從靈芝中分離出的三萜可以抑制許多癌細胞系的生長,被認為是靈芝抗癌作用的基礎。靈芝酸D(GAD)是靈芝三萜的主要成分之一。GAD處理48小時抑制HeLa人宮頸癌細胞的增殖,IC(50)值為17.3 +/- 0.3μM。流式細胞術分析和DNA片段化分析表明,靈芝酸D誘導G(2)/M細胞周期停滯和細胞凋亡。方法與結果:為鑒定靈芝酸D的細胞靶點,進行二維凝膠電泳,通過MALDI-TOF MS/MS鑒定靈芝酸D暴露于細胞后表達水平改變的蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)的調(diào)控也通過蛋白質(zhì)印跡法得到證實。靈芝酸 D 的細胞毒性作用與 21 種蛋白質(zhì)的調(diào)控表達有關。此外,這些可能的靈芝酸D靶標相關蛋白通過計算機藥物靶點搜索程序INVDOCK進行評估。INVDOCK分析結果表明,靈芝酸D可以結合14-3-3蛋白家族、膜聯(lián)蛋白A5和氨肽酶B的6種亞型。通過表面等離子體共振生物傳感器分析在體外確認了靈芝酸D對14-3-3 zeta的直接結合親和力。此外,對這21種蛋白質(zhì)之間功能關聯(lián)的深入研究表明,其中14種在蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用網(wǎng)絡中密切相關。 從以前的蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用實驗結果中,它們要么直接相互作用,要么僅通過一種中間蛋白相互結合。 當網(wǎng)絡擴展到進一步向外相互作用時,所有 21 種蛋白質(zhì)都可以包含在一個網(wǎng)絡中。結論:通過這種方式,構建了與靈芝酸D靶標相關蛋白相關的可能網(wǎng)絡,本文討論了這些蛋白對靈芝酸D細胞毒性的可能貢獻。
靈芝酸 D (GD) 是靈芝中的主要活性三萜類化合物,靈芝是一種日常使用的藥用真菌。然而,靈芝酸D的代謝命運仍然未知。為了了解靈芝酸D是否被廣泛代謝,我們首先研究了靈芝酸D在體外和體內(nèi)的代謝。方法和結果:從大鼠體內(nèi)獲得的膽汁樣品的代謝譜與體外獲得的幾乎相同。采用超高效液相色譜/四極桿飛行時間質(zhì)譜法,從膽汁樣品中共鑒定出25種代謝物。在尿液樣本中發(fā)現(xiàn)很少的代謝物。這些結果表明,膽道清除而不是腎臟清除是排泄的主要途徑。通過與標準參比化合物鑒定主要代謝物。通過解釋質(zhì)譜圖鑒定低濃度的代謝物。觀察I期和II期代謝物。代謝轉化包括還原、單羥基化、二羥基化、三羥基化、氧化、去飽和、硫酸化和葡萄糖醛酸化。靈芝酸D化學結構中的主要代謝軟點是3-羰基、角甲基、7-羥基和26-羧酸部分。結論:總體而言,這項研究讓我們深入了解了靈芝酸 D 的代謝,靈芝酸 D 是一種活性含氧四環(huán)三萜類化合物。
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王玲