研究Gambogenic acid（GNA）對(duì)黑色素瘤B16細(xì)胞增殖的抑制作用，并探討細(xì)胞凋亡的作用。方法和結(jié)果：采用甲基噻唑基四唑（MTT）法測(cè)定Gambogenic acid對(duì)B16細(xì)胞增殖的抑制作用;熒光顯微鏡下AO/EB染色檢測(cè)B16細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的交替;采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)Gambogenic酸處理產(chǎn)生的B16細(xì)胞中的細(xì)胞內(nèi)活性氧（ROS），Western blotting用于研究細(xì)胞內(nèi)Caspase-3蛋白變化的表達(dá)。MTT結(jié)果表明，Gambogenic acid在一定時(shí)間和一定濃度下顯著抑制了B16細(xì)胞的增殖，熒光顯微鏡對(duì)Gambogenic acid處理后的B16細(xì)胞觀(guān)察到形態(tài)變化。AO/EB染色顯示主要細(xì)胞密度降低。Gambogenacid處理的細(xì)胞表現(xiàn)出明顯的凋亡狀態(tài)。在用Gambogenic酸處理細(xì)胞后，在短時(shí)間內(nèi)，與對(duì)照組相比，細(xì)胞內(nèi)ROS水平顯著升高（P < 0.01），線(xiàn)粒體膜始終具有較低的電位。Western blotting結(jié)果顯示，Gambogenic酸處理后，Caspase-3蛋白釋放中細(xì)胞內(nèi)蛋白表達(dá)的變化增加。結(jié)論：Gambogenic acid 可在一定時(shí)間和一定濃度下抑制惡性黑色素瘤 B16 細(xì)胞的生長(zhǎng)增殖并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。
甘草酸是甘草的主要活性化合物，從藤黃樹(shù)中散發(fā)出來(lái)。在幾項(xiàng)研究中已經(jīng)報(bào)道了甘藍(lán)生物酸在體外的抗癌活性，包括 A549 裸鼠模型。然而，作用機(jī)制仍不清楚。方法和結(jié)果：我們采用裸鼠模型檢測(cè)Gambogenic acid對(duì)乳腺腫瘤的影響，通過(guò)Western blotting分析體內(nèi)細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá)。通過(guò)MTT、流式細(xì)胞術(shù)和Western blotting檢測(cè)對(duì)MDA-MB-231細(xì)胞增殖、凋亡和凋亡相關(guān)蛋白的影響。半胱天冬酶-3，-8，-9抑制劑也用于檢測(cè)對(duì)半胱天冬酶家族成員的影響。我們發(fā)現(xiàn)Gambogenic acid抑制體內(nèi)乳腺腫瘤的生長(zhǎng)，與Fas和裂解的caspase-3，-8，-9和bax的表達(dá)增加以及抗凋亡蛋白bcl-2的減少有關(guān)。Gambogenic acid 以濃度依賴(lài)性方式抑制細(xì)胞增殖并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。結(jié)論：我們的觀(guān)察表明，Gambogenic acid 通過(guò)體內(nèi)和體外的死亡受體和線(xiàn)粒體途徑介導(dǎo)細(xì)胞凋亡來(lái)抑制乳腺癌 MDA-MB-231 細(xì)胞的生長(zhǎng)。
探討Gambogenic acid（GNA）誘導(dǎo)黑色素瘤B16細(xì)胞凋亡的機(jī)制。方法與結(jié)果：采用甲基噻唑基四唑（MTT）法測(cè)定Gambogenic acid對(duì)B16細(xì)胞增殖的抑制作用。通過(guò)Hoechst 33258染色檢測(cè)Gambogenic acid對(duì)B16細(xì)胞的影響。透射電子顯微鏡觀(guān)察B16細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)變化。Western blotting檢測(cè)PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、p-mTOR、PTEN蛋白的變化，探討Gambogenic acid誘導(dǎo)B16細(xì)胞凋亡的分子機(jī)制。Gambogenic acid 對(duì)黑色素瘤 B16 細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖具有顯著的抑制作用。