C | T84 | 人結(jié)腸腺癌肺轉(zhuǎn)移細胞T84 | 1600 | A1:1mixtureofHam'sF12mediumandDulbecco'smodifiedEagle'smediumwith2.5mML-glutamine,95%fetalbovineserum,5%
|
GT2210C | BEL7404 | 人肝癌細胞BEL-7404 | 1500 | RPMI1640+10%FBS |
GT2211C | SPCA1 | 人肺腺癌細胞SPC-A-1 | 1500 | DMEM(高糖)+10%FBS |
GT2212C | EJ | 人膀胱癌細胞EJ | 1500 | MEM培養(yǎng)基(GIBCO,添加NaHCO31.5g/L,SodiumPyruvate0.11g/L),90%優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。氣相:空氣,95%二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度。
|
GT2213C | U373 | 人膠質(zhì)瘤細胞U373U251交叉污染 | 1500 | RPMI1640+10%FBS |
GT2214C | 769P | 人腎癌細胞769-P | 1500 | RPMI-1640+10%FBS |
GT2215C | KG1 | 急性髓系細胞白血病細胞KG-1 | 1500 | IMDM+20%FBS |
GT2216C | KATOIII | 人胃癌細胞KATOIII | 1500 | IMDM+20%FBS |
GT2217C | 11B4PANC1 | 人胰腺癌細胞1.1B4/PANC-1 | 1500 | DMEM-H+10%FBS |
關(guān)鍵字: hRMECs(人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞);hRMECs(人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞);hRMECs(人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞);ATCC細胞;ATCC官網(wǎng);
上海晶風(fēng)生物科技有限公司擁有一個蓬勃朝氣的年輕團隊,是一家面向生命科學(xué)領(lǐng)域,提供科研類試劑、耗材、儀器、技術(shù)服務(wù)的生物企業(yè)。包括分子生物學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、細胞學(xué)等 。旗下?lián)碛小熬эL(fēng)生物”、“GTX” 品牌。通過公司各部門員工的共同努力在行業(yè)內(nèi)享有一定的聲譽,深得新老客戶厚愛。本著“服務(wù)、誠信、進取”的精神,堅持溝通你我,創(chuàng)新服務(wù),為國內(nèi)外廣大用戶提供產(chǎn)品和服務(wù)。