中文名：Lipo2000轉(zhuǎn)染試劑
英文名：Lipo2000 Transfection Reagent
貨號：L266177
包裝：1.5ml、0.75ml
存儲溫度：2-8°C儲存,避光
產(chǎn)品介紹：
產(chǎn)品說明
Lipo2000轉(zhuǎn)染效率介于Lip2000和Lip3000之間，毒性更低，轉(zhuǎn)染效率更高，是一種新型的陽離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑。適合于將核酸(DNA和RNA)轉(zhuǎn)染入真核細(xì)胞，具有低細(xì)胞毒性；對多種類型的細(xì)胞和培養(yǎng)板都具有高轉(zhuǎn)染效率；轉(zhuǎn)染時血清的存在不影響轉(zhuǎn)染效率的優(yōu)點。
適用范圍：貼壁細(xì)胞和懸浮細(xì)胞（哺乳動物細(xì)胞系）的轉(zhuǎn)染。
質(zhì)粒DNA的轉(zhuǎn)染
對大多數(shù)細(xì)胞來說，DNA(μg)與Lipo2000 (μl)的比例為1:2~1:3。轉(zhuǎn)染時高的細(xì)胞密度可以得到高的轉(zhuǎn)染效率和表達(dá)水平，并能減少細(xì)胞毒性。
1.?以24孔板為例
貼壁細(xì)胞： 轉(zhuǎn)染前一天，用500 μl不含抗生素的培養(yǎng)基接種0.5～2×10^5細(xì)胞，使之第二天能達(dá)到70-90%匯合。
懸浮細(xì)胞：在準(zhǔn)備DNA-Lip2000復(fù)合物之前，用500 μl不含抗生素的培養(yǎng)基接種4～8×10^5細(xì)胞即可。
2.?對每個轉(zhuǎn)染樣品，進(jìn)行以下操作
a.?在eppendorf管里分別加入50 μl Opti-MEM I ReLipced Serum Medium和0.8 μg DNA輕柔混勻，制成DNA稀釋液。
b.?在另一個eppendorf管里分別加入50μl Opti-MEMI ReLipced Serum Medium和2.0 μl Lipo2000(注意用前先混勻)，輕柔混勻，制成Lip2000 稀釋液，室溫靜置5分鐘。
c.?將DNA稀釋液和Lip2000稀釋液混合，輕柔混勻，室溫靜置20分鐘， 形成DNA-Lip2000復(fù)合物。DNA-Lip2000復(fù)合物在室溫下可穩(wěn)定存在6小時。
3.?將DNA-Lip2000復(fù)合物加入到接種好的細(xì)胞中，將培養(yǎng)板輕輕地前后搖動，使復(fù)合物分散均勻。
4.?在37℃ CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4-6小時后更換培養(yǎng)基,繼續(xù)培養(yǎng)18～48小時。
5.?如果要篩選穩(wěn)定細(xì)胞株，則在轉(zhuǎn)染24小時后將細(xì)胞按照1:10或更高的比例接種到新鮮培養(yǎng)基中，第二天加入選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行篩選。
質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染的優(yōu)化 為達(dá)到最高的轉(zhuǎn)染效率和降低細(xì)胞毒性的影響，可以對DNA和Lip2000的比例以及細(xì)胞密度進(jìn)行優(yōu)化，一般在1:0.5~1:5的范圍內(nèi)優(yōu)化DNA (μg)和Lip2000 (μl) 的比例。
不同細(xì)胞培養(yǎng)板中轉(zhuǎn)染時培養(yǎng)基、核酸及Lipo2000用量
常見細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率（僅供參考，實驗條件不同轉(zhuǎn)染效率會有差別）
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關(guān)鍵字： Lipo2000轉(zhuǎn)染試劑;Lipo2000 Transfection Reagent
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