中文名:Cell Tracker CM-DiI(細胞膜橙紅色熒光探針)
英文名:Cell tracker cm DiI (cell membrane orange red fluorescent probe)
貨號:C598347
包裝:20μg
Cas號:180854-97-1
存儲溫度:避光,-20°C儲存
產(chǎn)品介紹:
?Cell Tracker CM-DiI是DiI的衍生物,在水中的溶解性比DiI好。它可以自由穿過細胞膜進入細胞,轉化為細胞膜不可滲透的反應產(chǎn)物。Cell Tracker CM-DiI染料通過幾代培養(yǎng)保留在活細胞中。Cell Tracker CM-DiI染料至少能穩(wěn)定發(fā)出72 h的熒光,具有理想的跟蹤性能,且擁有性質穩(wěn)定,工作濃度無毒性,良好的細胞保留性等優(yōu)點,在生理pH條件下可具有明亮的熒光。此外,Cell Tracker CM-DiI 染料的激發(fā)和發(fā)射光譜與GFP(綠色熒光蛋白)光譜充分分離,可以多種顏色復用。 Cell Tracker CM-DiI包含一個溫和的巰基反應氯甲基取代基,該取代基通過與含巰基的肽和蛋白質共價結合,從而可以與含醛基的固定劑交聯(lián),固定后染色信號不會丟失。相比于DiI等非共價結合的染料,更適合于固定細胞的染色。 以每次使用100 μL染色工作液,染色工作液濃度5 μM計算,20 μg配置為工作液大概可以用38次,1 mg配置為工作液大概可以用1900次。
注意事項:
1. 使用前請將產(chǎn)品瞬時離心至管底,再進行后續(xù)實驗。 2. 熒光染料均存在淬滅問題,請盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。 3. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
產(chǎn)品參數(shù):
Ex/Em :553/570 nm
應用范圍:
細胞膜熒光染料、細胞追蹤與長期示蹤
使用方法:1. 染色液制備(1) 配置 DMSO 或 DMF 儲存液:儲存液用 DMSO 或 DMF 配置成濃度 1 mM 的儲液。注:未使用的儲存液分裝儲存在-20℃,避免反復凍融。(2)工作液制備:用合適的緩沖液(如:無血清培養(yǎng)基,HBSS 或 PBS)稀釋儲存液,配制濃度為 1~5 μM 的工作液。注:工作液最終濃度建議根據(jù)不同細胞系和實驗體系來優(yōu)化。建議從推薦濃度的 10 倍范圍內開始最優(yōu)濃度的摸索。2. 細胞染色將細胞用工作液在 37℃下孵育 60 min,標記完成后,用 PBS 清洗細胞,并在新鮮培養(yǎng)基中重懸。對于貼壁細胞,貼壁培養(yǎng)時進行標記比消化成懸液后標記,細胞生存力更高。以下為可選步驟:Cell Tracker CM-DiI 染色兼容后續(xù)的固定和透化。(1)固定。用 3.7%多聚甲醛(溶于 PBS),室溫固定 10 min。室溫條件 PBS 清洗 2 次,每次 5 min。(2)透化。用丙酮在-20℃下透化 10 min。室溫條件 PBS 清洗 2 次, 每次5 min。
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