人包皮微血管內(nèi)皮細胞有限細胞系HMEC1，培養(yǎng)條件具體詳情可以咨詢我司客服
凍存條件 | 無血清凍存液（貨號：C7001）。 |
傳代方法 | 第一次建議1:2傳代 | 傳代情況 | 2天換液 |
備注 | 建議同時購買完培，同時購買非常優(yōu)惠 |
細胞收到后處理
培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是運輸細胞的最好辦法。收到細胞用75%酒精噴灑整個細胞瓶，消毒后放到超凈臺內(nèi)嚴格無菌操作，將細胞瓶放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中靜置3-4小時以穩(wěn)定細胞狀態(tài)后再做處理。顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照保存（最好40x,100x,200x各一張），前三天照片是重要售后依據(jù)，不提供照片默認收到狀態(tài)良好。（換液后將瓶蓋擰松）
人包皮微血管內(nèi)皮細胞有限細胞系HMEC1，培養(yǎng)步驟
a、細胞傳代：如果未超過80%匯合度時，將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中，留5ml完全培養(yǎng)基，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)；如果細胞密度超80%，即可進行傳代培養(yǎng)，傳代具體步驟如下：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液約1-2ml至培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上完全培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細胞，使之完全脫落后吸出，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL完全培養(yǎng)基重懸。
4. 將細胞懸液按1：2的比例進行分瓶傳代（兩個T25瓶），補充新的完全培養(yǎng)基至5-8ml/瓶，最后放入到37℃、5%CO2的細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
b、細胞凍存：
1、細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時，棄T25培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細胞一次；
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后加入5ml完全培養(yǎng)液終止消化，再輕輕吹打細胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1000rpm離心 5min；
3、 棄上清，沉淀細胞加入1ml的雅吉生物無血清凍存液（貨號：C7001），混勻后加入凍存管中。
4、 將凍存細胞直接放入-80℃冰箱即可，如后期要將細胞轉(zhuǎn)入液氮罐中，則需在-80℃冰箱 中存放24小時以上再轉(zhuǎn)入液氮罐中。
C、細胞復(fù)蘇：
1、從液氮中取出細胞凍存管（注意佩戴防護面具），快速將其置入 37℃水浴中解凍， 直至凍存管中無結(jié)晶，然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁；
2、將凍存管中的細胞移至含 5ml 完全培養(yǎng)基的15ml離心管中，1000rpm離心5min；
3、棄上清，沉淀用5ml完全培養(yǎng)基重懸，接種至T25培養(yǎng)瓶，放于37℃,5%CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4、第二天，換用新鮮完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
注意事項：有些細胞貼壁不牢，在運輸過程中容易發(fā)生細胞脫落，這是正常現(xiàn)象。如脫離較多可將培養(yǎng)瓶所有培養(yǎng)液收集至離心管，1000rpm離心5min，收集上清作過渡培養(yǎng)（后期對比培養(yǎng)），沉淀加入胰酶1-2ml，輕輕吹打，重懸，消化1-2分鐘后，加5ml完全培養(yǎng)基終止反應(yīng)。再離心，棄上清，加1-2ml完全培養(yǎng)基重懸。然后按1:2比例進行分瓶傳代（兩個T25），補充新的完全培養(yǎng)基至5-8ml/瓶，最后放入37℃,5%CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
人包皮微血管內(nèi)皮細胞有限細胞系HMEC1，售后條款：
1）細胞出現(xiàn)問題，可重發(fā)的情況有哪些？判定標準是什么？
