中文名:6-異硫氰酸熒光素
英文名:6-FITC
英文別名:3326-31-6|3',6'-Dihydroxy-6-isothiocyanatospiro[isobenzofuran-1(3H),9'-[9H]xanthen]-3-one|3',6'-dihydroxy-7-isothiocyanatospiro[2-benzofuran-3,9'-xanthene]-1-one|GV8X3YGM7Q|Fluorescein 4-isothiocyanate|3',6'-Dihydroxy-4-isothiocyanato-3H-spiro[isobenzofur
純度:≥95% (HPLC)
貨號(hào):F272901
包裝:100mg、250mg、50mg
Cas號(hào):3326-31-6
存儲(chǔ)溫度:避光,-20°C儲(chǔ)存,干燥
產(chǎn)品介紹:
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
外觀:黃色粉末
純度:≥95% (HPLC)
產(chǎn)品參數(shù)
Ex(nm):494
Em(nm):520
Solvent:DMSO
產(chǎn)品描述
FITC能和各種抗體蛋白結(jié)合,結(jié)合后的抗體不喪失與一定抗原結(jié)合的特異性,并在堿性溶液中具有強(qiáng)烈的黃綠色熒光。通過(guò)在熒光顯微鏡下觀察或流式細(xì)胞儀分析可對(duì)相應(yīng)抗原進(jìn)行定性、定位或定量的檢測(cè)。用于醫(yī)學(xué),農(nóng)學(xué)和畜牧等方面,可對(duì)由地細(xì)菌病毒和寄生蟲等所致疾病進(jìn)行快速診斷。
FITC標(biāo)記抗體流程
(1)將待交聯(lián)的蛋白(濃度≥1mg/mL)對(duì)交聯(lián)反應(yīng)液透析三次4℃,至pH=9.0。交聯(lián)反應(yīng)液配制方法:7.56g NaHCO3,1.06g Na2CO3,7.36g NaCl,加水定容至1 L。
(2)將FITC溶于DMSO中,濃度為1mg/mL。每次交聯(lián)使用的FITC均應(yīng)新鮮配制,避光。
(3)按P:F(蛋白質(zhì):FITC)=1mg:150μg?的比例將FITC緩慢加入于抗體溶液中,邊加邊輕輕晃動(dòng)使其與抗體混合均勻,暗處4℃反應(yīng)8h。
(4)加入5mol/L的NH4Cl至終濃度50mmol/L,4℃終止反應(yīng)2h。
(5)將交聯(lián)物在PBS中透析四次以上,至透析液清亮。
(6)交聯(lián)物的鑒定
蛋白濃度(mg/mL) = [ A280– 0.31×A495?] / 1.4
F/P比例: 3.1×A495?/ [A280?– 0.31×A495?],該值應(yīng)介于2.5~6.5之間。
(7)FITC交聯(lián)的蛋白應(yīng)置于pH 7.4的磷酸鹽緩沖液中,加入0.1% NaN3、1% BSA,4℃避光保存。
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關(guān)鍵字: 3326-31-6;3',6'-Dihydroxy-6-isothiocyanatospiro[isobenzofuran-1(3H),9'-[9H]xanthen]-3-one;3',6'-dihydroxy-7-isothiocyanatospiro[2-benzofuran-3,9'-xanthene]-1-one;GV8X3YGM7Q
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