用途
該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清，血漿或其他生物體液中天然及部分重組PAP濃度
檢測原理
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法。用抗人PAP抗體包被于酶標(biāo)板上，實驗時樣品或標(biāo)準品中的人PAP會與包被抗體結(jié)合，游離的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人PAP抗體和辣根過氧化物酶標(biāo)記的親和素。抗人PAP抗體與結(jié)合在包被抗體上的人PAP結(jié)合、生物素與親和素特異性結(jié)合而形成免疫復(fù)合物，游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB)，TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現(xiàn)藍色，加終止液后變成黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長處測OD值，PAP濃度與OD450值之間呈正比，通過繪制標(biāo)準曲線計算出樣品中PAP的濃度。
| 反應(yīng)類型 | 夾心法 |
| 規(guī)格 | 96T |
| 反應(yīng)時間 | 3.5h |
| 反應(yīng)性 | Human |
| 檢測方法 | Colormetric |
| 檢測范圍 | 3.13—200 ng/mL |
| 靈敏度 | 1.88 ng/mL |
| 樣本體積 | 100μL |
| 樣本類型 | 血清，血漿或其他生物體液 |
特異性
可檢測樣本中的人PAP，且與其它相關(guān)蛋白無明顯交叉反應(yīng)。
重復(fù)性
板內(nèi)，板間變異系數(shù)均<10%。
典型數(shù)據(jù)
由于實驗操作條件的不同（如操作者、移液技術(shù)、洗板技術(shù)和穩(wěn)定條件等），標(biāo)準曲線的OD值會有所差異。以下數(shù)據(jù)和曲線僅供參考，實驗者需根據(jù)自己的實驗建立標(biāo)準曲線。
| (ng/mL) | O.D | Average | Corrected |
|---|
| 200 | 2.323
2.361 | 2.342 | 2.282 |
| 100 | 1.401
1.435 | 1.418 | 1.358 |
| 50 | 0.805
0.779 | 0.792 | 0.732 |
| 25 | 0.426
0.452 | 0.439 | 0.379 |
| 12.5 | 0.214
0.2 | 0.207 | 0.147 |
| 6.25 | 0.156
0.14 | 0.148 | 0.086 |
| 3.13 | 0.099
0.113 | 0.106 | 0.046 |
| 0 | 0.057
0.063 | 0.06 | -- |
精密度
板內(nèi)精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在1塊板子上檢測20次。
板間精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在3塊板子上檢測20次。
| Intra-assay Precision | Inter-assay Precision |
|---|
| Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean
(ng/mL) | 10.56 | 24.76 | 79.81 | 11.29 | 27.08 | 85.82 |
Standard
deviation | 0.74 | 1.39 | 3.02 | 0.57 | 1.56 | 2.75 |
| C V (%) | 7.01 | 5.61 | 3.78 | 5.05 | 5.76 | 3.20 |
回收率
分別往5個不同樣本中添加已知濃度的目標(biāo)蛋白，做回收實驗，得出回收率范圍和平均回收率。
| Sample Type | Range (%) | Average Recovery (%) |
|---|
| Serum (n=8) | 92-103 | 98 |
| EDTA plasma (n=8) | 89-100 | 95 |
| Cell culture media (n=8) | 89-104 | 95 |
線性
分別往5個樣本中添加已知濃度的目標(biāo)蛋白，做回收實驗，得出回收率范圍及平均回收率。將5個樣本分別稀釋2倍，4倍，8倍，16倍做回收實驗，得出回收率范圍及平均回收率。
|
| Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) |
|---|
| 1:2 | Range (%) | 90-101 | 97-110 | 89-103 |
| Average (%) | 96 | 104 | 94 |
| 1:4 | Range (%) | 92-105 | 81-93 | 87-98 |
| Average (%) | 98 | 87 | 93 |
| 1:8 | Range (%) | 88-102 | 83-95 | 87-99 |
| Average (%) | 93 | 88 | 92 |
| 1:16 | Range (%) | 87-100 | 83-96 | 82-94 |
| Average (%) | 94 | 90 | 87 |
注意事項：
1、試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存
2、濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果
3、各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣
4、請每次測定的同時做標(biāo)準曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準品孔孔的OD值)，請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定計算時請最后乘以總稀釋倍數(shù)(xnx5)
5、封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染
6、底物請避光保存。
7、嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準
8、所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理
9、.本試劑不同批號組分不得混用。
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關(guān)鍵字： 人纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物（PAP）;人纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物;人纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物elisa試劑盒;
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我們長期聚焦于生命科學(xué)、生物醫(yī)藥、醫(yī)療診斷、分析檢測等領(lǐng)域，專注于為生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域的客戶提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)。提供生命科學(xué) 試劑、供應(yīng)鏈服務(wù)等，為更多的生命科學(xué)科研工作者提供 專業(yè)、全面、安全、快捷的產(chǎn)品和服務(wù)。產(chǎn)品覆蓋 基因、蛋白、細胞、組織、動物等水平的各種研究。
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