中文名：RNase抑制劑（RNasin）
英文名：RNase Inhibitor（RNasin）
純度：40U/μl
貨號：R292575
包裝：1ml
存儲溫度：-20°C儲存
產(chǎn)品介紹：
產(chǎn)品說明
本制品是經(jīng)過大腸桿菌表達(dá)的重組蛋白，與RNase A形成 1：1 復(fù)合體，對RNase表現(xiàn)高度的非競爭性抑制，本品屬蛋白質(zhì)性質(zhì)，與其它競爭性抑制劑（核酸類、無機(jī)磷酸類）不同，可以很容易地通過苯酚處理將其從反應(yīng)體系中除去。
產(chǎn)品內(nèi)容
RNase Inhibitor（RNasin）（40U/μl）
純度
1）300U的RNasin和1μg的λDNA-Hind III分解物在37℃下反應(yīng)1小時(shí)，DNA的電泳譜帶不發(fā)生變化。
2）300U的RNasin和 1μg的Closed circμlar（RFI）pBR322 DNA 在37℃下反應(yīng)1小時(shí)，DNA的電泳譜帶不發(fā)生變化。
3）100U的RNasin和 1μg的16S，23S rRNA在37℃下反應(yīng)1小時(shí)，RNA的電泳譜帶不發(fā)生變化。
4）SDS-PAGE：在分子量64KDa處是單一帶。
應(yīng)用
1）cDNA 合成反應(yīng)；
2）多核糖體的分離（Polysome isolation）；
3）體外翻譯（In vitro translation）；
4）SP6 或 T7 RNA 聚合酶的體外轉(zhuǎn)錄
5）體外無細(xì)胞系統(tǒng)轉(zhuǎn)錄（In vitro transcription with cell-free extract）。
使用注意
1）抑制活性的 pH 值范圍較廣，在 pH7～8 時(shí)表現(xiàn)最大活性；
2）起泡或強(qiáng)烈攪拌（Vortex 等）會引起失活；
3）不抑制 RNase H 活性。
使用例
cDNA 第一條鏈的合成。
在微量離心管中配制下列反應(yīng)液，全量為20μl
試劑 | 使用量 | 終濃度 |
Total RNA or Poly（A）RNA | 1-5μg | — |
5×MMLV RT Buffer | 4μl | 1× |
dNTP Mixture（25mM ） | 0.4μl | 0.5mM |
Oligo dT or Random Primer （20μM） | 1μl | 1μM |
RNasin（40U/μl） | 1μl | 2U/μl |
MMLV Reverse Transcriptase（200U/μl） | 1μl | — |
超純水 | Up to 20μl | — |
總體積 | 20μl | — |
1)?輕攪拌。
3)?室溫下10min放置后，移入42℃溫槽中。
4)?42℃保溫1小時(shí)。
4)?把樣品移入冰中冷卻2min。
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