產品名稱：人宮頸癌細胞CaSKi
傳代方法 | 次建議1:2傳代 | 凍存條件 | 無血清凍存液（貨號：C7001） |
細胞描述 | 本庫的細胞僅用于科研工作，未經許可不得用于其他目的，使用者不得將本庫細胞轉讓給第三者。 |
培養(yǎng)備注 | 用無菌離心管收集瓶子培養(yǎng)基，留作過渡培養(yǎng) |
人宮頸癌細胞CaSKi處理
細胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是細胞運輸?shù)霓k法。收到細胞回到自己的實驗室后，先打開外包裝，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內，嚴格無菌操作，培養(yǎng)箱靜置2-4小時。鏡下觀察：未超過80%匯合度時，可將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中，加入6ml完全培養(yǎng)基，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)；超過80%匯合度時，根據情況傳代或者凍存，具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。（注意發(fā)貨的是密封培養(yǎng)瓶的話，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)記得培養(yǎng)瓶蓋子擰松，傳代后建議一瓶用原瓶里面的完全培養(yǎng)基，另外一瓶用自己配的完全培養(yǎng)基）
人宮頸癌細胞CaSKi培養(yǎng)步驟
一、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加4-6mL完全培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
二、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
a）、對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的完全培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細胞，完全脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液，將細胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b）、對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
PS：若客戶收到2ml小管細胞，收到細胞后，用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超凈臺或安全柜內，嚴格無菌操作；將小管細胞轉移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿，加入5ml左右完全培養(yǎng)基混勻，放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細胞密度：若密度未超過80%，換液繼續(xù)培養(yǎng)，視情況傳代或者凍存。若密度超過80%，可直接進行傳代（方法同上）。
三、細胞凍存：（注：無血清凍存液凍存細胞的方法請參考我司官網貨號：C7001）
1、細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細胞一次；
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后加入完全培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打細胞使之脫落，然后將懸液轉移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；
3、用適量的凍存液重懸細胞，并放置于凍存管中；
4、先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃
人宮頸癌細胞CaSKi部分相關細胞如下：
YS1041 CAKI2 人腎透明細胞癌CAKI2
YS1042 CAL27 人舌鱗癌細胞CAL27
YS1043 Calu1 人肺癌細胞/鱗癌Calu1
YS1044 Calu3 人肺腺癌細胞Calu3
YS1045 calu6 人間變性肺腺癌細胞calu6
YS1046 CAOV3 人卵巢腺癌細胞CAOV3
YS1047 Capan1 人胰腺癌細胞Capan1
YS1048 Capan2 人胰腺癌細胞Capan2
YS1049 CaSKi 人宮頸癌細胞CaSKi
YS1050 CCD841CON 人正常結腸上皮細胞CCD841CON
YS1051 CCRFCEM 人急性淋巴細胞白血病細胞CCRFCEM
YS1052 CEMC1 人急性淋巴細胞白血病細胞CEMC1
YS1053 changliver 人宮頸癌細胞changliver
YS1054 CoC1 人卵巢癌細胞CoC1
YS1055 COLO205 人結腸癌細胞COLO205
YS1056 COLO320 人結直腸腺癌細胞COLO320
YS1057 COLO320DM 人結直腸腺癌細胞COLO320DM
YS1058 COLO320HSR 人結直腸腺癌細胞COLO320HSR
YS1059 CW2 人結腸癌細胞CW2
YS1060 CX1 人結腸癌細胞CX1
YS1061 D283Med 人腦髓母細胞瘤細胞D283Med
YS1062 D341Med 人腦髓母細胞瘤細胞D341Med
YS1063 DAMI 人巨核細胞白血病細胞DAMI
YS1064 DAOY 人腦髓母細胞瘤細胞DAOY
YS1065 DAUDI 人Burkitt's淋巴瘤細胞DAUDI
YS1066 DB 人彌漫性大B細胞淋巴瘤細胞DB
YS1067 Detroit562 人口腔咽頭癌胸水轉移細胞Detroit562
YS1068 DLD1 人結直腸腺癌細胞DLD1
YS1069 DMS53 人小細胞肺癌細胞DMS53
YS1070 DU145 人前列腺癌細胞DU145
YS1071 EAhy926 人臍靜脈細胞融合細胞EA.hy926
YS1072 Eca109 人食管癌細胞Eca109
YS1073 Ect1E6E7BSL1 人宮頸上皮/陰道上皮Ect1E6E7BSL1
YS1074 ECV304 人膀胱癌細胞人臍靜脈內皮ECV304
YS1075 ECV304/RFP 人膀胱癌細胞+RFP人臍靜脈內皮ECV304/RFP
YS1076 EJ1T24 人膀胱癌細胞EJ1T24
YS1077 ES2 人卵巢透明細胞癌細胞ES2
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上海雅吉生物科技有限公司成立于2011年3月，是一家面向生命科學領域，提供科研類試劑、耗材、儀器、技術服務的生物企業(yè)。包括分子生物學、免疫學、微生物學、細胞學等 。旗下?lián)碛?“雅吉生物”、“晶風生物”、“彩佑實業(yè)”、“GTX” 品牌。通過公司各部門員工的共同努力在行業(yè)內擁有較高知名度，深得新老客戶厚愛，本著“優(yōu)質、服務、信譽”的精神，堅持以優(yōu)良的技術、優(yōu)質的產品、良好的信譽為國內外廣大用戶提供優(yōu)質生物產品和服務。
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