產(chǎn)品名稱                                                  

堿性磷酸酶快速標記試劑盒

產(chǎn)品貨號                                                  

ZXLA-800B

包裝規(guī)格                                                                                          

1次標記/盒（0.5mg蛋白/次標記）

預(yù)期用途                                                 

用于含伯氨（NH2-）的抗體、蛋白、細胞、核酸、激素、抗生素、生物堿等分子的堿性磷酸酶快速標記。適用于化學(xué)發(fā)光、Elisa、免疫印跡（WB）、免疫組化、細胞學(xué)、單分子等免疫檢測系統(tǒng)。

標記原理                                                 

本試劑盒采用高活性的堿性磷酸酶活化物質(zhì)，結(jié)合簡約高效的濾過裝置，實現(xiàn)對各類物質(zhì)進行堿性磷酸酶的快速標記。待標記分子上的伯氨基（NH2-）經(jīng)特異性修飾，過量游離的修飾成分通過試劑盒配套的濾過裝置去除。后與試劑盒中已處于高活化態(tài)的堿性磷酸酶有效成分形成穩(wěn)定的偶聯(lián)物。偶聯(lián)物收集后可直接使用或根據(jù)需要進行凝膠過濾提純后使用。

主要組成成分                                             

(1) R1試劑：處理劑      1支

(2) R2試劑：堿性磷酸酶  1支

(3) B1試劑：置換液      1支

(4) B2試劑：清洗液      1瓶

(5) M1設(shè)備：濾過濃縮管    1支

下列試劑或儀器標記操作時需要，但不包含在本試劑盒中：

(1) 移液器：10μL、200μL、1mL

(2) 37±1℃水浴鍋或培養(yǎng)箱

(3) 震蕩儀

(4) 離心機

儲存條件及有效期                                         

(1) 儲存有效期：2～8℃條件下，有效期為12個月；

(2) 試劑盒開封后，未溶解使用的R2試劑≤-20℃保存；

(3) 生產(chǎn)日期和使用期限：詳見產(chǎn)品外包裝標簽。

標記方法和步驟                                          

(1) 實驗前準備

1) 請仔細閱讀本說明書，本試劑盒可進行1次標記實驗，每次標記實驗的最佳標記量為0.5mg，可接受標記量為0.4-0.6mg。

2) 將處于冷凍或冷藏狀態(tài)的待標記物提前恢復(fù)室溫。

3) 將R1試劑進行瞬時離心以確保固體物處于管底。

4) 請打開水浴鍋或培養(yǎng)箱，并設(shè)置工作溫度為37±1℃。

(2) 標準操作方法

1) 取1支濾過濃縮管垂直放在離心管架上，使用移液器分別加入200 μL置換液（B1試劑）和0.1mg待標記蛋白，輕輕吹打混勻，TIP頭不要觸碰到液體底部的濾膜；

注意：①如果0.5mg的待標記蛋白體積＞300μL時，先使用上述濾過濃縮管濃縮至＜300μL后，再加200 μL處理液；

2) 8000 g離心5min，棄廢液（濾膜上若仍有殘留液體可適當延長離心時間以除盡）；使用移液器加入200 μL置換液，輕輕吹打混勻，垂直放在離心管架上備用；

3) 取1支處理劑（R1試劑）垂直放在離心管架上，加入1mL 清洗液（B2試劑），震蕩混勻后立即取15μL加入步驟2）中備用的濾過濃縮管內(nèi)，輕輕吹打混勻；

4) 用封口膜將濾過濃縮管密封并置37℃±1℃孵育40min；

5) 8000 g離心5min，棄廢液，濾過濃縮管內(nèi)加入300 μL清洗液（B2試劑），輕輕吹打混勻、離心；重復(fù)該步驟3次；

6) 濾過濃縮管內(nèi)加入200 μL清洗液，備用。

7) R2試劑（堿性磷酸酶）凍干粉使用200 μL純水充分復(fù)溶，后全部轉(zhuǎn)移至步驟6）備用的濾過濃縮管內(nèi)充分吹打混勻。

8) 用封口膜將濾過濃縮管密封并置37℃±1℃孵育40min；

9) 使用移液器連續(xù)輕輕吹打20次以充分回收標記物。將濾過濃縮管內(nèi)溶液全部轉(zhuǎn)移至凍存管內(nèi)。此回收溶液即為標記了堿性磷酸酶的蛋白溶液，可根據(jù)需要進行下一步實驗應(yīng)用或保存。

常見問題解釋                                           

(1) 哪些蛋白或分子可以使用本試劑盒進行生物素標記？

      條件①：待標記蛋白分子量需要＞30 kD；

條件②：待標記蛋白需要含伯氨（NH2-）結(jié)構(gòu)。

滿足以上兩個條件的蛋白均能使用本試劑盒標記。若待標記物不滿足以上條件，請選擇本公司其他規(guī)格的標記試劑盒。

(2) 本試劑盒可標記多少mg蛋白？

      本試劑盒可進行1次標記實驗，每次標記實驗的最佳標記量為0.5mg。即可以做1次標記實驗，一共可標記0.5mg蛋白。如果需要標記的蛋白量更大，請選擇本公司其他規(guī)格的標記試劑盒。

(3) 本試劑盒標記后的蛋白儲存條件？

長期保存≤-20℃；短時間內(nèi)（≤7天）2-8℃保存。

如有需要，請選擇本公司推薦的堿性磷酸酶標記蛋白保存液。

(4) 本試劑盒標記后的蛋白穩(wěn)定性如何？

使用本試劑盒標記的堿性磷酸酶單克隆抗體，經(jīng)免疫檢測平臺驗

證，具有較好的熱穩(wěn)定性和實時穩(wěn)定性；此外，標記產(chǎn)物的穩(wěn)定性

與蛋白本身的穩(wěn)定性也有關(guān)系。如需要提升標記產(chǎn)物的穩(wěn)定性，可

實驗室自行篩選含穩(wěn)定成分的緩沖液，也可選擇本公司推薦的堿性

磷酸酶標記產(chǎn)物穩(wěn)定緩沖液。

(5) 如有其他問題請聯(lián)系本公司技術(shù)支持。

注意事項 

(1) 使用前請仔細閱讀本說明書。如有疑問請先與技術(shù)支持確認，再開始標記實驗！

(2) 請在通風良好的實驗室內(nèi)使用本試劑盒。

(3) 使用本試劑盒進行標記實驗產(chǎn)生的廢液請及時密封、處理。

(4) 本試劑盒僅限于科學(xué)研究領(lǐng)域的專業(yè)人員使用。

(5) 本試劑盒僅供實驗室研究使用，不得用于臨床診斷或臨床治療，不得用于食品或藥品，不得儲存在普通民房住宅內(nèi)。

(6) 使用本試劑盒時，請穿實驗服并佩戴口罩和一次性手套。

基本信息                                                  

無錫子曉生物科技有限公司         

Wuxi ZIJOY Biotechnology Co., Ltd

地址：無錫市惠山區(qū)智慧路1號4號樓             

技術(shù)支持：2076028640@qq.com

網(wǎng)址：www.zijoybio.com

訂貨熱線：17200902831

 *本試劑盒僅供實驗室研究使用！                                            20230428A

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