產(chǎn)品名稱：人乳腺癌細胞（三陰性）SUM159PT
更多細胞及培養(yǎng)信息可參考我司官網(wǎng)：www.yajimall.com
傳代方法 | 次建議1:2傳代 | 凍存條件 | 無血清凍存液（貨號：C7001） |
細胞描述 | 本庫的細胞僅用于科研工作，未經(jīng)許可不得用于其他目的，使用者不得將本庫細胞轉(zhuǎn)讓給第三者。 |
培養(yǎng)備注 | 用無菌離心管收集瓶子培養(yǎng)基，留作過渡培養(yǎng) |
人乳腺癌細胞（三陰性）SUM159PT收到后處理
細胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是細胞運輸?shù)霓k法。收到細胞回到自己的實驗室后，先打開外包裝，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內(nèi)，嚴格無菌操作，培養(yǎng)箱靜置2-4小時。鏡下觀察：未超過80%匯合度時，可將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中，加入6ml完全培養(yǎng)基，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)；超過80%匯合度時，根據(jù)情況傳代或者凍存，具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。（注意發(fā)貨的是密封培養(yǎng)瓶的話，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)記得培養(yǎng)瓶蓋子擰松，傳代后建議一瓶用原瓶里面的完全培養(yǎng)基，另外一瓶用自己配的完全培養(yǎng)基）
人乳腺癌細胞（三陰性）SUM159PT培養(yǎng)步驟
一、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加4-6mL完全培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?/span>6cm皿中），培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
二、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
a）、對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的完全培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細胞，完全脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液，將細胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b）、對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
PS：若客戶收到2ml小管細胞，收到細胞后，用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超凈臺或安全柜內(nèi)，嚴格無菌操作；將小管細胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿，加入5ml左右完全培養(yǎng)基混勻，放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細胞密度：若密度未超過80%，換液繼續(xù)培養(yǎng)，視情況傳代或者凍存。若密度超過80%，可直接進行傳代（方法同上）。
三、細胞凍存：（注：無血清凍存液凍存細胞的方法請參考我司官網(wǎng)貨號：C7001）
1、細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細胞一次；
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后加入完全培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打細胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；
3、用適量的凍存液重懸細胞，并放置于凍存管中；
4、先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃
人乳腺癌細胞（三陰性）SUM159PT部分相關細胞如下：
YS1431KMH2人甲狀腺癌細胞KMH2
YS1432 C643 人甲狀腺癌細胞C643
YS1433 SUM159PT 人乳腺癌細胞（三陰性）SUM159PT
YS1434 OVCA429 人卵巢癌細胞OVCA429
YS1435 921 人葡萄膜黑色素瘤92.1
YS1436 WM2664 人黑素瘤細胞WM2664
YS1437 SW756 人子宮鱗狀癌細胞SW756
YS1438 WSUHN30 人口腔鱗狀癌細胞WSUHN30
YS1439 Kyse510 人食管癌細胞Kyse510
YS1440 Colo16 人皮膚鱗狀細胞癌細胞Colo16
YS1441 HCET 人角膜上皮細胞系HCET
YS1442 MEC1 人慢性B細胞白血病細胞MEC1
YS1443 AMO1 人骨髓漿細胞瘤株AMO1
YS1444 SF126 人腦瘤細胞SF126
YS1445 CCD1095Sk 人乳腺浸潤性導管癌旁皮膚成纖維細胞（有限細胞系）CCD1095Sk
YS1446 MSTO211H 人肺癌細胞/胸膜雙相間皮瘤細胞MSTO211H
YS1447 NCIH526 人小細胞肺癌NCIH526
YS1448 HMY1 人黑色素瘤細胞HMY1
YS1449 HT29MTXE12 人結腸癌細胞HT29甲氨蝶呤誘導分化成熟杯狀細胞HT29MTXE12
YS1450 MO313 人少突膠質(zhì)細胞MO3.13
YS1451 LUVA 人肥大細胞系LUVA
YS1452 AKATA 人EBV轉(zhuǎn)化淋巴細胞系AKATA
YS1453 OE33 人食管腺癌OE33
YS1454 ARD 人多發(fā)性骨髓瘤細胞ARD
YS1455 COLO201 人結直腸腺癌細胞COLO201
YS1456 SACC83 人涎腺腺樣囊性癌細胞SACC83
YS1457 SACCLM 人涎腺腺樣囊性癌細胞高轉(zhuǎn)移SACCLM
YS1458 Panc0813 人胰腺癌細胞Panc0813
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