產(chǎn)品名稱：NCI-H3255人肺癌細(xì)胞株
傳代方法 | 次建議1:2傳代 | 凍存條件 | 無(wú)血清凍存液（貨號(hào)：C7001） |
細(xì)胞描述 | 本庫(kù)的細(xì)胞僅用于科研工作，未經(jīng)許可不得用于其他目的，使用者不得將本庫(kù)細(xì)胞轉(zhuǎn)讓給第三者。 |
培養(yǎng)備注 | 用無(wú)菌離心管收集瓶子培養(yǎng)基，留作過渡培養(yǎng) |
NCI-H3255人肺癌細(xì)胞株到貨后處理
細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是細(xì)胞運(yùn)輸?shù)霓k法。收到細(xì)胞回到自己的實(shí)驗(yàn)室后，先打開外包裝，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超凈臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無(wú)菌操作，培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)。鏡下觀察：未超過80%匯合度時(shí)，可將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中，加入6ml完全培養(yǎng)基，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)；超過80%匯合度時(shí)，根據(jù)情況傳代或者凍存，具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。（注意發(fā)貨的是密封培養(yǎng)瓶的話，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)記得培養(yǎng)瓶蓋子擰松，傳代后建議一瓶用原瓶里面的完全培養(yǎng)基，另外一瓶用自己配的完全培養(yǎng)基）
NCI-H3255人肺癌細(xì)胞株培養(yǎng)步驟
一、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加4-6mL完全培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a）、對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的完全培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞，完全脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b）、對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
PS：若客戶收到2ml小管細(xì)胞，收到細(xì)胞后，用75%酒精噴灑整個(gè)管子消毒后放到超凈臺(tái)或安全柜內(nèi)，嚴(yán)格無(wú)菌操作；將小管細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿，加入5ml左右完全培養(yǎng)基混勻，放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細(xì)胞密度：若密度未超過80%，換液繼續(xù)培養(yǎng)，視情況傳代或者凍存。若密度超過80%，可直接進(jìn)行傳代（方法同上）。
三、細(xì)胞凍存：（注：無(wú)血清凍存液凍存細(xì)胞的方法請(qǐng)參考我司官網(wǎng)貨號(hào)：C7001）
1、細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí)，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后加入完全培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；
3、用適量的凍存液重懸細(xì)胞，并放置于凍存管中；
4、先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃
NCI-H3255人肺癌細(xì)胞株部分相關(guān)細(xì)胞如下：
YS2350 PANC02 小鼠胰腺癌細(xì)胞PANC02
YS2351 CT26WT/LUC 小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞帶熒光素酶CT26.WT/LUC
YS2352 B16/LUC 小鼠黑色素瘤帶熒光素酶B16/LUC
YS2353 SW10 SW-10小鼠神經(jīng)元細(xì)胞
YS2354 AT3 AT-3小鼠乳腺癌細(xì)胞
YS2355 OKT3 小鼠雜交瘤細(xì)胞(抗CD3)OKT3
YS2356 MOVAS 小鼠主動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞MOVAS
YS2357 EpH4Ev 小鼠乳腺上皮細(xì)胞EpH4-Ev
YS2358 M1 小鼠腎集合管細(xì)胞(SV40轉(zhuǎn)化)M-1
YS2359 mIMCD3 mIMCD-3小鼠腎髓質(zhì)細(xì)胞
YS2360 GC2spg 小鼠精母細(xì)胞GC-2spg
YS2361 M5076 小鼠網(wǎng)織細(xì)胞肉瘤M5076
YS2362 B16F0 小鼠黑色素瘤細(xì)胞B16-F0
YS2363 4T1/GFP 小鼠乳腺癌細(xì)胞帶綠色熒光4T1/GFP
YS2364 B16/GFP 小鼠黑色素瘤帶綠色熒光B16/GFP
YS2365 G422/GFP 小鼠腦神經(jīng)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤瘤株帶綠色熒光G422/GFP
YS2366 MFC/LUC 小鼠前胃癌細(xì)胞帶熒光素酶MFC/LUC
YS2367 LLC/GFP 小鼠肺癌細(xì)胞帶綠色熒光LLC/GFP
YS2368 B16/RFP 小鼠黑色素瘤帶紅色熒光B16/RFP
YS2369 RAW2647/RFP 小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞帶紅色熒光RAW264.7/RFP
YS2370 293 人胚腎細(xì)胞293
YS2371 293A 人胚腎細(xì)胞293A
YS2372 F9 F9小鼠畸胎瘤細(xì)胞/小鼠胚胎癌細(xì)胞
YS2373 H9c221 大鼠心肌細(xì)胞H9c22-1
YS2374 MXY9K MXY9K[NBL-2]犬腎細(xì)胞
YS2375 P3X63Ag8 P3X63Ag8小鼠骨髓瘤細(xì)胞
YS2376 HPNE 人胰腺導(dǎo)管細(xì)胞HPNE
YS2377 MC3T3E1Subclone24 MC3T3-E1Subclone24小鼠胚胎成骨細(xì)胞前體細(xì)胞
YS2378 3T6Swissalbino 3T6-Swissalbino小鼠胚胎成纖維細(xì)胞
YS2379 Psi2DAP Psi2DAP小鼠胚胎成纖維細(xì)胞
YS2380 SKNBE2 SK-N-BE2人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞
YS2381 L5178YTKclone372C L5178YTK+-clone3.7.2C小鼠淋巴瘤細(xì)胞
YS2382 PED PED豬內(nèi)皮細(xì)胞
YS2383 CV1[PartoftheWistarSpecialCollection] CV-1[PartoftheWistarSpecialCollection]非洲綠猴腎細(xì)胞
YS2384 VEROC1008 VEROC1008[VeroE6]非洲綠猴腎細(xì)胞
YS2385 HifiveBTITN5B14 Hi-fiveBTI-TN-5B1-4昆蟲細(xì)胞
更多細(xì)胞請(qǐng)咨詢我們：NCI-H3255人肺癌細(xì)胞株
關(guān)鍵字： NCI-H3255人肺癌細(xì)胞株;NCI-H3255;人肺癌細(xì)胞株;ATCC代購(gòu);ATCC引種;
上海雅吉生物科技有限公司成立于2011年3月，是一家面向生命科學(xué)領(lǐng)域，提供科研類試劑、耗材、儀器、技術(shù)服務(wù)的生物企業(yè)。包括分子生物學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、細(xì)胞學(xué)等 。旗下?lián)碛?“雅吉生物”、“晶風(fēng)生物”、“彩佑實(shí)業(yè)”、“GTX” 品牌。通過公司各部門員工的共同努力在行業(yè)內(nèi)擁有較高知名度，深得新老客戶厚愛，本著“優(yōu)質(zhì)、服務(wù)、信譽(yù)”的精神，堅(jiān)持以優(yōu)良的技術(shù)、優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品、良好的信譽(yù)為國(guó)內(nèi)外廣大用戶提供優(yōu)質(zhì)生物產(chǎn)品和服務(wù)。
公司在重視產(chǎn)品質(zhì)量的同時(shí)，也建立了一套集技術(shù)支持，物流售后服務(wù)等多部門聯(lián)動(dòng)服務(wù)體系，努力把我們方便、快捷、周到的服務(wù)提供給每一個(gè)客戶，雅吉生物的試劑盒，在國(guó)內(nèi)眾多重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室廣泛使用，深受廣大科研人員好評(píng)，先后在權(quán)威雜志文章中被引用。
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