產(chǎn)品名稱：小鼠肺癌細胞LL2（LLC1）
傳代方法 | 次建議1:2傳代 | 凍存條件 | 無血清凍存液（貨號：C7001） |
細胞描述 | 本庫的細胞僅用于科研工作，未經(jīng)許可不得用于其他目的，使用者不得將本庫細胞轉讓給第三者。 |
培養(yǎng)備注 | 用無菌離心管收集瓶子培養(yǎng)基，留作過渡培養(yǎng) |
小鼠肺癌細胞LL2（LLC1）到貨后處理
細胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是細胞運輸?shù)霓k法。收到細胞回到自己的實驗室后，先打開外包裝，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內，嚴格無菌操作，培養(yǎng)箱靜置2-4小時。鏡下觀察：未超過80%匯合度時，可將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中，加入6ml完全培養(yǎng)基，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)；超過80%匯合度時，根據(jù)情況傳代或者凍存，具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。（注意發(fā)貨的是密封培養(yǎng)瓶的話，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)記得培養(yǎng)瓶蓋子擰松，傳代后建議一瓶用原瓶里面的完全培養(yǎng)基，另外一瓶用自己配的完全培養(yǎng)基）
小鼠肺癌細胞LL2（LLC1）培養(yǎng)步驟
一、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加4-6mL完全培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
二、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
a）、對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的完全培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細胞，完全脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液，將細胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b）、對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
PS：若客戶收到2ml小管細胞，收到細胞后，用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超凈臺或安全柜內，嚴格無菌操作；將小管細胞轉移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿，加入5ml左右完全培養(yǎng)基混勻，放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細胞密度：若密度未超過80%，換液繼續(xù)培養(yǎng)，視情況傳代或者凍存。若密度超過80%，可直接進行傳代（方法同上）。
三、細胞凍存：（注：無血清凍存液凍存細胞的方法請參考我司官網(wǎng)貨號：C7001）
1、細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細胞一次；
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后加入完全培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打細胞使之脫落，然后將懸液轉移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；
3、用適量的凍存液重懸細胞，并放置于凍存管中；
4、先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃
小鼠肺癌細胞LL2（LLC1）部分相關細胞如下：
YS1838 EL4 小鼠淋巴瘤細胞EL4
YS1839 L5178YTKclone(372C) 小鼠淋巴瘤細胞L5178YTKclone(3.7.2C)
YS1840 YAC1 小鼠淋巴瘤細胞YAC1
YS1841 SVEC410 小鼠淋巴結內皮細胞SVEC410
YS1842 Ana1 小鼠巨噬細胞Ana1
YS1843 GC1spg 小鼠精原細胞系GC1spg
YS1844 CT26/LUC 小鼠結腸癌細胞CT26/LUC
YS1845 MC38/LUC 小鼠結腸癌細胞MC38/LUC
YS1846 MC38 小鼠結腸癌細胞MC38
YS1847 CT26 小鼠結腸癌細胞CT26
YS1848 CT26WT 小鼠結腸癌細胞CT26.WT
YS1849 GL261/LUC 小鼠膠質細胞瘤GL261/LUC
YS1850 GL261 小鼠膠質細胞瘤GL261
YS1851 P19 小鼠畸胎瘤細胞P19
YS1852 B16F10/LUC 小鼠黑色素瘤細胞熒光素酶標記B16F10/LUC
YS1853 B16 小鼠黑色素瘤細胞B16
YS1854 B16B 小鼠黑色素瘤細胞B16B
YS1855 B16F10 小鼠黑色素瘤細胞B16F10
YS1856 HT22 小鼠海馬神經(jīng)元細胞HT22
YS1857 MLOY4 小鼠骨樣細胞MLOY4
YS1858 Sp20 小鼠骨髓瘤細胞Sp20
YS1859 Sp20Ag14 小鼠骨髓瘤細胞Sp20Ag14
YS1860 OP9 小鼠骨髓基質細胞OP9
YS1861 K7M2WT/LUC 小鼠骨肉瘤成骨細胞K7M2WT(K7M2WT)/LUC
YS1862 K7M2WT 小鼠骨肉瘤成骨細胞K7M2WT(K7M2wt)
YS1863 TM3 小鼠睪丸間質細胞TM3
YS1864 AML12 小鼠肝實質細胞AML12
YS1865 HEPA16/LUC 小鼠肝癌細胞HEPA16/LUC
YS1866 HEPA16 小鼠肝癌細胞HEPA16
YS1867 H22 小鼠肝癌細胞H22
YS1868 S180 小鼠腹水瘤細胞S180
YS1869 MLE12 小鼠肺上皮細胞MLE12
YS1870 MHS 小鼠肺泡巨噬細胞MHS
YS1871 LLC/LUC 小鼠肺癌細胞LLC/LUC
YS1872 LL2（LLC1） 小鼠肺癌細胞LL2（LLC1）
YS1873 LLC 小鼠肺癌細胞LLC
YS1874 P815 小鼠肥大細胞瘤細胞P815
YS1875 RAW2647/GFP 小鼠單核巨噬細胞白血病細胞+GFPRAW264.7/GFP
YS1876 RAW2647 小鼠單核巨噬細胞白血病細胞RAW264.7
YS1877 J774A1 小鼠單核巨噬細胞J774A.1
YS1878 L929 小鼠成纖維細胞/結締組織成纖維細胞L929
YS1879 NCTCclone929 小鼠成纖維細胞/結締組織成纖維細胞NCTCclone929
YS1880 C2C12 小鼠成肌細胞C2C12
YS1881 MB49 小鼠膀胱癌細胞MB49
YS1882 P388 小鼠白血病細胞P388
YS1883 RAG 小鼠腎腺癌細胞RAG
YS1884 TCMK1 小鼠腎小管上皮細胞TCMK1
YS1885 A20STR 小B細胞淋巴瘤細胞A20STR
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