中文名：熱啟動(dòng)Taq DNA 聚合酶
英文名：Hot Start Taq DNA Polymerase
純度：5U/μL
貨號(hào)：H292167
包裝：10ku、1ku、5ku
存儲(chǔ)溫度：-20°C儲(chǔ)存
產(chǎn)品介紹：
產(chǎn)品說(shuō)明：
Hotstart Taq DNA Polymerase High-concentration是一種適體基團(tuán)修飾的耐熱性TAQ DNA聚合酶，高溫加熱前，適體修飾基團(tuán)與Taq酶結(jié)合，抑制聚合酶的活性，避免了引物延伸的非特異性擴(kuò)增或引物二聚體的產(chǎn)生，增強(qiáng)了DNA擴(kuò)增的特異性、靈敏度和穩(wěn)定性，可廣泛適用于常規(guī)PCR、多重PCR及巢式PCR等。經(jīng)過(guò)95℃熱激10min后，該酶即可恢復(fù)活性。此外 Hotstart Taq DNA Polymerase High-concentration沒(méi)有檢測(cè)到3'→5'校對(duì)外切酶活性，但具有5'→3'外切酶活性，可用于熒光定量PCR的檢測(cè)。Hotstart Taq DNA Polymerase High-concentration在常溫下沒(méi)有活性，便于PCR實(shí)驗(yàn)的常溫操作。
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產(chǎn)品內(nèi)容：
1.? Hotstart Taq DNA Polymerase High-concentration (10 U/μl )
2.? 5×Hotstart Taq Buffer（ Mg2? Plus）
3.? Solution I (10×)
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活性定義：74℃，30 min，使 10 nmol dNTP 摻入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定義為 1 個(gè)活性單位。
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使用方法：
1. PCR 反應(yīng)體系的設(shè)置：
a. 溶解并混勻 PCR 反應(yīng)所需的各種溶液。并放置于冰浴上或冰盒內(nèi)。建議反應(yīng) PCR 液體分裝使用，避免反復(fù)凍融。
b. 參考下表設(shè)置 PCR 反應(yīng),建議 PCR 反應(yīng)體系的配置在冰浴或在冰盒上進(jìn)行：
※ 模板 DNA 用量:為了保證反應(yīng)的靈敏性，25 μl 體系使用 10? 拷貝的靶序列作為模板，可參考下表計(jì)算需加入 PCR 體系的模板量。
1 μg 各種來(lái)源的 DNA 對(duì)應(yīng)的摩爾數(shù)
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例如：純化的人類基因組 DNA 濃度為 1 μg/μl，某基因在人類基因組中拷貝數(shù)為 10，其單位體積拷貝數(shù)為：?
3.0× 10? mol/μg × 1 μg/μl × 10 copy/mol
=3.0× 10? copy/μl
1× 10? copy/ (3.0× 10? copy/μl)
= 1/300 μl
即：1/300 ul 濃度為 1 ug/μl 的人類基因組 DNA 中含 10? 拷貝該基因，稀釋 300 倍后加 1μl 至 25 μl PCR 體系。為保證反應(yīng)的特異性，DNA 終濃度應(yīng)小于 10 ng/ul，過(guò)多的 DNA 可能會(huì)出現(xiàn)涂抹帶甚至無(wú)特異性條帶。
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c. 用移液器輕輕吹打混勻或輕微 Vortex 混勻，室溫離心數(shù)秒，使液體積聚于管底。
d. 各設(shè)置好的 PCR 反應(yīng)管置于 PCR 儀上，開(kāi)始 PCR 反應(yīng)。
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2. PCR 反應(yīng)參數(shù)的設(shè)置：
本產(chǎn)品是經(jīng)過(guò)適體修飾型 Hotstart Taq DNA Polymerase High-concentration，為了使 PCR 的擴(kuò)增效率、定量精度等達(dá)到最佳，建議熱激時(shí)間為 95℃ ，10 分鐘
3.產(chǎn)品包裝：
產(chǎn)品組成 | 1KU | 5KU | 儲(chǔ)存溫度 | Hotstart Taq DNA Polymerase (5 U/μl ) | 200μl | 1ml | -20℃ | 5×Hotstart Taq Buffer（Mg2+ Plus） | 4ml | 20ml | -20℃ | Solution I (10×) | 2ml | 10ml | -20℃ |
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