肽N-糖苷酶F—83534-39-8
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中文：肽N-糖苷酶F (快速版)
英文：PNGase F（Fast）
CAS：83534-39-8
分子式：EC 3.5.1.52
純度：≥95%
中文同義詞：N-糖酰胺酶,肽N-糖苷酶,N-糖苷酶 F
英文同義詞：PNGase F from Elizabethkingia miricola,Rapid peptide N- glycosides F
產(chǎn)品描述
PNGase F 是從糖蛋白中去除幾乎所有N-糖鏈的最有效的方法。PNGase F 是一種酰胺酶，切割糖蛋白上的N-連接糖鏈。切割的糖型有：高甘露糖、雜合和復(fù)雜寡糖；切割位點(diǎn)為：最內(nèi)側(cè)的N-乙酰葡糖胺和天冬酰胺之間的糖苷鍵。
技術(shù)指標(biāo)
外觀:無色液體;蛋白純度: ≥95%（SDS-PAGE）;比活性: ≥500,000 U/mL
酶學(xué)性質(zhì)
來源:微生物;分類: EC 3.5.1.52;分子量; 35 kDa(SDS-PAGE); 等電點(diǎn):8.14; 最適pH:7.0-8.0;最適溫度: 65℃; 底物選擇性水解蛋白質(zhì)的 Asn 相連的 N- 糖鏈，使N-聚糖保持完整。糖蛋白水解位點(diǎn)除含 α1-3巖藻糖苷鍵外，能切割所有N-糖鏈。激活劑: DTT; 抑制劑:SDS; 儲存溫度: -25～-15°C; 失活條件:含1μL PNGase F 的 20μL 反應(yīng)混合物在 75°C 孵育1 0min 即可失活。
用途:用于從糖蛋白中去除 N- 糖鏈。
酶活定義: 單位酶活定義為在下述條件下，10μL 的反應(yīng)體系中，37°C 反應(yīng) 1 小時(shí)從 10μg 變性 RNase B 中除去超過 95% 的碳水化合物所需要的酶量。
操作步驟
1．用去離子水溶解 1-20μg 的糖蛋白，加入 1μL 的 10×Glycoprotein DenaturingBuffer，用去離子水定容到 10μL；
2．100°C 孵育 10 min；
3．加入2μL 的 10×GlycoBuffer 2，2μL 的 10% NP -40，輕輕吹打混勻；
4．加入 1-2μL 的 PNGase F，加去離子水到 20μL，輕輕吹打混勻；
5．37°C 孵育 60 min；
6．用于 SDS-PAGE 分析或 HPLC 分析。
關(guān)鍵字： 肽N-糖苷酶F;PNGASE F;83534-39-8;N-糖酰胺酶;
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