產(chǎn)品名稱：大黃魚腎細(xì)胞PCK
傳代方法 | 次建議1:2傳代 | 凍存條件 | 無血清凍存液（貨號(hào)：C7001） |
細(xì)胞描述 | 本庫(kù)的細(xì)胞僅用于科研工作，未經(jīng)許可不得用于其他目的，使用者不得將本庫(kù)細(xì)胞轉(zhuǎn)讓給第三者。 |
培養(yǎng)備注 | 用無菌離心管收集瓶子培養(yǎng)基，留作過渡培養(yǎng) |
大黃魚腎細(xì)胞PCK貨后處理
細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是細(xì)胞運(yùn)輸?shù)霓k法。收到細(xì)胞回到自己的實(shí)驗(yàn)室后，先打開外包裝，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超凈臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作，培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)。鏡下觀察：未超過80%匯合度時(shí)，可將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中，加入6ml完全培養(yǎng)基，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)；超過80%匯合度時(shí)，根據(jù)情況傳代或者凍存，具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。（注意發(fā)貨的是密封培養(yǎng)瓶的話，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)記得培養(yǎng)瓶蓋子擰松，傳代后建議一瓶用原瓶里面的完全培養(yǎng)基，另外一瓶用自己配的完全培養(yǎng)基）
大黃魚腎細(xì)胞PCK培養(yǎng)步驟
一、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加4-6mL完全培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a）、對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的完全培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞，完全脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b）、對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
PS：若客戶收到2ml小管細(xì)胞，收到細(xì)胞后，用75%酒精噴灑整個(gè)管子消毒后放到超凈臺(tái)或安全柜內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作；將小管細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿，加入5ml左右完全培養(yǎng)基混勻，放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細(xì)胞密度：若密度未超過80%，換液繼續(xù)培養(yǎng)，視情況傳代或者凍存。若密度超過80%，可直接進(jìn)行傳代（方法同上）。
三、細(xì)胞凍存：（注：無血清凍存液凍存細(xì)胞的方法請(qǐng)參考我司官網(wǎng)貨號(hào)：C7001）
1、細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí)，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后加入完全培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；
3、用適量的凍存液重懸細(xì)胞，并放置于凍存管中；
4、先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃
大黃魚腎細(xì)胞PCK部分相關(guān)細(xì)胞如下：
YS2025 STO 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞STO
YS2026 P3X63Ag8653 小鼠骨髓瘤細(xì)胞P3X63Ag8.653
YS2028 B6YH4 小鼠雜交瘤細(xì)胞B6YH4
YS2029 Sf21 昆蟲卵巢細(xì)胞Sf21
YS2030 B82 小鼠腫瘤細(xì)胞-L929衍生的亞型B82
YS2031 IBRS2 豬腎傳代細(xì)胞IBRS2
YS2032 MA7825s8101 小鼠乳腺癌細(xì)胞MA7825s8101
YS2033 FRhk4 羅猴胎腎上皮細(xì)胞FRhk4
YS2034 HIC 人結(jié)直癌細(xì)胞HIC
YS2035 1590 人乳腺癌細(xì)胞1590
YS2036 Anglne 人卵巢癌細(xì)胞Anglne
YS2037 COC1/ddp 人卵巢癌細(xì)胞COC1細(xì)胞耐藥亞株COC1/ddp
YS2038 LLCWRC256 大鼠腹水癌細(xì)胞LLCWRC256
YS2039 SVP Vero細(xì)胞衍生株SVP
YS2040 Hs746THs746THs746T 人胃腺癌細(xì)胞Hs746THs746THs746T
YS2041 Hep3B217Hep3B217Hep3B217 人肝癌細(xì)胞Hep3B2.17Hep3B2.17Hep3B2.17
YS2042 BeWo 人胎盤絨膜癌細(xì)胞BeWo
YS2043 143BTK 人胸腺激酶缺陷細(xì)胞143BTK
YS2044 GIC 草魚腎細(xì)胞GIC
YS2045 HL 人胚肺二倍體細(xì)胞HL
YS2046 L8824 草魚肝臟細(xì)胞L8824
YS2047 CIK 草魚腎臟細(xì)胞CIK
YS2048 WEHI164 小鼠纖維肉瘤細(xì)胞WEHI164
YS2049 U251MGU251MG 人神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞U251MGU251MG
YS2050 Jurkat,CloneE61 人急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞Jurkat,CloneE61
YS2051 NRK 大鼠正常腎細(xì)胞NRK
YS2052 CA46 人Burkitts淋巴瘤細(xì)胞CA46
YS2053 RK13 兔腎細(xì)胞RK13
YS2054 H4ⅡE 大鼠肝癌細(xì)胞H4ⅡE
YS2055 IMR32 人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞IMR32
YS2056 SW626 人卵巢腺癌細(xì)胞SW626
YS2057 104C1 豚鼠胚胎細(xì)胞104C1
YS2058 NIH:OVCAR3 人卵巢腺癌細(xì)胞NIH:OVCAR3
YS2059 WI38VA13subline2RA 人胚肺細(xì)胞VA13細(xì)胞WI38VA13subline2RA
YS2060 W632 小鼠B細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞W632
YS2061 C636 幼蚊細(xì)胞C636
YS2062 PA317 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞PA317
YS2063 H4 人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞H4
YS2064 MADB106 大鼠乳腺癌細(xì)胞MADB106
YS2065 S180S2D9 小鼠腹水瘤細(xì)胞S180S2D9
YS2066 H22H8D8 小鼠肝癌細(xì)胞H22H8D8
YS2067 EACE2G8 小鼠腹水瘤細(xì)胞EACE2G8
YS2068 S2 果蠅細(xì)胞S2
更多細(xì)胞請(qǐng)咨詢我們：大黃魚腎細(xì)胞PCK
關(guān)鍵字： 大黃魚腎細(xì)胞PCK;PCK;大黃魚腎細(xì)胞;ATCC代購(gòu);ATCC引種;
上海雅吉生物科技有限公司成立于2011年3月，是一家面向生命科學(xué)領(lǐng)域，提供科研類試劑、耗材、儀器、技術(shù)服務(wù)的生物企業(yè)。包括分子生物學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、細(xì)胞學(xué)等 。旗下?lián)碛?“雅吉生物”、“晶風(fēng)生物”、“彩佑實(shí)業(yè)”、“GTX” 品牌。通過公司各部門員工的共同努力在行業(yè)內(nèi)擁有較高知名度，深得新老客戶厚愛，本著“優(yōu)質(zhì)、服務(wù)、信譽(yù)”的精神，堅(jiān)持以優(yōu)良的技術(shù)、優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品、良好的信譽(yù)為國(guó)內(nèi)外廣大用戶提供優(yōu)質(zhì)生物產(chǎn)品和服務(wù)。
公司在重視產(chǎn)品質(zhì)量的同時(shí)，也建立了一套集技術(shù)支持，物流售后服務(wù)等多部門聯(lián)動(dòng)服務(wù)體系，努力把我們方便、快捷、周到的服務(wù)提供給每一個(gè)客戶，雅吉生物的試劑盒，在國(guó)內(nèi)眾多重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室廣泛使用，深受廣大科研人員好評(píng)，先后在權(quán)威雜志文章中被引用。
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