1.概述
腹瀉性貝類毒素檢測試劑盒的原理是酶聯(lián)免疫吸附測定法,用于水及水產(chǎn)品中腹瀉性貝類毒素的定量測定。岡田酸是腹瀉性貝類毒素的一種。對于水產(chǎn)品需要做前處理,不可以直接檢測。如果需要的話陽性樣品可以通過HPLC和GC/MS來驗證。
2.安全性說明書
試劑盒中的標(biāo)準(zhǔn)溶液里含有少量的岡田酸。底物中包含有四甲基聯(lián)苯胺,終止液中含有稀硫酸。要避免皮膚和粘膜與終止液接觸,如果不小心接觸了請馬上用水沖洗。
3.保存和穩(wěn)定性
試劑盒應(yīng)保存在2-8℃,不要冷凍。在使用之前要把試劑盒中的溶液回復(fù)到室溫(20-25℃)。有效期內(nèi)試劑盒中的試劑都可以使用。
4.原理
試劑盒的原理是直接競爭ELISA法,通過特異性抗體來識別岡田酸。當(dāng)樣品中含有岡田酸時,樣品中的岡田酸與岡田酸酶結(jié)合物競爭結(jié)合溶液中的岡田酸抗體。岡田酸抗體與包被在微孔板上的羊抗鼠二抗結(jié)合。經(jīng)過一步洗滌加入底物溶液,產(chǎn)生有色反應(yīng)。產(chǎn)生的綠色的顏色深度與樣品中岡田酸的含量成反比。加入反應(yīng)停止液后使顏色由藍色轉(zhuǎn)變?yōu)辄S色。用酶標(biāo)儀在450nm處測定吸光度值。通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線來計算樣品中岡田酸的含量。
5. 岡田酸試劑盒的局限性和可能的干擾
對在水樣中經(jīng)常出現(xiàn)的多種有機物和無機物已近作過檢測對此試劑盒并無干擾。由于化合物的易變質(zhì)性由基質(zhì)反應(yīng)引起的干擾是不可能完全避免的。操作不當(dāng)也可能導(dǎo)致檢測結(jié)果錯誤,比如:試劑盒保存條件不對、錯誤的加液順序、試劑的量沒有加準(zhǔn)確、孵育的時間太長或太短、孵育的溫度太高或太低。與其它檢測方法一樣對陽性結(jié)果要求通過其它傳統(tǒng)的方法來驗證。
6.岡田酸測定的重要性
岡田酸是腹瀉性貝類毒素的一種,受岡田酸污染的貝類和有害藻類大量繁殖的有關(guān)。DSP可以引起劑量依賴型的腹瀉、惡心、嘔吐癥狀。FDA對ASP的限量是0.2ppm。歐洲是160ug。這個試劑盒可以檢測40個樣品(做兩個重復(fù))。需要少量的樣品,檢測時間少于2小時。
7.試劑盒特性
敏感性:0.1ng/ml
重復(fù)性:標(biāo)準(zhǔn)的變異系數(shù)小于10%,樣品的變異系數(shù)小于15%
特異性:
腹瀉性貝類毒素檢測試劑盒能檢測Okadaic acid及其它DSP,它們的結(jié)合程度是不同,以下表格中展示的是相關(guān)值及交叉反映率(%CR),以下所有濃度均為ppb級。
種 類 | % CR | 種 類 | % CR |
Okadaic Acid (DTX) | 100% | Dinophysistoxins DTX-2 | 50% |
Dinophysistoxins DTX-1 | 50% |
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關(guān)鍵字: 腹瀉elisa 檢測;腹瀉試劑盒;海藻類毒素試劑盒;DSP 檢測elisa ;DSP試劑盒;
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