人正常肝細(xì)胞THLE2,培養(yǎng)條件具體詳情可以咨詢我司客服
凍存條件 | 無血清凍存液(貨號(hào):C7001)。 |
傳代方法 | 第一次建議1:2傳代 | 傳代情況 | 2天換液 |
備注 | 建議同時(shí)購買完培,同時(shí)購買非常優(yōu)惠 |
細(xì)胞收到后處理
培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是運(yùn)輸細(xì)胞的最好辦法。收到細(xì)胞用75%酒精噴灑整個(gè)細(xì)胞瓶,消毒后放到超凈臺(tái)內(nèi)嚴(yán)格無菌操作,將細(xì)胞瓶放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中靜置3-4小時(shí)以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)后再做處理。顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存(最好40x,100x,200x各一張),前三天照片是重要售后依據(jù),不提供照片默認(rèn)收到狀態(tài)良好。(換液后將瓶蓋擰松)
人正常肝細(xì)胞THLE2,培養(yǎng)步驟
a、細(xì)胞傳代:如果未超過80%匯合度時(shí),將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中,留5ml完全培養(yǎng)基,放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng);如果細(xì)胞密度超80%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),傳代具體步驟如下:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液約1-2ml至培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上完全培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,使之完全脫落后吸出,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL完全培養(yǎng)基重懸。
4. 將細(xì)胞懸液按1:2的比例進(jìn)行分瓶傳代(兩個(gè)T25瓶),補(bǔ)充新的完全培養(yǎng)基至5-8ml/瓶,最后放入到37℃、5%CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
b、細(xì)胞凍存:
1、細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí),棄T25培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入5ml完全培養(yǎng)液終止消化,再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1000rpm離心 5min;
3、 棄上清,沉淀細(xì)胞加入1ml的雅吉生物無血清凍存液(貨號(hào):C7001),混勻后加入凍存管中。
4、 將凍存細(xì)胞直接放入-80℃冰箱即可,如后期要將細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮罐中,則需在-80℃冰箱 中存放24小時(shí)以上再轉(zhuǎn)入液氮罐中。
C、細(xì)胞復(fù)蘇:
1、從液氮中取出細(xì)胞凍存管(注意佩戴防護(hù)面具),快速將其置入 37℃水浴中解凍, 直至凍存管中無結(jié)晶,然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁;
2、將凍存管中的細(xì)胞移至含 5ml 完全培養(yǎng)基的15ml離心管中,1000rpm離心5min;
3、棄上清,沉淀用5ml完全培養(yǎng)基重懸,接種至T25培養(yǎng)瓶,放于37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4、第二天,換用新鮮完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
注意事項(xiàng):有些細(xì)胞貼壁不牢,在運(yùn)輸過程中容易發(fā)生細(xì)胞脫落,這是正?,F(xiàn)象。如脫離較多可將培養(yǎng)瓶所有培養(yǎng)液收集至離心管,1000rpm離心5min,收集上清作過渡培養(yǎng)(后期對(duì)比培養(yǎng)),沉淀加入胰酶1-2ml,輕輕吹打,重懸,消化1-2分鐘后,加5ml完全培養(yǎng)基終止反應(yīng)。再離心,棄上清,加1-2ml完全培養(yǎng)基重懸。然后按1:2比例進(jìn)行分瓶傳代(兩個(gè)T25),補(bǔ)充新的完全培養(yǎng)基至5-8ml/瓶,最后放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
人B淋巴母細(xì)胞HMy2.CIR,售后條款:
1)細(xì)胞出現(xiàn)問題,可重發(fā)的情況有哪些?判定標(biāo)準(zhǔn)是什么?
