細(xì)胞消化的小技巧
不一定要一次把所有細(xì)胞都要消化下來!
晃動培養(yǎng)盤并在顯微鏡下用肉眼觀察,只要70~80%細(xì)胞都收縮了或超過適合消化時間,就該終止消化反應(yīng),如果細(xì)胞量夠即可進(jìn)行后續(xù)傳代或?qū)嶒?yàn)步驟;如果細(xì)胞量不夠,則可視情況用不含鈣、鎂離子的平衡鹽溶液清洗仍貼壁的細(xì)胞,再進(jìn)行一次消化反應(yīng)。
▲ 消化不下來的細(xì)胞(黃)請視情況決定是否再消化一次。
不一定要吹打成完全單細(xì)胞懸液!
一般細(xì)胞脫離培養(yǎng)底物、并經(jīng)過5~10次輕柔吹打后,會在細(xì)胞懸液里形成小規(guī)模聚集(約5~10顆細(xì)胞),所以不需要過度延長消化時間想讓細(xì)胞完全分離成單細(xì)胞懸液。
消化效果不佳,先提升消化液濃度、再加長作用時間!
當(dāng)你選定了一種消化方式 (物理機(jī)械法除外),發(fā)現(xiàn)效果不佳,首先應(yīng)考慮提高EDTA或胰酶濃度,效果再不佳才加長消化的作用時間,避免細(xì)胞長時間浸泡在消化液中造成的細(xì)胞膜損傷。
(一般消化液使用:0.02%~0.04% EDTA作用5-20分鐘;0.2~0.5% 胰蛋白酶作用1~5分鐘)
結(jié)語
細(xì)胞消化 ,是一個看似很簡單,但是有很多技術(shù)含量的步驟。消化好壞、是否污染、有無受傷,都在這短短的五六分鐘里決定。
當(dāng)我們已經(jīng)可以順利操作細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn),接下來要思考的,就是如何讓細(xì)胞長得更健康、更均一、做出來的實(shí)驗(yàn)才會更完美。
YS1904 LB31ATCCHB298 小鼠雜交瘤細(xì)胞LB3.1ATCCHB298
YS1905 MOVAS1 小鼠主動脈血管平滑肌細(xì)胞MOVAS1
YS1906 TC1crl2493 小鼠淋巴母細(xì)胞b淋巴細(xì)胞TC1crl2493
YS1907 RAW2647SEAP/LUC 小鼠白血病細(xì)胞RAW264.7SEAP/LUC
YS1908 NSC34 小鼠神經(jīng)元細(xì)胞NSC34
YS1909 CTLA4Ig24 中國倉鼠卵巢細(xì)胞CTLA4Ig24
YS1910 Lec1 倉鼠卵巢細(xì)胞Lec1
YS1911 OK 負(fù)鼠腎上皮細(xì)胞OK
YS1912 AB22 小鼠胚胎干細(xì)胞AB2.2
YS1913 2666 小鼠胰腺腺泡癌細(xì)胞2666
YS1914 C1498 小鼠急性骨髓性白血病C1498
YS1915 B16F10OVA(OPT) 小鼠黑色素瘤細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記-OVA雞基因修飾B16F10OVA(OPT)
YS1916 SCC7 小鼠頭頸鱗癌細(xì)胞SCC7
YS1917 GT11 小鼠垂體瘤細(xì)胞GT11
YS1918 GT17 小鼠垂體瘤細(xì)胞GT17
YS1919 DC24 小鼠樹突狀細(xì)胞DC2.4
YS1920 MN9D 小鼠中腦多巴胺能神經(jīng)元細(xì)胞MN9D
YS1921 CHOK1 倉鼠卵巢細(xì)胞CHOK1
YS1922 HEIOC1 小鼠耳蝸毛細(xì)胞HEIOC1
YS1923 CTLL2 小鼠T淋巴細(xì)胞CTLL2
YS1924 E0771 小鼠髓樣乳腺癌細(xì)胞E0771
YS1925 moc1 小鼠口腔鱗狀細(xì)胞moc1
YS1926 moc2 小鼠口腔鱗狀細(xì)胞moc2
YS1927 min6 小鼠胰島β細(xì)胞min6
YS1928 LA795 小鼠肺癌細(xì)胞-腺癌LA795
YS1929 hep534 小鼠肝癌細(xì)胞hep53.4
YS1930 CMT6461 小鼠肺腺癌細(xì)胞CMT6461
YS1931 MELorMEL745AclDS19 小鼠紅白血病細(xì)胞MELorMEL745Acl.DS19
YS1932 JAWS2 小鼠骨髓未成熟樹突狀細(xì)胞JAWS2
YS1933 MCA205 小鼠纖維肉瘤細(xì)胞MCA205
YS1934 NIH3T3/RFP 小鼠胚胎細(xì)胞NIH3T3/RFP
YS1935 YUMM17 小鼠黑色素瘤細(xì)胞YUMM1.7
YS1936 MC38OVA 小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞-OVA雞基因修飾MC38OVA
YS1937 15P1 小鼠睪丸上皮細(xì)胞15P1
YS1938 AtT20 小鼠垂體瘤細(xì)胞AtT20
YS1939 cmt93 小鼠結(jié)直腸癌細(xì)胞cmt93
YS1940 L6565 小鼠白血病細(xì)胞L6565
YS1941 Y1[Y1] 小鼠腎上腺皮質(zhì)瘤細(xì)胞Y1[Y1]
YS1942 CFSC8B 大鼠永生型肝星狀細(xì)胞CFSC8B
YS1943 AR42J 大鼠胰腺外分泌腺腫瘤細(xì)胞AR42J
YS1944 INS1 大鼠胰島細(xì)胞瘤細(xì)胞INS1
YS1945 RSC96 大鼠雪旺細(xì)胞RSC96
YS1946 A7r5 大鼠胸大動脈平滑肌細(xì)胞A7r5
更多細(xì)胞請咨詢我們:小鼠雜交瘤細(xì)胞LB3.1ATCCHB298