用途
該試劑盒用于體外定量檢測(cè)小鼠血清、血漿或其他相關(guān)生物液體中天然β-EP濃度。
檢測(cè)原理
本試劑盒采用競(jìng)爭(zhēng)ELISA法。用小鼠β-EP抗原包被于酶標(biāo)板上，實(shí)驗(yàn)時(shí)樣品或標(biāo)準(zhǔn)品中的小鼠β-EP與包被的小鼠β-EP競(jìng)爭(zhēng)生物素標(biāo)記的抗小鼠β-EP單抗上的結(jié)合位點(diǎn)，游離的成分被洗去。加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的親和素，生物素與親和素特異性結(jié)合而形成免疫復(fù)合物，游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB)，TMB在辣根過(guò)氧化物酶的催化下呈現(xiàn)藍(lán)色，加終止液后變成黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)處測(cè)OD值，小鼠β-EP濃度與OD450值之間呈反比，通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣品中小鼠β-EP的濃度。
| 反應(yīng)類型 | 競(jìng)爭(zhēng)法 |
| 規(guī)格 | 96T |
| 反應(yīng)時(shí)間 | 2.0h |
| 反應(yīng)性 | 小鼠 |
| 檢測(cè)方法 | Colormetric |
| 檢測(cè)范圍 | 15.63-1000 pg/mL |
| 靈敏度 | 9.38 pg/mL |
| 樣本體積 | 50μL |
| 樣本類型 | 血清、血漿或其他相關(guān)生物液體 |
特異性
可檢測(cè)樣本中的小鼠β-EP，且與其它相關(guān)蛋白無(wú)明顯交叉反應(yīng)。
重復(fù)性
板內(nèi)，板間變異系數(shù)均<10%。
典型數(shù)據(jù)
由于實(shí)驗(yàn)操作條件的不同（如操作者、移液技術(shù)、洗板技術(shù)和穩(wěn)定條件等），標(biāo)準(zhǔn)曲線的OD值會(huì)有所差異。以下數(shù)據(jù)和曲線僅供參考，實(shí)驗(yàn)者需根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。
| (pg/mL) | O.D | Average |
|---|
| 1000 | 0.386
0.44 | 0.413 |
| 500 | 0.533
0.543 | 0.538 |
| 250 | 0.765
0.729 | 0.747 |
| 125 | 1.042
1.052 | 1.047 |
| 62.5 | 1.417
1.387 | 1.402 |
| 31.25 | 1.74
1.726 | 1.733 |
| 15.63 | 1.979
1.987 | 1.983 |
| 0 | 2.327
2.333 | 2.33 |
精密度
板內(nèi)精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在1塊板子上檢測(cè)20次。
板間精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在3塊板子上檢測(cè)20次。
| | Intra-assay Precision | Inter-assay Precision |
|---|
| Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean
(pg/mL) | 49.40 | 99.80 | 404.50 | 51.10 | 94.90 | 411.30 |
Standard
deviation | 2.90 | 5.50 | 14.20 | 3.20 | 5.40 | 14.80 |
| C V (%) | 5.87 | 5.51 | 3.51 | 6.26 | 5.69 | 3.60 |
回收率
分別往5個(gè)不同樣本中添加已知濃度的目標(biāo)蛋白，做回收實(shí)驗(yàn)，得出回收率范圍和平均回收率。
| Sample Type | Range (%) | Average Recovery (%) |
|---|
| Serum (n=8) | 89-105 | 96 |
| EDTA plasma (n=8) | 85-101 | 92 |
| Cell culture media (n=8) | 95-107 | 101 |
線性
分別往5個(gè)樣本中添加已知濃度的目標(biāo)蛋白，做回收實(shí)驗(yàn)，得出回收率范圍及平均回收率。將5個(gè)樣本分別稀釋2倍，4倍，8倍，16倍做回收實(shí)驗(yàn)，得出回收率范圍及平均回收率。
| | | Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) |
|---|
| 1:2 | Range (%) | 91-105 | 93-103 | 86-97 |
| Average (%) | 98 | 98 | 91 |
| 1:4 | Range (%) | 83-97 | 86-102 | 100-114 |
| Average (%) | 90 | 93 | 106 |
| 1:8 | Range (%) | 86-100 | 86-101 | 94-106 |
| Average (%) | 93 | 93 | 99 |
| 1:16 | Range (%) | 85-96 | 93-103 | 96-108 |
| Average (%) | 90 | 98 | 102 |
注意事項(xiàng)：
1、試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存
2、濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果
3、各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣
4、請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔孔的OD值)，請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定計(jì)算時(shí)請(qǐng)最后乘以總稀釋倍數(shù)(xnx5)
5、封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染
6、底物請(qǐng)避光保存。
7、嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)
8、所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理
9、.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
艾普蒂生物 品牌保障：
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4、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型!
關(guān)鍵字： 小鼠β-內(nèi)啡肽(β-EP)Elisa;Mouse β-EP;
湖北艾普蒂生物工程有限公司（簡(jiǎn)稱：艾普蒂）由在國(guó)內(nèi)科研試劑領(lǐng)域有著十幾年從業(yè)經(jīng)驗(yàn)的專業(yè)技術(shù)團(tuán)隊(duì)和企業(yè)管理團(tuán)隊(duì)組建而成，專門(mén)從事以抗體、蛋白、細(xì)胞、化學(xué)品為核心的試劑產(chǎn)品研發(fā)與銷售。
我們長(zhǎng)期聚焦于生命科學(xué)、生物醫(yī)藥、醫(yī)療診斷、分析檢測(cè)等領(lǐng)域，專注于為生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域的客戶提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)。提供生命科學(xué) 試劑、供應(yīng)鏈服務(wù)等，為更多的生命科學(xué)科研工作者提供 專業(yè)、全面、安全、快捷的產(chǎn)品和服務(wù)。產(chǎn)品覆蓋 基因、蛋白、細(xì)胞、組織、動(dòng)物等水平的各種研究。
致力于成長(zhǎng)為我國(guó)重要的生命科學(xué)試劑和成果轉(zhuǎn)化一體化的領(lǐng)導(dǎo)者、致力于成為中國(guó)大型的科研試劑產(chǎn)品供應(yīng)商之一。