產(chǎn)品名稱：人胚皮膚成纖維細(xì)胞HES
傳代方法 | 次建議1:2傳代 | 凍存條件 | 無(wú)血清凍存液（貨號(hào)：C7001） |
細(xì)胞描述 | 本庫(kù)的細(xì)胞僅用于科研工作，未經(jīng)許可不得用于其他目的，使用者不得將本庫(kù)細(xì)胞轉(zhuǎn)讓給第三者。 |
培養(yǎng)備注 | 用無(wú)菌離心管收集瓶子培養(yǎng)基，留作過(guò)渡培養(yǎng) |
人胚皮膚成纖維細(xì)胞HES貨后處理
細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是細(xì)胞運(yùn)輸?shù)霓k法。收到細(xì)胞回到自己的實(shí)驗(yàn)室后，先打開(kāi)外包裝，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超凈臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無(wú)菌操作，培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)。鏡下觀察：未超過(guò)80%匯合度時(shí)，可將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中，加入6ml完全培養(yǎng)基，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)；超過(guò)80%匯合度時(shí)，根據(jù)情況傳代或者凍存，具體操作見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)步驟。（注意發(fā)貨的是密封培養(yǎng)瓶的話，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)記得培養(yǎng)瓶蓋子擰松，傳代后建議一瓶用原瓶里面的完全培養(yǎng)基，另外一瓶用自己配的完全培養(yǎng)基）
人胚皮膚成纖維細(xì)胞HES培養(yǎng)步驟
一、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加4-6mL完全培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a）、對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的完全培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞，完全脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b）、對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
PS：若客戶收到2ml小管細(xì)胞，收到細(xì)胞后，用75%酒精噴灑整個(gè)管子消毒后放到超凈臺(tái)或安全柜內(nèi)，嚴(yán)格無(wú)菌操作；將小管細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿，加入5ml左右完全培養(yǎng)基混勻，放入培養(yǎng)箱過(guò)夜培養(yǎng)后查看細(xì)胞密度：若密度未超過(guò)80%，換液繼續(xù)培養(yǎng)，視情況傳代或者凍存。若密度超過(guò)80%，可直接進(jìn)行傳代（方法同上）。
三、細(xì)胞凍存：（注：無(wú)血清凍存液凍存細(xì)胞的方法請(qǐng)參考我司官網(wǎng)貨號(hào)：C7001）
1、細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí)，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后加入完全培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；
3、用適量的凍存液重懸細(xì)胞，并放置于凍存管中；
4、先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃
人胚皮膚成纖維細(xì)胞HES相關(guān)細(xì)胞如下：
YS2150 RL1 大鼠肺成纖維細(xì)胞RL1
YS2151 REM 大鼠胚肌細(xì)胞REM
YS2152 RES 大鼠胚皮膚成纖維細(xì)胞RES
YS2153 PtK1 袋鼠腎細(xì)胞PtK1
YS2154 PtK2 袋鼠腎細(xì)胞PtK2
YS2155 DQSHS1 迪慶綿羊皮膚成纖維細(xì)胞DQSHS1
YS2156 Mv1lu 貂肺上皮細(xì)胞Mv1lu
YS2157 ACTK1 非洲爪蟾腎細(xì)胞ACTK1
YS2158 DogL1 狗肺成纖維細(xì)胞DogL1
YS2159 NRL2 黑化大家鼠肺成纖維細(xì)胞NRL2
YS2160 CatL2 家貓肺成纖維細(xì)胞CatL2
YS2161 CatS2 家貓皮膚成纖維細(xì)胞CatS2
YS2162 RabbitS1 家兔皮膚成纖維細(xì)胞RabbitS1
YS2163 RabbitK3 家兔腎上皮細(xì)胞RabbitK3
YS2164 GHS1 金黃地鼠皮膚成纖維細(xì)胞GHS1
YS2165 SheepL1 綿羊肺成纖維細(xì)胞SheepL1
YS2166 OA3Ts 綿羊胚胎睪丸細(xì)胞OA3.Ts
YS2167 JM 人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞JM
YS2168 MT4 人T細(xì)胞白血病細(xì)胞MT4
YS2169 HFFF2 人包皮成纖維細(xì)胞HFFF2
YS2170 801D 人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞801D
YS2171 SnuC1 人結(jié)腸癌細(xì)胞SnuC1
YS2172 H157 人口腔鱗狀上皮癌細(xì)胞H157
YS2173 H33HjA1 人淋巴瘤細(xì)胞H33HjA1
YS2174 K562AZQR 人慢性骨髓性白血病細(xì)胞(耐藥株)K562AZQR
YS2175 HEL299 人胚肺成纖維細(xì)胞HEL299
YS2176 HES 人胚皮膚成纖維細(xì)胞HES
YS2177 HH8 人胚腎細(xì)胞HH8
YS2178 HEH 人胚心肌細(xì)胞HEH
YS2179 SVCT 人乳腺上皮細(xì)胞SVCT
YS2180 KPNNS 人腎上腺神經(jīng)母細(xì)胞瘤（腦轉(zhuǎn)移）KPNNS
YS2181 FHC 人小腸上皮細(xì)胞FHC
YS2182 TSEFB 樹(shù)鼩胚胎成纖維細(xì)胞TSEFB
YS2183 GPL1 豚鼠肺成纖維細(xì)胞GPL1
YS2184 GPS5 豚鼠皮膚成纖維細(xì)胞GPS5
YS2185 GPH4 豚鼠心肌細(xì)胞GPH4
YS2186 KMML1 小白鼠肺成纖維細(xì)胞KMML1
YS2187 Sarcoma180 小鼠腹水瘤細(xì)胞Sarcoma180
YS2188 FO 小鼠骨髓瘤細(xì)胞FO
YS2189 GC2spd 小鼠精母細(xì)胞GC2spd
YS2190 P388D1 小鼠淋巴樣瘤細(xì)胞P388D1
更多細(xì)胞請(qǐng)咨詢我們：人胚皮膚成纖維細(xì)胞HES
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上海雅吉生物科技有限公司成立于2011年3月，是一家面向生命科學(xué)領(lǐng)域，提供科研類試劑、耗材、儀器、技術(shù)服務(wù)的生物企業(yè)。包括分子生物學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、細(xì)胞學(xué)等 。旗下?lián)碛?“雅吉生物”、“晶風(fēng)生物”、“彩佑實(shí)業(yè)”、“GTX” 品牌。通過(guò)公司各部門員工的共同努力在行業(yè)內(nèi)擁有較高知名度，深得新老客戶厚愛(ài)，本著“優(yōu)質(zhì)、服務(wù)、信譽(yù)”的精神，堅(jiān)持以優(yōu)良的技術(shù)、優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品、良好的信譽(yù)為國(guó)內(nèi)外廣大用戶提供優(yōu)質(zhì)生物產(chǎn)品和服務(wù)。
公司在重視產(chǎn)品質(zhì)量的同時(shí)，也建立了一套集技術(shù)支持，物流售后服務(wù)等多部門聯(lián)動(dòng)服務(wù)體系，努力把我們方便、快捷、周到的服務(wù)提供給每一個(gè)客戶，雅吉生物的試劑盒，在國(guó)內(nèi)眾多重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室廣泛使用，深受廣大科研人員好評(píng)，先后在權(quán)威雜志文章中被引用。
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