一、簡(jiǎn)介 His 標(biāo)簽蛋白（競(jìng)爭(zhēng)法）快速檢測(cè)試劑盒是基于膠體金側(cè)向?qū)游黾夹g(shù)的蛋白半定量檢測(cè) 試劑。主要結(jié)構(gòu)由樣品墊、金標(biāo)墊、層析膜、吸水紙、背板等組成。在層析膜上固定有金標(biāo) 抗體的二抗（質(zhì)控線）和帶有 His-tag 的蛋白（檢測(cè)線）；在金標(biāo)墊上固定有膠體金標(biāo)記的 抗 His-Tag 的單克隆抗體。當(dāng)待測(cè)樣品滴加到樣品墊時(shí)，通過(guò)毛細(xì)作用，液體向金標(biāo)墊移動(dòng)。 當(dāng)不含有 His-Tag 蛋白的待測(cè)樣品通過(guò)金標(biāo)墊時(shí)，His-Tag 金標(biāo)抗體隨著層流移動(dòng)到檢測(cè)線 位置，與固定在檢測(cè)線上的帶有 His-tag 的蛋白發(fā)生特異性結(jié)合，并在檢測(cè)線上形成酒紅色 條帶；當(dāng)含有 His-Tag 蛋白的待測(cè)樣品通過(guò)金標(biāo)墊時(shí)，His-Tag 金標(biāo)抗體與待測(cè)樣本中的 His-Tag 蛋白發(fā)生特異性的結(jié)合，樣本中含有的 His-Tag 蛋白越多，與之結(jié)合的金標(biāo) His-Tag 抗體越多，剩余的游離 His-Tag 金標(biāo)抗體越少，隨著層流移動(dòng)到檢測(cè)線位置，游離的 His-Tag 金標(biāo)抗體與固定在檢測(cè)線上的帶有 His-tag 的蛋白發(fā)生特異性結(jié)合，并在檢測(cè)線上形成淡淡 的酒紅色條帶或者不顯帶。當(dāng)復(fù)合物移動(dòng)到質(zhì)控線時(shí)，His-Tag 金標(biāo)抗體被包被在質(zhì)控線的 金標(biāo)抗體二抗所捕獲，并在質(zhì)控線上形成酒紅色條帶。通過(guò)判讀層析膜上檢測(cè)線和質(zhì)控線是 否顯色及顯色的強(qiáng)弱，判斷樣品中是否存在 His-Tag 蛋白。本試劑檢測(cè)下限為10ug/mL，即 當(dāng)待測(cè)樣品中 His-Tag 蛋白的濃度達(dá)到10ug/ml 及以上濃度時(shí)，檢測(cè)線的強(qiáng)度會(huì)被有效的削 弱，顯示出淡淡的酒紅色條帶或不顯色。當(dāng)檢測(cè)樣品中 His-Tag 蛋白濃度在10ug/mL 至 100ug/mL 時(shí)，檢測(cè)線顏色的深淺與樣品中 His-Tag 蛋白的濃度呈負(fù)相關(guān)。當(dāng)樣本中的 His-Tag 蛋白濃度達(dá)到100ug/ml 以上時(shí)，檢測(cè)線發(fā)生消線即無(wú)肉眼可見(jiàn)條帶出現(xiàn)。