SKO-007人骨髓瘤細胞 百歐博偉生物

一、知識概述

骨髓瘤細胞是B-淋巴漿細胞系統(tǒng)惡性增殖所致一種腫瘤。其特點是骨髓中出現(xiàn)異常的漿細胞 (稱為骨髓瘤細胞）的惡性增殖，并分泌某 種體液因子，使破骨細胞異常激活，造成溶骨性病變，引起骨痛和骨質破壞，貧血、腎功能損害、免疫功能異常。

二、產(chǎn)品信息

平臺編號：Bio-133308

規(guī)格：1×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

細胞信息：SKO-007

細胞名稱：SKO-007人骨髓瘤細胞

產(chǎn)品類別：人源細胞系

生長特性：貼壁生長

培養(yǎng)體系：DMEM（高糖）+10%FBS

傳代方法：1：2傳代

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

凍存條件：無血清細胞凍存液保存條件：＞85%

傳代方法：1:2傳代

傳代情況：2~3天換液

培養(yǎng)體系：溫度：37℃ ，氣相：95%空氣 ，5%CO2

細胞描述：本庫的細胞僅用于科研工作，未經(jīng)許可不得用于其他目的，使用者不得將本庫細胞轉讓給第三者。

凍存條件：基礎培養(yǎng)基+40%FBS+10%DMSO，液氮

注意事項：僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用（產(chǎn)品信息以出庫為準）

三、細胞特點

骨髓瘤細胞具有以下幾個特點：①穩(wěn)定，易培養(yǎng)；②自身不分泌免疫球蛋白或細胞因子；③融合率高；④是次黃嘌呤磷酸核糖轉化酶缺陷株，是制備單克隆抗體的B淋巴細胞雜交瘤技術中 最理想的脾細胞融合伴侶。

四、細胞收到后的處理方法

細胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是細胞運輸?shù)淖詈棉k法。收到細胞回到自己的實驗室后，先打開外包裝，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內，嚴格無菌操作，培養(yǎng)箱靜置2-4小時。鏡下觀察：未超過80%匯合度時，可將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中，加入6ml完全培養(yǎng)基，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)；超過80%匯合度時，根據(jù)情況傳代或者凍存，具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。（注意發(fā)貨的是密封培養(yǎng)瓶的話，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)記得培養(yǎng)瓶蓋子擰松）

五、細胞培養(yǎng)步驟

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加4-6mL完全培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：

1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2.加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的完全培養(yǎng)基終止消化。

3.輕輕吹打細胞，完全脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4.按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。

PS：若客戶收到2ml小管細胞，收到細胞后，用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超凈臺或安全柜內，嚴格無菌操作；將小管細胞轉移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿，加入5ml左右完全培養(yǎng)基混勻，放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細胞密度：若密度未超過80%，換液繼續(xù)培養(yǎng)，視情況傳代或者凍存。若密度超過80%，可直接進行傳代（方法同上）

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