產(chǎn)品名稱：人食道癌細胞kyse30
傳代方法 | 次建議1:2傳代 | 凍存條件 | 無血清凍存液（貨號：C7001） |
細胞描述 | 本庫的細胞僅用于科研工作，未經(jīng)許可不得用于其他目的，使用者不得將本庫細胞轉讓給第三者。 |
培養(yǎng)備注 | 用無菌離心管收集瓶子培養(yǎng)基，留作過渡培養(yǎng) |
人食道癌細胞kyse30收到后處理
細胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是細胞運輸?shù)霓k法。收到細胞回到自己的實驗室后，先打開外包裝，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內(nèi)，嚴格無菌操作，培養(yǎng)箱靜置2-4小時。鏡下觀察：未超過80%匯合度時，可將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中，加入6ml完全培養(yǎng)基，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)；超過80%匯合度時，根據(jù)情況傳代或者凍存，具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。（注意發(fā)貨的是密封培養(yǎng)瓶的話，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)記得培養(yǎng)瓶蓋子擰松，傳代后建議一瓶用原瓶里面的完全培養(yǎng)基，另外一瓶用自己配的完全培養(yǎng)基）
人食道癌細胞kyse30操作步驟
一、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加4-6mL完全培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
二、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
a）、對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的完全培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細胞，完全脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液，將細胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b）、對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
PS：若客戶收到2ml小管細胞，收到細胞后，用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超凈臺或安全柜內(nèi)，嚴格無菌操作；將小管細胞轉移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿，加入5ml左右完全培養(yǎng)基混勻，放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細胞密度：若密度未超過80%，換液繼續(xù)培養(yǎng)，視情況傳代或者凍存。若密度超過80%，可直接進行傳代（方法同上）。
三、細胞凍存：（注：無血清凍存液凍存細胞的方法請參考我司官網(wǎng)貨號：C7001）
1、細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細胞一次；
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后加入完全培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打細胞使之脫落，然后將懸液轉移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；
3、用適量的凍存液重懸細胞，并放置于凍存管中；
4、先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃
人食道癌細胞kyse30部分相關細胞如下：
YS1171 kasumi1 人紅白血病細胞kasumi1
YS1172 KB 人口腔表皮癌細胞KB
YS1173 KG1A 人急性髓性白血病細胞KG1A
YS1174 KGN 人卵巢顆粒細胞瘤細胞KGN
YS1175 KLE 人子宮內(nèi)膜癌細胞KLE
YS1176 KNS89 人腦膠質細胞瘤細胞KNS89
YS1177 KU812 人外周血嗜堿性白血病細胞KU812
YS1178 kyse150 人食管鱗狀細胞癌kyse150
YS1179 kyse30 人食道癌細胞kyse30
YS1180 kyse410 人食道鱗狀細胞癌kyse410
YS1181 LCC 人喉癌細胞LCC
YS1182 Li7 人肝癌細胞Li7
YS1183 LLN 人喉癌淋巴結轉移細胞LLNLLN
YS1184 LN229 人膠質瘤細胞LN229
YS1185 LNCaPcloneFGC 人前列腺癌細胞LNCaPcloneFGC
YS1186 LOVO 人結直腸癌細胞LOVO
YS1187 LOVO5/Fu 人結直腸癌細胞氟尿嘧啶耐藥株LOVO5/Fu
YS1188 LOVO/LUC 人結直腸癌細胞LOVO/LUC
YS1189 LS174T 人結直腸腺癌細胞LS174T
YS1190 Ls180 人結直腸癌細胞Ls180
YS1191 Ls513 人結直腸癌細胞Ls513
YS1192 LX2 人肝星狀細胞系LX2
YS1193 LX2/GFP 人肝星形細胞LX2/GFP
YS1194 Mahlavu 人肝癌細胞Mahlavu
YS1195 MCF10A 人乳腺上皮細胞MCF10A
YS1196 MCF7 人乳腺癌細胞（非三陰）Her2陰性，ER陽性。MCF7
YS1197 MCF7/LUC 人乳腺癌細胞+LUC（非三陰）Her2陰性，ER陽性。MCF7/LUC
YS1198 MDAKB2 人乳腺癌細胞（三陰性）MDAKB2
YS1199 MDAMB157 人乳腺癌細胞（三陰性）MDAMB157
YS1200 MDAMB231 人乳腺癌細胞（三陰性）MDAMB231
YS1201 MDAMB231/GFP 人乳腺癌細胞+GFP（三陰性）MDAMB231/GFP
YS1202 MDAMB231/LUC 人乳腺癌細胞+LUC（三陰性）MDAMB231/LUC
YS1203 MDAMB361 人乳腺癌細胞（非三陰）MDAMB361
YS1204 MDAMB415 人乳腺癌細胞（非三陰）MDAMB415
YS1205 MDAMB435S 人黑素瘤細胞MDAMB435S
YS1206 MDAMB436 人乳腺癌細胞（三陰性）MDAMB436
YS1207 MDAMB453 人乳腺癌細胞（三陰性）MDAMB453
YS1208 MDAMB468 人乳腺癌細胞（三陰性）MDAMB468
YS1209 ME180 人子宮頸表皮癌細胞ME180
YS1210 MEG01 人巨核細胞白血病細胞MEG01
YS1211 MET5A 人膜間皮細胞MET5A
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