產(chǎn)品名稱：人胚腎細(xì)胞穩(wěn)轉(zhuǎn)ACE2過表達(dá)HEK293TACE2
傳代方法 | 次建議1:2傳代 | 凍存條件 | 無血清凍存液（貨號：C7001） |
細(xì)胞描述 | 本庫的細(xì)胞僅用于科研工作，未經(jīng)許可不得用于其他目的，使用者不得將本庫細(xì)胞轉(zhuǎn)讓給第三者。 |
培養(yǎng)備注 | 用無菌離心管收集瓶子培養(yǎng)基，留作過渡培養(yǎng) |
人胚腎細(xì)胞穩(wěn)轉(zhuǎn)ACE2過表達(dá)HEK293TACE2收到后處理
細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是細(xì)胞運(yùn)輸?shù)霓k法。收到細(xì)胞回到自己的實(shí)驗(yàn)室后，先打開外包裝，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超凈臺內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作，培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)。鏡下觀察：未超過80%匯合度時(shí)，可將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中，加入6ml完全培養(yǎng)基，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)；超過80%匯合度時(shí)，根據(jù)情況傳代或者凍存，具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。（注意發(fā)貨的是密封培養(yǎng)瓶的話，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)記得培養(yǎng)瓶蓋子擰松，傳代后建議一瓶用原瓶里面的完全培養(yǎng)基，另外一瓶用自己配的完全培養(yǎng)基）
人胚腎細(xì)胞穩(wěn)轉(zhuǎn)ACE2過表達(dá)HEK293TACE2培養(yǎng)步驟
一、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加4-6mL完全培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a）、對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的完全培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞，完全脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b）、對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
PS：若客戶收到2ml小管細(xì)胞，收到細(xì)胞后，用75%酒精噴灑整個(gè)管子消毒后放到超凈臺或安全柜內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作；將小管細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿，加入5ml左右完全培養(yǎng)基混勻，放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細(xì)胞密度：若密度未超過80%，換液繼續(xù)培養(yǎng)，視情況傳代或者凍存。若密度超過80%，可直接進(jìn)行傳代（方法同上）。
三、細(xì)胞凍存：（注：無血清凍存液凍存細(xì)胞的方法請參考我司官網(wǎng)貨號：C7001）
1、細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí)，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后加入完全培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；
3、用適量的凍存液重懸細(xì)胞，并放置于凍存管中；
4、先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃
人胚腎細(xì)胞穩(wěn)轉(zhuǎn)ACE2過表達(dá)HEK293TACE2部分相關(guān)細(xì)胞如下：
YS1459 Kyse520 人食管鱗癌細(xì)胞Kyse520
YS1460 HS5 人骨髓基質(zhì)細(xì)胞HS5
YS1461 HSC3 人口腔鱗狀癌細(xì)胞HSC3
YS1462 MUTZ1 人骨髓增生異常綜合征細(xì)胞株MUTZ1
YS1463 KYSE180 人食管鱗狀細(xì)胞癌KYSE180
YS1464 SRA0104 人晶體上皮細(xì)胞SRA0104
YS1465 KYSE140 人食管鱗狀細(xì)胞癌KYSE140
YS1466 WSUDLCL2 人彌漫大B淋巴瘤細(xì)胞WSUDLCL2
YS1467 RT112 人膀胱癌細(xì)胞RT112
YS1468 JIMT1 人乳腺癌細(xì)胞ER陰性（浸潤性乳腺導(dǎo)管癌）JIMT1
YS1469 NUGC3 人胃癌細(xì)胞NUGC3
YS1470 MOLM13 人急性髓原白血病細(xì)胞MOLM13
YS1471 MeWo 人惡性黑色素瘤細(xì)胞MeWo
YS1472 NCIH1666 人肺支氣管癌細(xì)胞/微浸潤肺腺癌NCIH1666
YS1473 NCIH2122 人肺腺癌細(xì)胞NCIH2122
YS1474 NB4 人急性早幼粒白血病細(xì)胞NB4
YS1475 HEK293TACE2 人胚腎細(xì)胞穩(wěn)轉(zhuǎn)ACE2過表達(dá)HEK293TACE2
YS1476 RPMI2650 人鼻腔上癌細(xì)胞/頭頸部鱗狀細(xì)胞癌RPMI2650
YS1477 OCILY3 人彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞OCILY3
YS1478 ExpiHEK293F 人胚腎細(xì)胞ExpiHEK293F
YS1479 NCIH522 人肺癌細(xì)胞NCIH522
YS1480 SNU16 人胃癌細(xì)胞SNU16
YS1481 FTC133 人甲狀腺癌細(xì)胞FTC133
YS1482 GCIY 人胃癌細(xì)胞GCIY
YS1483 Hce8693 人盲腸腺癌細(xì)胞(未分化)Hce8693
YS1484 LC2AD 人肺癌腺癌細(xì)胞LC2AD
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上海雅吉生物科技有限公司成立于2011年3月，是一家面向生命科學(xué)領(lǐng)域，提供科研類試劑、耗材、儀器、技術(shù)服務(wù)的生物企業(yè)。包括分子生物學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、細(xì)胞學(xué)等 。旗下?lián)碛?“雅吉生物”、“晶風(fēng)生物”、“彩佑實(shí)業(yè)”、“GTX” 品牌。通過公司各部門員工的共同努力在行業(yè)內(nèi)擁有較高知名度，深得新老客戶厚愛，本著“優(yōu)質(zhì)、服務(wù)、信譽(yù)”的精神，堅(jiān)持以優(yōu)良的技術(shù)、優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品、良好的信譽(yù)為國內(nèi)外廣大用戶提供優(yōu)質(zhì)生物產(chǎn)品和服務(wù)。
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