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Calcein AM /PI試劑盒,Calcein AM /PI Kit
  • Calcein AM /PI試劑盒,Calcein AM /PI Kit

aladdin 阿拉丁 C272922 Calcein AM /PI試劑盒 AM≥90%,PI≥95%

價(jià)格 2471.90
包裝 500t
最小起訂量 500t
發(fā)貨地 上海
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更新日期 2024-11-29
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產(chǎn)品詳情

中文名稱:Calcein AM /PI試劑盒英文名稱:Calcein AM /PI Kit
品牌: 阿拉丁產(chǎn)地: 上海
保存條件: 避光,-20°C儲存,干燥純度規(guī)格: AM≥90%,PI≥95%
產(chǎn)品類別: 化學(xué)和生化試劑 生化試劑
運(yùn)輸條件: 超低溫冰袋運(yùn)輸產(chǎn)品規(guī)格: 500t
貨號: C272922是否進(jìn)口:
2024-11-29 Calcein AM /PI試劑盒 Calcein AM /PI Kit 500t/2471.90RMB 2471.90 阿拉丁 上海 避光,-20°C儲存,干燥 AM≥90%,PI≥95% 化學(xué)和生化試劑 生化試劑

中文名:Calcein AM /PI試劑盒

英文名:Calcein AM /PI Kit

純度:AM≥90%,PI≥95%

貨號:C272922

包裝:500t

存儲溫度:避光,-20°C儲存,干燥

產(chǎn)品介紹:

產(chǎn)品介紹:

分子式: C46H46N2O23
分子量:994.86

鈣?綠素-AM (Calcein-AM) 和碘化丙啶(PI) 溶液,分別對活細(xì)胞和死細(xì)胞染色,可用于同時(shí)對活細(xì)胞和死細(xì)胞進(jìn)行熒光染色。Calcein-AM的乙酸甲基酯親脂性很高,使其可透過細(xì)胞膜。盡管Calcein-AM本身并不是熒光分子,但通過活細(xì)胞內(nèi)的酯酶作用,Calcein-AM能脫去AM基,產(chǎn)生的Calcein能發(fā)出強(qiáng)綠色熒光 (激發(fā): 490 nm,發(fā)射: 515 nm)。因此Calcein-AM僅對活細(xì)胞染色。另一方面,作為核染色染料的PI不能穿過活細(xì)胞的細(xì)胞膜。它穿過死細(xì)胞膜的無序區(qū)域而到達(dá)細(xì)胞核,并嵌入細(xì)胞的DNA雙螺旋從而產(chǎn)生紅色熒光 (激發(fā): 535 nm,發(fā)射: 617 nm)。由于Calcein和PI-DNA都可被490 nm激發(fā),因此可用熒光顯微鏡同時(shí)觀察活細(xì)胞和死細(xì)胞。用545 nm激發(fā),僅可觀察到死細(xì)胞。由于不同細(xì)胞系的最佳染色條件不同,我們建議個(gè)別確定Calcein-AM和PI的合適濃度。
I.試劑?

