1.說明
本檢測采用酶聯(lián)免疫法定量檢測神經(jīng)性貝毒的存在。神經(jīng)性貝毒是一種毒素,與貝殼類動物的神經(jīng)中毒有關(guān)。本檢測可用于水產(chǎn)樣本對貝類毒素的定性和定量檢測,例如甲殼類動物的樣本。對于甲殼類動物的需要提前制備樣本。如果條件允許,陽性樣本可以做HPLC,GC/MS或其他方法確認(rèn)。
2.安全性說明
標(biāo)準(zhǔn)品溶液含有少量的神經(jīng)性貝毒。底物溶液含有四甲基聯(lián)苯胺,終止液還有稀硫酸。避免皮膚與粘膜與終止液接觸。若終止液與皮膚接觸,可用水洗去。
3.貯藏與穩(wěn)定性
試劑盒貯存在4-8°C。使用前試劑盒中溶液要恢復(fù)到室溫20—25度。在保質(zhì)期內(nèi)試劑盒都可以正常使用。
4.檢測原理
本實驗采用直接競爭ELISA方法,用特異性抗體識別神經(jīng)性貝毒。樣本中的神經(jīng)性貝毒可與貝毒-酶-結(jié)合物競爭,同包被在微孔板上的羊抗-神經(jīng)性貝毒抗體結(jié)合。洗板加入底物溶液,顯藍(lán)色。藍(lán)色的深度與神經(jīng)性貝毒在樣本中的濃度成反比。顏色反應(yīng)在規(guī)定時間內(nèi)終止,顏色用酶標(biāo)儀讀值。每孔的樣本濃度值可以通過標(biāo)準(zhǔn)曲線來讀取。
5.試劑盒局限性和可能的干擾
樣本中經(jīng)常存在的大量的無機(jī)物和有機(jī)物經(jīng)檢測,并未為發(fā)現(xiàn)影響試劑盒的檢測結(jié)果。然而,由于樣本中發(fā)現(xiàn)有易變質(zhì)的混合物,由它們引起的基質(zhì)反應(yīng)不可避免地會影響檢測結(jié)果。操作失誤也可能造成實驗錯誤。如:貯存的問題。加樣次序錯誤,加入溶液的體積錯誤,孵育的時間過長或者過短,影響免疫反應(yīng)或者底物反應(yīng),實驗過程中溫度過低或者過高(低于10℃,大于30℃)。本試劑盒提供篩查神經(jīng)性貝毒的篩查結(jié)果。陽性樣本可采取其他的分析方法(GC,HPLC,其他方法)證明。
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