產(chǎn)品名稱：EBV-轉(zhuǎn)化人淋巴細(xì)胞EBV
傳代方法 | 次建議1:2傳代 | 凍存條件 | 無(wú)血清凍存液（貨號(hào)：C7001） |
細(xì)胞描述 | 本庫(kù)的細(xì)胞僅用于科研工作，未經(jīng)許可不得用于其他目的，使用者不得將本庫(kù)細(xì)胞轉(zhuǎn)讓給第三者。 |
培養(yǎng)備注 | 用無(wú)菌離心管收集瓶子培養(yǎng)基，留作過(guò)渡培養(yǎng) |
EBV-轉(zhuǎn)化人淋巴細(xì)胞EBV貨后處理
細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是細(xì)胞運(yùn)輸?shù)霓k法。收到細(xì)胞回到自己的實(shí)驗(yàn)室后，先打開外包裝，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超凈臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無(wú)菌操作，培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)。鏡下觀察：未超過(guò)80%匯合度時(shí)，可將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中，加入6ml完全培養(yǎng)基，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)；超過(guò)80%匯合度時(shí)，根據(jù)情況傳代或者凍存，具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。（注意發(fā)貨的是密封培養(yǎng)瓶的話，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)記得培養(yǎng)瓶蓋子擰松，傳代后建議一瓶用原瓶里面的完全培養(yǎng)基，另外一瓶用自己配的完全培養(yǎng)基）
EBV-轉(zhuǎn)化人淋巴細(xì)胞EBV培養(yǎng)步驟
一、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加4-6mL完全培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a）、對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的完全培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞，完全脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b）、對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
PS：若客戶收到2ml小管細(xì)胞，收到細(xì)胞后，用75%酒精噴灑整個(gè)管子消毒后放到超凈臺(tái)或安全柜內(nèi)，嚴(yán)格無(wú)菌操作；將小管細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿，加入5ml左右完全培養(yǎng)基混勻，放入培養(yǎng)箱過(guò)夜培養(yǎng)后查看細(xì)胞密度：若密度未超過(guò)80%，換液繼續(xù)培養(yǎng)，視情況傳代或者凍存。若密度超過(guò)80%，可直接進(jìn)行傳代（方法同上）。
三、細(xì)胞凍存：（注：無(wú)血清凍存液凍存細(xì)胞的方法請(qǐng)參考我司官網(wǎng)貨號(hào)：C7001）
1、細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí)，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后加入完全培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；
3、用適量的凍存液重懸細(xì)胞，并放置于凍存管中；
4、先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃
EBV-轉(zhuǎn)化人淋巴細(xì)胞EBV相關(guān)細(xì)胞如下：
YS2124 CA2F1 小鼠雜交瘤細(xì)胞CA2F1
YS2125 CA1A9 小鼠雜交瘤細(xì)胞CA1A9
YS2126 CA6B10 小鼠雜交瘤細(xì)胞CA6B10
YS2127 TGHAVSMC 人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞TGHAVSMC
YS2128 KYSE450 人食管鱗癌細(xì)胞KYSE450
YS2129 HTR8Svneo 人胚胎滋養(yǎng)細(xì)胞HTR8Svneo
YS2130 MA10 小鼠睪丸上皮樣細(xì)胞MA10
YS2131 NE4C 小鼠腦神經(jīng)干細(xì)胞NE4C
YS2132 L2 大鼠肺上皮細(xì)胞L2
YS2133 A72 犬腫瘤成纖維細(xì)胞A72
YS2134 HIEC6 人小腸上皮細(xì)胞HIEC6
YS2135 FHs74Int 人小腸上皮細(xì)胞FHs74Int
YS2136 HEK293F 人胚腎細(xì)胞-F克隆HEK293F
YS2137 HEK293EBNA 穩(wěn)定表達(dá)EBNA1的人胚腎細(xì)胞HEK293EBNA
YS2138 3T3Swissalbino 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞3T3Swissalbino
YS2139 ZR7530 人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞ZR7530
YS2140 LL2(LLC1) 小鼠肺癌細(xì)胞LL2(LLC1)
YS2141 EPC 鯉魚上皮細(xì)胞/胖頭鰷魚上皮細(xì)胞EPC
YS2142 BABLC1 BABL/C1小鼠14天胚胎成纖維細(xì)胞BABLC1
YS2143 EBVHuman EBV-轉(zhuǎn)化人淋巴細(xì)胞EBV
YS2144 KM9304 EBV-轉(zhuǎn)化人淋巴細(xì)胞（彝族）KM9304
YS2145 MLA144 MLA144長(zhǎng)臂猿淋巴瘤細(xì)胞MLA144
YS2146 WGHL1 白化金黃地鼠肺成纖維細(xì)胞WGHL1
YS2147 ZF4 斑馬魚細(xì)胞ZF4
YS2148 CP88 草魚胚胎細(xì)胞CP88
YS2149 ZC79001 草魚吻皮細(xì)胞ZC79001
YS2150 RL1 大鼠肺成纖維細(xì)胞RL1
YS2151 REM 大鼠胚肌細(xì)胞REM
YS2152 RES 大鼠胚皮膚成纖維細(xì)胞RES
YS2153 PtK1 袋鼠腎細(xì)胞PtK1
YS2154 PtK2 袋鼠腎細(xì)胞PtK2
更多細(xì)胞請(qǐng)咨詢我們：EBV-轉(zhuǎn)化人淋巴細(xì)胞EBV
關(guān)鍵字： EBV-轉(zhuǎn)化人淋巴細(xì)胞EBV;EBV-轉(zhuǎn)化人淋巴細(xì)胞;轉(zhuǎn)化人淋巴細(xì)胞EBV;ATCC代購(gòu);ATCC引種;
上海雅吉生物科技有限公司成立于2011年3月，是一家面向生命科學(xué)領(lǐng)域，提供科研類試劑、耗材、儀器、技術(shù)服務(wù)的生物企業(yè)。包括分子生物學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、細(xì)胞學(xué)等 。旗下?lián)碛?“雅吉生物”、“晶風(fēng)生物”、“彩佑實(shí)業(yè)”、“GTX” 品牌。通過(guò)公司各部門員工的共同努力在行業(yè)內(nèi)擁有較高知名度，深得新老客戶厚愛，本著“優(yōu)質(zhì)、服務(wù)、信譽(yù)”的精神，堅(jiān)持以優(yōu)良的技術(shù)、優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品、良好的信譽(yù)為國(guó)內(nèi)外廣大用戶提供優(yōu)質(zhì)生物產(chǎn)品和服務(wù)。
公司在重視產(chǎn)品質(zhì)量的同時(shí)，也建立了一套集技術(shù)支持，物流售后服務(wù)等多部門聯(lián)動(dòng)服務(wù)體系，努力把我們方便、快捷、周到的服務(wù)提供給每一個(gè)客戶，雅吉生物的試劑盒，在國(guó)內(nèi)眾多重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室廣泛使用，深受廣大科研人員好評(píng)，先后在權(quán)威雜志文章中被引用。
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