中文名:堿性磷酸酶顯色試劑盒(40x)
英文名:BCIP/NBT Kit(40x)
貨號(hào):B273090
包裝:40ml
存儲(chǔ)溫度:2-8°C儲(chǔ)存,避光,干燥
產(chǎn)品介紹:
產(chǎn)品簡介
BCIP (5-Bromo-4-chloro-3-indolyl phosphate) 5-溴-4-氯-3-吲哚-磷酸鹽+NBT (四唑硝基藍(lán))?是堿性磷酸酶(AP)最佳的底物組合之一。在堿性磷酸酶的催化下,BCIP會(huì)被水解而產(chǎn)生強(qiáng)反應(yīng)性的產(chǎn)物,該產(chǎn)物與NBT發(fā)生反應(yīng),形成不溶性的深藍(lán)色至藍(lán)紫色化合物。該試劑盒可用于AP系統(tǒng)的IHC?和Western Blot?實(shí)驗(yàn)的酶促顯色。在AP催化下,在組織切片或印跡膜上結(jié)合了AP偶聯(lián)物的地方產(chǎn)生深藍(lán)色沉淀,可根據(jù)顏色反應(yīng)來確定目的蛋白的位置及表達(dá)情況。
產(chǎn)品組分
40×BCIP:1 ml
40×NBT:1 ml
BCIP/NBT Buffer:40 ml
注意事項(xiàng)
1.工作液應(yīng)現(xiàn)配現(xiàn)用,配制好的工作液1小時(shí)內(nèi)有效。
2.工作液用量必需充足,保證完全覆蓋組織片或印跡膜。?
3.為獲得最佳實(shí)驗(yàn)結(jié)果,請(qǐng)務(wù)必優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件。
4.NBT有毒,使用時(shí)請(qǐng)采取必要的防護(hù)措施。
5.本產(chǎn)品僅用于科研,不能用于人體實(shí)驗(yàn)或人體治療。
使用方法
1.BCIP/NBT顯色工作液配制:
根據(jù)需要量,將40×BCIP、40×NBT和BCIP/NBT Buffer以1:1:38的體積比混勻后,即為BCIP/NBT顯色工作液。
2.顯色:
1)印跡膜顯色:將配制好的工作液滴加在印跡膜上(或?qū)⒂≯E膜傾入到BCIP/NBT顯色工作液中),室溫避光孵育3-10分鐘。顯色完畢后,將膜浸入水中,終止反應(yīng)。
2)組織切片或細(xì)胞爬片顯色:滴加適量的BCIP/NBT顯色工作液于需要顯色的組織切片或細(xì)胞爬片上,室溫避光孵育3-10分鐘。顯微鏡下觀察控制顯色時(shí)間,當(dāng)達(dá)到最佳顯色效果后,自來水沖洗終止顯色。顯色后的切片經(jīng)復(fù)染、脫水透明,封片后可長期保存。
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