Calcein-AM 4mM 50uL in DMSO; Unit Size #500 assays·PI (2mM) 150uL in water
II.操作說明
用熒光顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài),以HeLa細(xì)胞染色為例,請注意不同的細(xì)胞種類、不同濃度,有不同的觀察條件。根據(jù)細(xì)胞條件,摸索不同條件下的細(xì)胞貼壁情況和試劑濃度的配制等最佳條件。
1.染色溶液的配制
1) 將Calcein-AM儲備液和PI儲備液平衡到室溫。
2)分別加 2.5 μl Calcein-AM原液和 12.5μl PI原液至5 mL PBS(pH=7.4)中配制成染色工作液。染色工作液中 Calcein-AM的濃度為2 μmol/L,PI的濃度約為 5 μmol/L。
2.細(xì)胞染色
1)染色HeLa細(xì)胞等貼壁細(xì)胞時(shí),先用Trypsin-EDTA等消化細(xì)胞,制備成細(xì)胞懸液。
2)將細(xì)胞懸液離心3分鐘(1,000 rpm)。
3)去除上清液,加入PBS緩沖液,細(xì)胞數(shù)量調(diào)整至105-106個(gè)/ml。再用移液器充分混勻。
4)由于培養(yǎng)基中的血清等含有酯酶,Calcein-AM遇水會(huì)分解,會(huì)導(dǎo)致空白上升,所以需要離心數(shù)次,用PBS洗滌數(shù)次直到完全洗凈。
5)將200 μl細(xì)胞懸液移至小試管中,加入100 μl染色工作液,在37°C下孵育15分鐘。6)在蓋玻片上滴加適量的染色的細(xì)胞溶液。7)在熒光顯微鏡下,先用490±10 nm波?激發(fā),觀察?綠色的活細(xì)胞,還可以同時(shí)觀察到紅色的死細(xì)胞,然后用545 nm波?激發(fā),能夠看到紅色的死細(xì)胞。
3.染色試劑的最佳濃度
Calcein-AM和PI最佳濃度根據(jù)細(xì)胞種類而定,通過以下的操作,可找到不同細(xì)胞染色試劑的最佳濃度。
1)通過在0.1%皂苷或?0.1-0.5%毛地黃皂苷中孵育10分鐘或通過在70%乙醇中孵育30分鐘制備死細(xì)胞。
2)用0.1-10 μM PI溶液對死細(xì)胞染色,以便找到僅對細(xì)胞核染色而不對細(xì)胞質(zhì)染色的PI濃度。
3)用0.1-10 μM Calcein-AM溶液對死細(xì)胞染色,以便找到不對細(xì)胞質(zhì)染色的Calcein-AM濃度。接著用該濃度的Calcein-AM對活細(xì)胞染色以檢驗(yàn)活細(xì)胞可否被染色。
III.注意事項(xiàng)
1) Calcein-AM的ester部位遇到濕氣會(huì)分解,使用后請?jiān)?20度下密閉冷凍保存,防止水分進(jìn)入。Calcein-AM儲備液用緩沖液或培養(yǎng)基等稀釋時(shí)盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
2)使用時(shí)一定要帶手套、眼罩、口罩。萬一接觸到皮膚的話,迅速使用大量水清洗。

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公司簡介

上海阿拉丁生化科技股份有限公司是A股上市公司((股票代碼:688179),專注于科研試劑的研發(fā)、生產(chǎn)和銷售,已陸續(xù)建立多個(gè)工廠和研發(fā)中心。作為領(lǐng)軍企業(yè),阿拉丁始終堅(jiān)持質(zhì)量第一,連續(xù)13年被評為“最受歡迎試劑品牌”。 阿拉丁目前常備庫存試劑產(chǎn)品品種超過7萬種,SKU總數(shù)超過46萬,產(chǎn)品線涵蓋了化學(xué)試劑、生化試劑、藥靶配體、蛋白質(zhì)和抗體等多個(gè)領(lǐng)域,是國內(nèi)少數(shù)化學(xué)試劑到生物試劑全面發(fā)展的國產(chǎn)試劑品牌,產(chǎn)品同步發(fā)布在我們國內(nèi)外電商平臺。
成立日期 2009-03-16 (16年) 注冊資本 14130.676萬人民幣
員工人數(shù) 500人以上 年?duì)I業(yè)額 ¥ 1億以上
主營行業(yè) 生物化工,化學(xué)試劑 經(jīng)營模式 工廠,試劑
  • 上海阿拉丁生化科技股份有限公司
VIP 1年
  • 公司成立:16年
  • 注冊資本:14130.676萬人民幣
  • 企業(yè)類型:股份有限公司(上市、自然人投資或控股)
  • 主營產(chǎn)品:化學(xué)試劑、藥靶配體、蛋白、抗體、材料科學(xué)等
  • 公司地址:上海市浦東新區(qū)新金橋路36號上海國際財(cái)富中心南塔16F
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