用途
該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清，血漿或其他生物體液中天然及部分重組GzmB濃度
檢測原理
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法。用抗人GzmB抗體包被于酶標板上，實驗時樣品或標準品中的人GzmB會與包被抗體結(jié)合，游離的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人GzmB抗體和辣根過氧化物酶標記的親和素。抗人GzmB抗體與結(jié)合在包被抗體上的人GzmB結(jié)合、生物素與親和素特異性結(jié)合而形成免疫復(fù)合物，游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB)，TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現(xiàn)藍色，加終止液后變成黃色。用酶標儀在450nm波長處測OD值，GzmB濃度與OD450值之間呈正比，通過繪制標準曲線計算出樣品中GzmB的濃度。
| 反應(yīng)類型 | 夾心法 |
| 規(guī)格 | 96T |
| 反應(yīng)時間 | 3.5h |
| 反應(yīng)性 | Human |
| 檢測方法 | Colormetric |
| 檢測范圍 | 15.63—1000 pg/mL |
| 靈敏度 | 9.38 pg/mL |
| 樣本體積 | 100μL |
| 樣本類型 | 血清，血漿或其他生物體液 |
特異性
可檢測樣本中的人GzmB，且與其它相關(guān)蛋白無明顯交叉反應(yīng)。
重復(fù)性
板內(nèi)，板間變異系數(shù)均<10%。
典型數(shù)據(jù)
由于實驗操作條件的不同（如操作者、移液技術(shù)、洗板技術(shù)和穩(wěn)定條件等），標準曲線的OD值會有所差異。以下數(shù)據(jù)和曲線僅供參考，實驗者需根據(jù)自己的實驗建立標準曲線。
| (pg/mL) | O.D | Average | Corrected |
|---|
| 1000 | 2.488
2.532 | 2.51 | 2.442 |
| 500 | 1.598
1.636 | 1.617 | 1.549 |
| 250 | 0.928
0.912 | 0.92 | 0.852 |
| 125 | 0.473
0.501 | 0.487 | 0.419 |
| 62.5 | 0.259
0.249 | 0.254 | 0.186 |
| 31.25 | 0.17
0.166 | 0.168 | 0.1 |
| 15.63 | 0.113
0.127 | 0.12 | 0.052 |
| 0 | 0.067
0.069 | 0.068 | -- |
精密度
板內(nèi)精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在1塊板子上檢測20次。
板間精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在3塊板子上檢測20次。
| Intra-assay Precision | Inter-assay Precision |
|---|
| Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean
(pg/mL) | 53.88 | 110.65 | 427.99 | 50.22 | 101.94 | 413.82 |
Standard
deviation | 2.79 | 5.95 | 19.94 | 2.64 | 4.69 | 14.19 |
| C V (%) | 5.18 | 5.38 | 4.66 | 5.26 | 4.60 | 3.43 |
回收率
分別往5個不同樣本中添加已知濃度的目標蛋白，做回收實驗，得出回收率范圍和平均回收率。
| Sample Type | Range (%) | Average Recovery (%) |
|---|
| Serum (n=8) | 86-97 | 92 |
| EDTA plasma (n=8) | 93-107 | 101 |
| Cell culture media (n=8) | 93-105 | 100 |
線性
分別往5個樣本中添加已知濃度的目標蛋白，做回收實驗，得出回收率范圍及平均回收率。將5個樣本分別稀釋2倍，4倍，8倍，16倍做回收實驗，得出回收率范圍及平均回收率。
|
| Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) |
|---|
| 1:2 | Range (%) | 86-98 | 98-112 | 84-96 |
| Average (%) | 92 | 104 | 90 |
| 1:4 | Range (%) | 89-100 | 83-97 | 83-93 |
| Average (%) | 95 | 88 | 89 |
| 1:8 | Range (%) | 89-103 | 83-97 | 80-92 |
| Average (%) | 96 | 90 | 87 |
| 1:16 | Range (%) | 89-106 | 80-91 | 87-101 |
| Average (%) | 96 | 86 | 93 |
注意事項：
1、試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存
2、濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果
3、各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣
4、請每次測定的同時做標準曲線，做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔孔的OD值)，請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定計算時請最后乘以總稀釋倍數(shù)(xnx5)
5、封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染
6、底物請避光保存。
7、嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準
8、所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理
9、.本試劑不同批號組分不得混用。
艾普蒂生物 品牌保障：
1、質(zhì)量保證: 產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定，每批次產(chǎn)品必須通過QA、QC檢測才可出庫;
2、技術(shù)支持: 技術(shù)部5x8小時技術(shù)問題及時解答
3、服務(wù)周到: 發(fā)貨及時，三個工作日順豐快遞
4、售后無憂:產(chǎn)品質(zhì)量問題包退包換
艾普蒂ELISA試劑盒的優(yōu)勢:
1、高效、靈敏、特異的抗體;
2、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;
3、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體;
4、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型!
關(guān)鍵字： 人顆粒酶B（Gzms-B）Elisa試劑;人顆粒酶B（Gzms-B）;人顆粒酶B;
湖北艾普蒂生物工程有限公司（簡稱：艾普蒂）由在國內(nèi)科研試劑領(lǐng)域有著十幾年從業(yè)經(jīng)驗的專業(yè)技術(shù)團隊和企業(yè)管理團隊組建而成，專門從事以抗體、蛋白、細胞、化學品為核心的試劑產(chǎn)品研發(fā)與銷售。
我們長期聚焦于生命科學、生物醫(yī)藥、醫(yī)療診斷、分析檢測等領(lǐng)域，專注于為生命科學和生物技術(shù)領(lǐng)域的客戶提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)。提供生命科學 試劑、供應(yīng)鏈服務(wù)等，為更多的生命科學科研工作者提供 專業(yè)、全面、安全、快捷的產(chǎn)品和服務(wù)。產(chǎn)品覆蓋 基因、蛋白、細胞、組織、動物等水平的各種研究。
致力于成長為我國重要的生命科學試劑和成果轉(zhuǎn)化一體化的領(lǐng)導(dǎo)者、致力于成為中國大型的科研試劑產(chǎn)品供應(yīng)商之一。