產(chǎn)品名稱：原代白癜風(fēng)人皮膚黑色素細(xì)胞PIG3
傳代方法 | 次建議1:2傳代 | 凍存條件 | 無血清凍存液（貨號(hào)：C7001） |
細(xì)胞描述 | 本庫的細(xì)胞僅用于科研工作，未經(jīng)許可不得用于其他目的，使用者不得將本庫細(xì)胞轉(zhuǎn)讓給第三者。 |
培養(yǎng)備注 | 用無菌離心管收集瓶子培養(yǎng)基，留作過渡培養(yǎng) |
原代白癜風(fēng)人皮膚黑色素細(xì)胞PIG3到貨后處理
細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是細(xì)胞運(yùn)輸?shù)霓k法。收到細(xì)胞回到自己的實(shí)驗(yàn)室后，先打開外包裝，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超凈臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作，培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)。鏡下觀察：未超過80%匯合度時(shí)，可將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中，加入6ml完全培養(yǎng)基，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)；超過80%匯合度時(shí)，根據(jù)情況傳代或者凍存，具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。（注意發(fā)貨的是密封培養(yǎng)瓶的話，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)記得培養(yǎng)瓶蓋子擰松，傳代后建議一瓶用原瓶里面的完全培養(yǎng)基，另外一瓶用自己配的完全培養(yǎng)基）
原代白癜風(fēng)人皮膚黑色素細(xì)胞PIG3培養(yǎng)步驟
一、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加4-6mL完全培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a）、對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的完全培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞，完全脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b）、對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
PS：若客戶收到2ml小管細(xì)胞，收到細(xì)胞后，用75%酒精噴灑整個(gè)管子消毒后放到超凈臺(tái)或安全柜內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作；將小管細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿，加入5ml左右完全培養(yǎng)基混勻，放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細(xì)胞密度：若密度未超過80%，換液繼續(xù)培養(yǎng)，視情況傳代或者凍存。若密度超過80%，可直接進(jìn)行傳代（方法同上）。
三、細(xì)胞凍存：（注：無血清凍存液凍存細(xì)胞的方法請(qǐng)參考我司官網(wǎng)貨號(hào)：C7001）
1、細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí)，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后加入完全培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；
3、用適量的凍存液重懸細(xì)胞，并放置于凍存管中；
4、先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃
原代白癜風(fēng)人皮膚黑色素細(xì)胞PIG3部分相關(guān)細(xì)胞如下：
YS2487 UPCISCC172 人舌頭鱗癌細(xì)胞UPCISCC172
YS2488 stage3ANCIH1373 人肺腺癌細(xì)胞stage3ANCI-H1373
YS2489 SW1710 人膀胱癌細(xì)胞SW1710
YS2490 12Z 人源子宮內(nèi)膜異位細(xì)胞12Z
YS2491 Y1 小鼠腎上腺皮質(zhì)瘤細(xì)胞Y1
YS2492 PIG3 原代白癜風(fēng)人皮膚黑色素細(xì)胞PIG3
YS2493 P3ag 小鼠骨髓瘤細(xì)胞P3ag
YS2494 KM12SM 人結(jié)腸癌肝轉(zhuǎn)移細(xì)胞KM12SM
YS2495 MAc 小鼠小腦星形膠質(zhì)細(xì)胞MAc
YS2496 NKT 自然殺傷T細(xì)胞NKT
YS2497 MH7A 關(guān)節(jié)炎成纖維細(xì)胞MH7A
YS2498 RAFLSs 類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎成纖維樣滑膜細(xì)胞RAFLSs
YS2499 WM239A 人黑色素瘤細(xì)胞WM239A
YS2500 GP5D 人結(jié)腸腺癌細(xì)胞GP5D
YS2501 TGBC11TKB 人胃癌細(xì)胞TGBC11TKB
YS2502 HCECB4G12 人角膜內(nèi)皮細(xì)胞HCECB4G12
YS2503 FRTL5 大鼠甲狀腺細(xì)胞FRTL5
YS2504 MCA38 小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞MCA38
YS2505 SMC1 人胸膜間皮瘤細(xì)胞SMC1
YS2506 HOEC 人口腔上皮HOEC
YS2507 HKF 人成纖維細(xì)胞HKF
YS2508 CCCHSF1 人皮膚成纖維細(xì)胞CCCHSF1
YS2509 MLM 小鼠急性粒白血病細(xì)胞MLM
YS2510 EJ138 人膀胱癌EJ138
YS2511 N9 小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞N9
YS2512 BCPAPBCPAP 甲狀腺乳頭狀癌細(xì)胞BCPAPBCPAP
YS2513 NCIH1672 小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCIH1672
YS2514 HSC4 人口腔鱗癌細(xì)胞HSC4
YS2515 CEK 雞胚腎細(xì)胞CEK
YS2516 NCIH1770 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCIH1770
YS2517 NCIH1092 人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCIH1092
YS2518 FLS 大鼠成纖維樣滑膜細(xì)胞FLS
YS2519 HFL 人成纖維樣滑膜細(xì)胞HFL
YS2520 HN13 人口腔鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞HN13
YS2521 MCFs 小鼠心肌成纖維細(xì)胞MCFs
YS2522 EHEB 人慢性B細(xì)胞白血病細(xì)胞EHEB
YS2523 SNK6 人NK/T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞SNK6
YS2524 hTERTRPE1 人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞hTERTRPE1
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上海雅吉生物科技有限公司成立于2011年3月，是一家面向生命科學(xué)領(lǐng)域，提供科研類試劑、耗材、儀器、技術(shù)服務(wù)的生物企業(yè)。包括分子生物學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、細(xì)胞學(xué)等 。旗下?lián)碛?“雅吉生物”、“晶風(fēng)生物”、“彩佑實(shí)業(yè)”、“GTX” 品牌。通過公司各部門員工的共同努力在行業(yè)內(nèi)擁有較高知名度，深得新老客戶厚愛，本著“優(yōu)質(zhì)、服務(wù)、信譽(yù)”的精神，堅(jiān)持以優(yōu)良的技術(shù)、優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品、良好的信譽(yù)為國內(nèi)外廣大用戶提供優(yōu)質(zhì)生物產(chǎn)品和服務(wù)。
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