1. 細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問題,細(xì)胞丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴(yán)重漏液等,重發(fā);
2. 細(xì)胞污染問題,請(qǐng)?jiān)谑盏疆a(chǎn)品48小時(shí)內(nèi),給我們提出真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,核實(shí)后重發(fā);
3. 常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置24小時(shí)后,干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇后24小時(shí)后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,(需提供真實(shí)清晰的細(xì)胞狀態(tài)照片),重發(fā);
4. 干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇后24小時(shí)后或常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置4小時(shí)候并且未開封,出現(xiàn)污染,重發(fā);
5. 細(xì)胞活性問題,請(qǐng)?jiān)谑盏疆a(chǎn)品7天內(nèi)給我們提出真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,用臺(tái)盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力,核實(shí)后予重發(fā);
6. 細(xì)胞收到當(dāng)天以及第2,3天請(qǐng)拍照,3天未告知的,視為產(chǎn)品合格。4-7天內(nèi)出現(xiàn)問題有提供收到細(xì)胞前3天照片和細(xì)胞出現(xiàn)問題時(shí)照片以及細(xì)胞相關(guān)操作的詳細(xì)步驟的,并跟技術(shù)人員溝通的,由技術(shù)人員判定為我方責(zé)任的,重發(fā)。技術(shù)人員判定為雙方承擔(dān)責(zé)任的由雙方進(jìn)行協(xié)商處理或者按合同價(jià)的50%收費(fèi)重發(fā)。
2)細(xì)胞出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
1. 客戶造成細(xì)胞污染,不重發(fā);
2. 客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
3. 非本庫推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
4. 細(xì)胞狀態(tài)不好,未提供細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
5. 細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
6. 細(xì)胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);
歡迎新老客戶咨詢訂購:人B淋巴母細(xì)胞HMy2.CIR
更多細(xì)胞可以咨詢我司客服:
GT1355C | KTC1 | 人甲狀腺癌細(xì)胞KTC1 | 1500 | 1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%丙酮酸鈉+NEAA+1%P/S |
GT1356C | Karpas299 | 人間變性大細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞Karpas299 | 5000 | 1640+20%FBS+1%P/S |
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GT1358C | NCIH508 | 人結(jié)腸直腸腺癌細(xì)胞NCIH508 | 2000 | 1640+10%FBS+1%P/S |
GT1359C | SKNBE | 人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞SKNBE | 1800 | DMEM/F12+10%FBS+1%P/S |
GT1360C | LS1034 | 人結(jié)腸腺癌細(xì)胞LS1034 | 3000 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁生長 |
GT1361C | TCCSUP | 人膀胱癌細(xì)胞TCCSUP | 3000 | MEM+10%FBS+1%NEAA+1%P/S |
GT1362C | DMS114 | 人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞DMS114 | 1800 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1363C | TOV112D | 人上皮性卵巢癌細(xì)胞TOV112D | 1800 | 基礎(chǔ)培養(yǎng)基是1:1的MCDB105培養(yǎng)基(含最終濃度為1.5g/L碳酸氫鈉)和M199培養(yǎng)基(含最終濃度為2.2g/L碳酸氫鈉)的混合物,優(yōu)質(zhì)胎牛血清,15%;雙抗,1%。 |
GT1364C | C8166CD4 | 人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞C8166CD4 | 1800 | 1640+10%FBS+1%P/S+1%丙酮酸鈉+1%L-谷氨酰胺 |
GT1365C | HMy2CIR | 人B淋巴母細(xì)胞HMy2.CIR | 3000 | IMEM+10%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1367C | Ocut2C | 人甲狀腺癌細(xì)胞(未分化)Ocut2C | 3000 | DMEM+10%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1368C | COV434 | 人卵巢顆粒腫瘤細(xì)胞COV434 | 2500 | DMEM+10%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1369C | SNU387 | 人肝癌細(xì)胞SNU387 | 1800 | 1640+10%FBS |
GT1370C | UT7 | 人類原巨核細(xì)胞型白血病細(xì)胞UT7 | 3500 | RPMI1640(w/oHepes)10%FBS;5-7u/mlEpo或者RPM-1640+10%FBS,5ngMLGM-CSF, |
GT1371C | ACC3 | 人涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞-人瘤病毒相關(guān)性宮頸管腺癌ACC3 | 1500 | DMEM+10%FBS |
GT1372C | BE(2)M17 | 人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞BE(2)M17 | 1500 | DMEM/F12+10%FBS |