隨著Gambogenic酸濃度的增加和作用時(shí)間的延長(zhǎng)，細(xì)胞活力顯著降低。Hoechst 33258 染色結(jié)果表明，用 Gambogenic acid 處理的細(xì)胞表現(xiàn)出明顯的凋亡特征。透射電子顯微鏡下，B16細(xì)胞經(jīng)Gambogenic acid處理后，細(xì)胞凋亡形態(tài)明顯變化。Western blot顯示p-PI3K和p-Akt蛋白表達(dá)隨時(shí)間依賴(lài)性降低，p-PI3K和p-Akt蛋白表達(dá)量沒(méi)有變化。p-mTOR蛋白表達(dá)隨時(shí)間延長(zhǎng)而降低，PTEN蛋白表達(dá)呈時(shí)間依賴(lài)性增加。結(jié)論：Gambogenic acid能抑制黑色素瘤B16細(xì)胞的增殖，并在一定時(shí)間和濃度范圍內(nèi)誘導(dǎo)其凋亡。其誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的機(jī)制可能與PI3K/Akt/mTOR信號(hào)通路有關(guān)。
肺癌是最常見(jiàn)的癌癥類(lèi)型之一，截至 2008 年，全球每年導(dǎo)致 138 萬(wàn)人死亡。識(shí)別天然抗肺癌藥物變得非常重要。Gambogenic acid （GNA） 是 Gamboge 的活性化合物之一，Gamboge 是一種傳統(tǒng)藥物，被用作治療絳蟲(chóng)的劇烈凈化劑、催吐劑或蚯蚓藥。 最近，越來(lái)越多的證據(jù)表明，Gambogenic acid 具有有希望的抗腫瘤作用;然而，其潛在機(jī)制仍不清楚。方法和結(jié)果：本文發(fā)現(xiàn)Gambogenic acid可以誘導(dǎo)液泡的形成，這與A549和HeLa細(xì)胞的自噬有關(guān)。進(jìn)一步的研究表明，基于MDC染色、AO染色、LC3 II積累、Beclin 1活化和P70S6K磷酸化的結(jié)果，Gambogenic acid觸發(fā)自噬的啟動(dòng)。然而，p62 的降解被破壞，游離 GFP 不能在 Gambogenic acid 處理的細(xì)胞中釋放，這表明自噬通量受阻。進(jìn)一步的研究表明，Gambogenic acid 通過(guò)抑制溶酶體中的酸化來(lái)阻斷自噬體和溶酶體之間的融合。這種功能失調(diào)的自噬通過(guò)激活 p53、Bax 和裂解的半胱天冬酶-3 同時(shí)減少 Bcl-2，在 Gambogenic acid 處理的細(xì)胞中發(fā)揮促死亡作用。 Beclin 1 敲低大大降低了 Gambogenic acid 誘導(dǎo)的細(xì)胞死亡以及對(duì) p53、Bax、裂解的半胱天冬酶-3 和 Bcl-2 的影響。 使用異種移植模型也獲得了類(lèi)似的結(jié)果。結(jié)論：我們的研究結(jié)果首次表明，Gambogenic acid 可以導(dǎo)致異常的自噬誘導(dǎo)細(xì)胞死亡，并可能表明 Gambogenic acid 作為抗癌治療中的工具或可行藥物的潛在應(yīng)用。
研究Gambogenic acid（GNA）對(duì)人胃癌細(xì)胞系MGC-803生長(zhǎng)的影響及其機(jī)制。方法和結(jié)果：采用MTT法測(cè)定細(xì)胞活力。采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡、線(xiàn)粒體膜電位（MMP）、活性氧（ROS）。其中，膜聯(lián)蛋白V-FITC/PI雙染色用于細(xì)胞凋亡分析，Rh123用于MMP分析，H2DCFDA用于ROS形成分析。通過(guò)蛋白質(zhì)印跡證實(shí)P53表達(dá)。4.0 μmol/L Gambogenic acid 以 24 至 48 小時(shí)的時(shí)間依賴(lài)性方式抑制 MGC-803 細(xì)胞生長(zhǎng)。在1.0-12.0 μmol/L的濃度范圍內(nèi)，抑制作用呈濃度依賴(lài)性。用4.0 μmol/L甘洛根酸處理48 h后，膜聯(lián)蛋白V-FITC/PI染色明顯觀(guān)察到細(xì)胞凋亡。重要的是，在Gambogenic酸處理后，MMP降低，ROS形成增加。此外，在4.0 μmol/L Gambogenic酸處理后，P53表達(dá)以時(shí)間依賴(lài)性方式上調(diào)。結(jié)論：Gambogenic acid 誘導(dǎo)人胃癌細(xì)胞系線(xiàn)粒體依賴(lài)性細(xì)胞凋亡并增加 P53 表達(dá)。
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王玲