背景介紹
納米抗體一種來(lái)源于駱駝科動(dòng)物體內(nèi)、天然缺失輕鏈的重鏈抗體可變區(qū),分子質(zhì)量只有15kDa,是常規(guī)抗體分子質(zhì)量的1/10。其蛋白質(zhì)晶體結(jié)構(gòu)長(zhǎng)度為4 nm,直徑為2.5 nm,是目前已知分子質(zhì)量最小的抗體,因此稱之為納米抗體。
相比于傳統(tǒng)抗體(圖1a),納米抗體(圖1b)的活性結(jié)合區(qū)域較長(zhǎng),氨基酸數(shù)量多達(dá)16~18個(gè),且其溫度穩(wěn)定性及有機(jī)溶劑耐受性更強(qiáng),部分還可耐受蛋白酶,也能耐受更廣的酸堿范圍(傳統(tǒng)抗體僅耐受pH6~9,納米抗體可耐受pH2~11)。基于其穩(wěn)定性、穿透力等方面的優(yōu)勢(shì),目前納米抗體在疾病治療、診斷及物質(zhì)檢測(cè)等領(lǐng)域廣受關(guān)注。
圖1 傳統(tǒng)抗體與納米抗體的對(duì)比
服務(wù)內(nèi)容
辰輝創(chuàng)聚生物?可提供:包括抗原制備、羊駝免疫、VHH納米抗體噬菌體文庫(kù)構(gòu)建、VHH納米抗體淘選全流程服務(wù)。
項(xiàng)目
內(nèi)容
周期
交付標(biāo)準(zhǔn)
抗原制備(可選)
?基因合成
?質(zhì)粒構(gòu)建
?表達(dá)純化
?質(zhì)檢
2-3周
?1-10mg抗原蛋白
?SDS-PAGE純度>85%
?內(nèi)毒素<1EU/mg
羊駝免疫
?免疫4次
?采血
?檢測(cè)每次血清效價(jià)
?羊駝外周血PBMC提取
8-12周
?羊駝外周血PBMC
?提供血清效價(jià)數(shù)據(jù)
?IgG效價(jià)達(dá)1:10^5
免疫文庫(kù)構(gòu)建
?RNA提取
?cDNA制備
?PCR擴(kuò)增納米抗體可變區(qū)
?連接載體并電轉(zhuǎn)化
?計(jì)算庫(kù)容量
?測(cè)序驗(yàn)證多樣性
5周
?庫(kù)容量達(dá)到10^8~10^9
?細(xì)菌庫(kù)
免疫文庫(kù)淘選
?噬菌體展示淘選
?ELISA/FACS篩選
?測(cè)序
4周
?提供10株以上抗體基因序列
?提供抗體氨基酸序列
辰輝創(chuàng)聚生物?提供千億級(jí)天然納米抗體庫(kù)快速淘選服務(wù),最快2周內(nèi)獲得候選分子。
天然文庫(kù)淘選
此外,辰輝創(chuàng)聚生物?還提供親和力成熟、抗體人源化、重組抗體構(gòu)建表達(dá)及克級(jí)生產(chǎn)服務(wù),歡迎咨詢。
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