GT1373C | Hs865Sk | 人皮膚成纖維細(xì)胞(有限細(xì)胞系)Hs865.Sk | 3500 | DMEM(高糖)+10%FBS |
GT1374C | AD293 | 人胚腎細(xì)胞AD293 | 1800 | DMEM(高糖)+10%FBS |
GT1375C | GP2293 | 人胚腎上皮包裝細(xì)胞GP2293 | 1800 | DMEM(高糖)+10%FBS |
GT1376C | SKNAS | 人腦神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞SKNAS | 2000 | DMEMO.1mMNon-EssentialAminoAcids(NEAA)fetalbovineserumtoafinalconcentrationof10% |
GT1377C | DU4475 | 人乳腺癌細(xì)胞(三陰性)DU4475 | 2000 | RPMI-1640+10%FBS |
GT1378C | UACC812 | 人乳腺導(dǎo)管瘤細(xì)胞(無特殊類型的浸潤性乳腺癌)UACC812 | 3000 | L-15+10mcg/ml胰島素,16mcg/mlglutathione,90%;+10%FBS無二氧化碳培養(yǎng) |
GT1379C | G401 | 人腎橫紋肌肉瘤/不是腎癌細(xì)胞G401 | 1800 | McCoy's5a+10%FBS |
GT1380C | NCIH838 | 人肺腺癌細(xì)胞NCIH838 | 1800 | RPMI1640+10%FBS |
GT1381C | NCIH596 | 人肺腺鱗癌細(xì)胞NCIH596 | 1800 | RPMI1640+10%FBS |
GT1382C | NCIH1563 | 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCIH1563 | 1500 | RPMI1640+10%FBS |
GT1383C | NCIH2347 | 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCIH2347 | 1500 | RPMI1640+10%FBS |
GT1384C | NCIH2087 | 人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞NCIH2087 | 3000 | ACL-4medium(serum-free)DMEM/F12(1:1):Ham'sF12/DMEMedium(DMEH-16/F-1250%Mixturew/oHEPES,withNEAAMedium)0.02mg/ml胰島素+0.01mg/ml轉(zhuǎn)鐵蛋白+25nM亞砷酸鈉+50nM氫化可的松+1ng/mlEGF+0.01mM乙酰胺+0.01mM磷酸乙醇胺+100pM三碘甲腺原氨酸+0.5%(w/v)牛血清白蛋白+10mMHEPES+0.5mM丙酮酸鈉+2mML-谷氨酰胺 |
GT1385C | NCIH209 | 人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCIH209 | 1500 | IMDM+10%FBSorRPMI1640+10%FBS |
GT1386C | NCIH2170 | 人肺鱗癌細(xì)胞NCIH2170 | 1800 | RPMI1640+10%FBS |
GT1387C | NAMALWA | 人Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞NAMALWA | 1500 | RPMI1640+7.5%FBS |
GT1388C | PA1 | 人卵巢畸胎瘤細(xì)胞PA1 | 1800 | EMEM+10%FBS |
GT1389C | HEK293c18 | 人胚腎細(xì)胞HEK293c18 | 1800 | DMEM+10%FBS |
GT1390C | AAV293 | 腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞AAV293 | 1500 | DMEM+10%FBS |
GT1391C | UWB1289(ATCC?CRL2945?) | 人BRCA1綜合征卵巢癌細(xì)胞UWB1.289(ATCC?CRL2945?) | 3500 | 參考ATCC |
GT1392C | UWB1289BRCA1(ATCC?CRL2946?) | 人BRCA1綜合征卵巢癌細(xì)胞UWB1.289BRCA1(ATCC?CRL2946?) | 3500 | 參考ATCC |
GT1393C | Hs888Lu | 人肺成纖維細(xì)胞Hs888Lu | 2000 | DMEM(含NaHCO31.5g/L)+10%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1394C | SW839 | 人腎癌細(xì)胞SW839 | 1500 | 1640+10%FBS |
GT1395C | HT3 | 人子宮頸癌細(xì)胞HT3 | 2000 | McCoy's5a+10%FBS |
GT1396C | TTA1 | 人甲狀腺癌細(xì)胞TTA1 | 1800 | DMEM+10%FBS |
GT1397C | ACT1 | 人甲狀腺癌細(xì)胞ACT1 | 1500 | DMEM+10%FBS |
GT1398C | CAL62 | 人甲狀腺癌細(xì)胞(未分化)CAL62 | 1500 | DMEM+10%FBS |
GT1399C | BHT101 | 人甲狀腺間變性癌細(xì)胞BHT101 | 1800 | 1640+10%FBS+0.5%人血清 |
GT1400C | HTh7 | 人甲狀腺癌細(xì)胞HTh7 | 1500 | DMEM+10%FBS |
GT1401C | Hth83 | 人甲狀腺癌細(xì)胞Hth83 | 1800 | 1640+10%FBS |
GT1402C | KHM5M | 人甲狀腺癌細(xì)胞KHM5M | 1800 | 1640+10%FBS |
GT1403C | KMH2 | 人甲狀腺癌細(xì)胞KMH2 | 1800 | 1640+10%FBS |
GT1404C | C643 | 人甲狀腺癌細(xì)胞C643 | 1500 | 1640+10%FBS |
GT1405C | SUM159PT | 人乳腺癌細(xì)胞(三陰性)SUM159PT | 2500 | 1640+10%FBS |
關(guān)鍵字: 人正常肝細(xì)胞THLE2;細(xì)胞THLE2;人正常肝細(xì)胞;ATCC細(xì)胞;ATCC官網(wǎng);
上海晶風(fēng)生物科技有限公司擁有一個(gè)蓬勃朝氣的年輕團(tuán)隊(duì),是一家面向生命科學(xué)領(lǐng)域,提供科研類試劑、耗材、儀器、技術(shù)服務(wù)的生物企業(yè)。包括分子生物學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、細(xì)胞學(xué)等 。旗下?lián)碛小熬эL(fēng)生物”、“GTX” 品牌。通過公司各部門員工的共同努力在行業(yè)內(nèi)享有一定的聲譽(yù),深得新老客戶厚愛。本著“服務(wù)、誠信、進(jìn)取”的精神,堅(jiān)持溝通你我,創(chuàng)新服務(wù),為國內(nèi)外廣大用戶提供產(chǎn)品和服務(wù)。