1. 細胞運輸途中遭遇的各種問題，細胞丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴重漏液等，重發(fā)；
2. 細胞污染問題，請在收到產(chǎn)品48小時內(nèi)，給我們提出真實的實驗結(jié)果，核實后重發(fā)；
3. 常溫發(fā)貨的細胞靜置24小時后，干冰凍存發(fā)貨的細胞復(fù)蘇后24小時后，絕大多數(shù)細胞未存活，（需提供真實清晰的細胞狀態(tài)照片），重發(fā)；
4. 干冰凍存發(fā)貨的細胞復(fù)蘇后24小時后或常溫發(fā)貨的細胞靜置4小時候并且未開封，出現(xiàn)污染，重發(fā)；
5. 細胞活性問題，請在收到產(chǎn)品7天內(nèi)給我們提出真實的實驗結(jié)果，用臺盼藍染色法鑒定細胞活力，核實后予重發(fā)；
6. 細胞收到當天以及第2,3天請拍照，3天未告知的，視為產(chǎn)品合格。4-7天內(nèi)出現(xiàn)問題有提供收到細胞前3天照片和細胞出現(xiàn)問題時照片以及細胞相關(guān)操作的詳細步驟的，并跟技術(shù)人員溝通的，由技術(shù)人員判定為我方責任的，重發(fā)。技術(shù)人員判定為雙方承擔責任的由雙方進行協(xié)商處理或者按合同價的50%收費重發(fā)。
2）細胞出現(xiàn)問題，不予以重發(fā)的情況有哪些？
1. 客戶造成細胞污染，不重發(fā)；
2. 客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
3. 非本庫推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
4. 細胞狀態(tài)不好，未提供細胞培養(yǎng)前3天照片的，不重發(fā)；
5. 細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的，不重發(fā)；
6. 細胞收到2天內(nèi)，未告知，不重發(fā)；
歡迎新老客戶咨詢訂購：人包皮微血管內(nèi)皮細胞有限細胞系HMEC1
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| GT1116C | HGC27YFP | 人胃癌細胞黃色熒光標記HGC27YFP | 3000 | DMEM+10%FBS+1%P/S貼壁生長 |
| GT1117C | HK2 | 人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細胞HK2 | 2500 | 角質(zhì)細胞無血清培養(yǎng)基（D-KSFM推薦：AW-019）80%時要傳代 |
| GT1118C | HKb20 | 人腎上皮細胞HKb20 | 1500 | DMEM+10%FBS+800μg/mlG418+1%P/S |
| GT1119C | HL60 | 人早幼粒白血病細胞HL60 | 1800 | IMDM+20%FBS+1%P/S |
| GT1120C | HL7702 | 人肝細胞HL7702 | 1800 | 1640+20%FBS+1%P/S |
| GT1121C | HMC3 | 人小膠質(zhì)細胞HMC3 | 1500 | MEM+10%FBS+1%P/S |
| GT1122C | HMEC1 | 人包皮微血管內(nèi)皮細胞有限細胞系HMEC1 | 3000 | 內(nèi)皮細胞培養(yǎng)體系（BW-002） |
| GT1123C | HO8910PM | 人高轉(zhuǎn)移卵巢癌細胞HO8910PM | 1500 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1124C | HOS | 人骨肉瘤細胞HOS | 1500 | MEM+10%FBS+1%NEAA+1%P/S |
| GT1125C | HPAC | 人胰腺癌細胞HPAC | 1800 | D/F12+5%FBS+0.002mg/ml胰島素+0.005mg/ml轉(zhuǎn)鐵蛋白+40ng/ml氫化可的松+10ng/ml表皮生長因子+1%P/S |
| GT1126C | HPAFⅡ | 人胰腺癌細胞HPAFⅡ | 1800 | MEM+10%FBS+1%丙酮酸鈉+1%L-谷氨酰胺+1%P/S貼壁 |
| GT1127C | HPASMC | 人肺動脈平滑肌HPASMC | 7750 | SMCM（ScienCell，1101） |
| GT1128C | hTERTHPNE | 人胰腺導(dǎo)管細胞hTERTHPNE | 2500 | 75%DMEM(無糖)+25%MediumM3+5%FBS+10ng/mlrhEGF+2.5mMD-葡萄糖+750ng/ml嘌呤霉素+1%P/S |
關(guān)鍵字： 人包皮微血管內(nèi)皮細胞有限細胞系HMEC1;細胞系HMEC1;HMEC1;ATCC細胞;ATCC官網(wǎng);
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