【儲(chǔ)存條件及有效期】
保存條件:-25 °C~ -15 °C,有效期為6個(gè)月; 運(yùn)輸條件:試劑盒需在-15℃以下運(yùn)輸;
【檢驗(yàn)方法】 操作步驟
1. 核酸提取 采用核酸提取試劑盒或者自動(dòng)化核酸提取儀提取各類樣本中的待檢 DNA/RNA,若無(wú)需立即使用,需要放置-80℃保存。
2. 試劑準(zhǔn)備 取出試劑盒中引物混合液和酶混合液置于室溫溶解,混勻后瞬時(shí)離心備用。 計(jì)算樣本、陰性和陽(yáng)性對(duì)照的數(shù)量,記為N,按照N+1的數(shù)量配置混合液 (每個(gè)樣本需7μL引物混合液 +11μL酶混合液),充分混勻后瞬時(shí)離心備用。 將混勻好的反應(yīng)混合液按每個(gè)樣本18μL分裝至相應(yīng)的PCR管中,轉(zhuǎn)移至樣 本制備區(qū)。
3. 加樣 向分裝好的PCR反應(yīng)管中分別加入2μL樣本提取核酸、無(wú)酶水陰性對(duì)照和 陽(yáng)性對(duì)照(單個(gè)反應(yīng)總體積共20μL)。加樣完成后,蓋緊PCR管蓋,短暫 離心,確認(rèn)消除氣泡后轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行PCR反應(yīng)。
4. qPCR反應(yīng) 將樣本放入擴(kuò)增儀,設(shè)置樣本名稱、陰性對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照,熒光通路選 擇SYBR。
【注意事項(xiàng)】
1. 酶混合物及引物混合物配制成的qPCR反應(yīng)液對(duì)溫度敏感,容易失 活,使用時(shí)應(yīng)置于冰上,反復(fù)凍融不超過(guò)5次;
2. 本品保存不當(dāng)或者運(yùn)輸不當(dāng)可能會(huì)導(dǎo)致試劑失活,出現(xiàn)假陰性的結(jié) 果;
3. 不同核酸提取方法提取效率不同,可能會(huì)導(dǎo)致假陰性的結(jié)果;
4. 病原體流行株變異可能導(dǎo)致假陰性的結(jié)果;
5. 本試劑盒僅用于科研用途,使用前請(qǐng)仔細(xì)閱讀說(shuō)明書;
6. 實(shí)驗(yàn)室管理應(yīng)嚴(yán)格按照PCR基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室的管理規(guī)范,實(shí)驗(yàn) 人員必須進(jìn)行專業(yè)培訓(xùn),實(shí)驗(yàn)過(guò)程嚴(yán)格分區(qū);使用一次性消耗品, 各區(qū)各階段消耗品不得混用。
關(guān)鍵字: 診斷試劑;寵物疾病;熒光PCR;PCR檢測(cè)試劑;
河南華大創(chuàng)新生命科技有限公司是華大基因科技(華大集團(tuán))子公司,成立于2020年,公司位于河南省新鄉(xiāng)市市轄區(qū)高新區(qū)高新東路999號(hào)。專注于體外診斷試劑、醫(yī)療器械(一、二、三類)研發(fā)、生產(chǎn)、銷售,生命科技的成果轉(zhuǎn)化,生命科學(xué)儀器和試劑的CDMO以及產(chǎn)業(yè)鏈投資。華大創(chuàng)新依托華大集團(tuán)領(lǐng)先的研發(fā)和生產(chǎn)能力,以及豐富的行業(yè)資源,積極打造生物檢測(cè)產(chǎn)業(yè)基地,對(duì)接臨床與基礎(chǔ)科研創(chuàng)新成果,為全球生命科技行業(yè)科研人員、企業(yè)、臨床專家、產(chǎn)品研發(fā)者制定全方位、一站式的產(chǎn)業(yè)解決方案,將最新最前沿的科技成果轉(zhuǎn)化為具有市場(chǎng)價(jià)值的生物檢測(cè)產(chǎn)品。