產(chǎn)品名稱：NCI-H3255人肺癌細胞株
傳代方法 | 次建議1:2傳代 | 凍存條件 | 無血清凍存液（貨號：C7001） |
細胞描述 | 本庫的細胞僅用于科研工作，未經(jīng)許可不得用于其他目的，使用者不得將本庫細胞轉(zhuǎn)讓給第三者。 |
培養(yǎng)備注 | 用無菌離心管收集瓶子培養(yǎng)基，留作過渡培養(yǎng) |
NCI-H3255人肺癌細胞株到貨后處理
細胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是細胞運輸?shù)霓k法。收到細胞回到自己的實驗室后，先打開外包裝，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內(nèi)，嚴格無菌操作，培養(yǎng)箱靜置2-4小時。鏡下觀察：未超過80%匯合度時，可將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中，加入6ml完全培養(yǎng)基，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)；超過80%匯合度時，根據(jù)情況傳代或者凍存，具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。（注意發(fā)貨的是密封培養(yǎng)瓶的話，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)記得培養(yǎng)瓶蓋子擰松，傳代后建議一瓶用原瓶里面的完全培養(yǎng)基，另外一瓶用自己配的完全培養(yǎng)基）
NCI-H3255人肺癌細胞株培養(yǎng)步驟
一、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加4-6mL完全培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?/span>6cm皿中），培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
二、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
a）、對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的完全培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細胞，完全脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液，將細胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b）、對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
PS：若客戶收到2ml小管細胞，收到細胞后，用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超凈臺或安全柜內(nèi)，嚴格無菌操作；將小管細胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿，加入5ml左右完全培養(yǎng)基混勻，放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細胞密度：若密度未超過80%，換液繼續(xù)培養(yǎng)，視情況傳代或者凍存。若密度超過80%，可直接進行傳代（方法同上）。
三、細胞凍存：（注：無血清凍存液凍存細胞的方法請參考我司官網(wǎng)貨號：C7001）
1、細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細胞一次；
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后加入完全培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打細胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；
3、用適量的凍存液重懸細胞，并放置于凍存管中；
4、先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃
NCI-H3255人肺癌細胞株部分相關(guān)細胞如下：
YS2350 PANC02 小鼠胰腺癌細胞PANC02
YS2351 CT26WT/LUC 小鼠結(jié)腸癌細胞帶熒光素酶CT26.WT/LUC
YS2352 B16/LUC 小鼠黑色素瘤帶熒光素酶B16/LUC
YS2353 SW10 SW-10小鼠神經(jīng)元細胞
YS2354 AT3 AT-3小鼠乳腺癌細胞
YS2355 OKT3 小鼠雜交瘤細胞(抗CD3)OKT3
YS2356 MOVAS 小鼠主動脈血管平滑肌細胞MOVAS
YS2357 EpH4Ev 小鼠乳腺上皮細胞EpH4-Ev
YS2358 M1 小鼠腎集合管細胞(SV40轉(zhuǎn)化)M-1
YS2359 mIMCD3 mIMCD-3小鼠腎髓質(zhì)細胞
YS2360 GC2spg 小鼠精母細胞GC-2spg
YS2361 M5076 小鼠網(wǎng)織細胞肉瘤M5076
YS2362 B16F0 小鼠黑色素瘤細胞B16-F0
YS2363 4T1/GFP 小鼠乳腺癌細胞帶綠色熒光4T1/GFP
YS2364 B16/GFP 小鼠黑色素瘤帶綠色熒光B16/GFP
YS2365 G422/GFP 小鼠腦神經(jīng)膠質(zhì)母細胞瘤瘤株帶綠色熒光G422/GFP
YS2366 MFC/LUC 小鼠前胃癌細胞帶熒光素酶MFC/LUC
YS2367 LLC/GFP 小鼠肺癌細胞帶綠色熒光LLC/GFP
YS2368 B16/RFP 小鼠黑色素瘤帶紅色熒光B16/RFP
YS2369 RAW2647/RFP 小鼠單核巨噬細胞白血病細胞帶紅色熒光RAW264.7/RFP
YS2370 293 人胚腎細胞293
YS2371 293A 人胚腎細胞293A
YS2372 F9 F9小鼠畸胎瘤細胞/小鼠胚胎癌細胞
YS2373 H9c221 大鼠心肌細胞H9c22-1
YS2374 MXY9K MXY9K[NBL-2]犬腎細胞
YS2375 P3X63Ag8 P3X63Ag8小鼠骨髓瘤細胞
YS2376 HPNE 人胰腺導管細胞HPNE
YS2377 MC3T3E1Subclone24 MC3T3-E1Subclone24小鼠胚胎成骨細胞前體細胞
YS2378 3T6Swissalbino 3T6-Swissalbino小鼠胚胎成纖維細胞
YS2379 Psi2DAP Psi2DAP小鼠胚胎成纖維細胞
YS2380 SKNBE2 SK-N-BE2人神經(jīng)母細胞瘤細胞
YS2381 L5178YTKclone372C L5178YTK+-clone3.7.2C小鼠淋巴瘤細胞
YS2382 PED PED豬內(nèi)皮細胞
YS2383 CV1[PartoftheWistarSpecialCollection] CV-1[PartoftheWistarSpecialCollection]非洲綠猴腎細胞
YS2384 VEROC1008 VEROC1008[VeroE6]非洲綠猴腎細胞
YS2385 HifiveBTITN5B14 Hi-fiveBTI-TN-5B1-4昆蟲細胞
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關(guān)鍵字： NCI-H3255人肺癌細胞株;NCI-H3255;人肺癌細胞株;ATCC代購;ATCC引種;
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公司在重視產(chǎn)品質(zhì)量的同時，也建立了一套集技術(shù)支持，物流售后服務(wù)等多部門聯(lián)動服務(wù)體系，努力把我們方便、快捷、周到的服務(wù)提供給每一個客戶，雅吉生物的試劑盒，在國內(nèi)眾多重點實驗室廣泛使用，深受廣大科研人員好評，先后在權(quán)威雜志文章中被引用。
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