產品名稱：大鼠骨髓瘤細胞Y3-Ag1.2.3S210的亞型
傳代方法 | 次建議1:2傳代 | 凍存條件 | 無血清凍存液（貨號：C7001） |
細胞描述 | 本庫的細胞僅用于科研工作，未經許可不得用于其他目的，使用者不得將本庫細胞轉讓給第三者。 |
培養(yǎng)備注 | 用無菌離心管收集瓶子培養(yǎng)基，留作過渡培養(yǎng) |
大鼠骨髓瘤細胞Y3-Ag1.2.3S210的亞型到貨后處理
細胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是細胞運輸?shù)霓k法。收到細胞回到自己的實驗室后，先打開外包裝，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內，嚴格無菌操作，培養(yǎng)箱靜置2-4小時。鏡下觀察：未超過80%匯合度時，可將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中，加入6ml完全培養(yǎng)基，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)；超過80%匯合度時，根據(jù)情況傳代或者凍存，具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。（注意發(fā)貨的是密封培養(yǎng)瓶的話，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)記得培養(yǎng)瓶蓋子擰松，傳代后建議一瓶用原瓶里面的完全培養(yǎng)基，另外一瓶用自己配的完全培養(yǎng)基）
大鼠骨髓瘤細胞Y3-Ag1.2.3S210的亞型培養(yǎng)步驟
一、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加4-6mL完全培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
二、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
a）、對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的完全培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細胞，完全脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液，將細胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b）、對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
PS：若客戶收到2ml小管細胞，收到細胞后，用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超凈臺或安全柜內，嚴格無菌操作；將小管細胞轉移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿，加入5ml左右完全培養(yǎng)基混勻，放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細胞密度：若密度未超過80%，換液繼續(xù)培養(yǎng)，視情況傳代或者凍存。若密度超過80%，可直接進行傳代（方法同上）。
三、細胞凍存：（注：無血清凍存液凍存細胞的方法請參考我司官網貨號：C7001）
1、細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細胞一次；
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后加入完全培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打細胞使之脫落，然后將懸液轉移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；
3、用適量的凍存液重懸細胞，并放置于凍存管中；
4、先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃
大鼠骨髓瘤細胞Y3-Ag1.2.3S210的亞型部分相關細胞如下：
YS3276 el4/LUC 熒光素酶標記的小鼠淋巴瘤細胞EL4/LUC
YS3277 j558/LUC 熒光素酶標記的小鼠多發(fā)性骨髓瘤細胞J558/LUC
YS3278 mbt2/LUC 熒光素酶標記的小鼠膀胱癌細胞MBT-2/LUC
YS3279 ovcar3/LUC/GFP 熒光素酶/GFP標記的人卵巢癌細胞OVCAR3/LUC/GFP
YS3280 ccrfcem/LUC 熒光素酶標記的人急性淋巴細胞白血病T淋巴細胞CCRF-CEM/LUC
YS3281 mm1S/LUC/GFP 熒光素酶/GFP標記的人多發(fā)性骨髓瘤細胞MM.1S/LUC/GFP
YS3282 jeko1/LUC/GFP 熒光素酶/GFP標記的人套細胞淋巴瘤細胞Jeko-1/LUC/GFP
YS3283 g422/LUC/GFP 熒光素酶/GFP標記的KM小鼠腦神經膠質母細胞瘤株G422/LUC/GFP
YS3284 mdamb468/LUC 熒光素酶標記的人乳腺癌細胞MDA-MB-468/LUC
YS3285 b16f10/LUC/GFP 熒光素酶/GFP標記的小鼠皮膚黑色素瘤細胞B16-F10/LUC/GFP
YS3286 dld1/LUC 熒光素酶標記的人結直腸腺癌上皮細胞DLD-1/LUC
YS3287 panc02/LUC/GFP 熒光素酶/GFP標記的小鼠胰腺導管腺癌細胞PANC02/LUC/GFP
YS3288 a431/LUC 熒光素酶標記的人表皮癌細胞A431/LUC
YS3289 ctla4lg24 中國倉鼠卵巢細胞CTLA4LG-24
YS3290 4to7tgl 小鼠乳腺惡性腫瘤細胞4TO7-TGL
YS3291 kapas299 人間變性大細胞淋巴瘤細胞Kapas-299
YS3292 naml1 人慢性粒細胞白血病細胞Naml-1
YS3293 aml12/LUC 熒光素酶標記的小鼠肝細胞AML12/LUC
YS3294 a172/LUC 熒光素酶標記的人膠質母細胞瘤細胞A172/LUC
YS3295 rko/LUC 熒光素酶標記的人結腸腺癌細胞RKO/LUC
YS3296 a9/LUC 熒光素酶標記的小鼠皮下結締組織細胞A9/LUC
YS3297 acheae1/LUC 熒光素酶標記的小鼠雜交瘤細胞抗AChEAE-1/LUC
YS3298 acheae2/LUC 熒光素酶標記的小鼠雜交瘤細胞抗AChEAE-2/LUC
YS3299 lx2/LUC 熒光素酶標記的人肝星狀細胞LX-2/LUC
YS3300 hek293/LUC 熒光素酶標記的人胚腎細胞HEK-293/LUC
YS3301 hep3b217/LUC 熒光素酶標記的人肝癌細胞Hep3B2.1-7/LUC
YS3302 bv2/LUC 熒光素酶標記的小鼠小膠質細胞BV2/LUC
YS3303 caco2/LUC 熒光素酶標記的人結直腸腺癌細胞Caco-2/LUC
YS3304 kyse150/LUC 熒光素酶標記的人食管鱗癌細胞KYSE-150/LUC
YS3305 ncih23/LUC 熒光素酶標記的人非小細胞肺癌細胞NCI-H23/LUC
YS3306 colo205/LUC 熒光素酶標記的人結腸癌細胞COLO205/LUC
YS3307 emt6/LUC 熒光素酶標記的小鼠乳腺癌細胞EMT-6/LUC
YS3308 ncih157/LUC 熒光素酶標記的人非小細胞肺腺癌細胞NCI-H157/LUC
YS3309 hcc1806/LUC 熒光素酶標記的人乳腺鱗狀癌細胞HCC1806/LUC
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關鍵字： 大鼠骨髓瘤細胞Y3-Ag1.2.3S21;Y3-Ag1.2.3S21;大鼠骨髓瘤細胞;ATCC代購;ATCC引種;
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