產(chǎn)品名稱 : 革蘭氏染色液

規(guī)格：4×100mL | 4×250mL | 4×500mL

有效期：12個(gè)月

存儲(chǔ) 常溫運(yùn)輸，陰涼避光保存，有效期12個(gè)月

革蘭氏染色法是細(xì)菌學(xué)中廣泛使用的一種鑒別染色法，通過(guò)結(jié)晶紫初染和碘液媒染后，在細(xì)胞壁內(nèi)形成了不溶于水的結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物，革蘭氏陽(yáng)性菌細(xì)胞壁較厚，肽聚糖網(wǎng)層次較多且交聯(lián)致密，乙醇脫色時(shí)，肽聚糖脫水使孔徑縮小，故保留結(jié)晶紫-碘復(fù)合物在細(xì)胞膜上，呈紫色。革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁薄、外膜層類(lèi)脂含量高、肽聚糖層薄且交聯(lián)度差，脫色后類(lèi)脂外膜迅速溶解，縫隙加大，結(jié)晶紫與碘復(fù)合物溶出，因此乙醇脫色后再經(jīng)番紅復(fù)染，呈紅色。

操作步驟：

1、標(biāo)本處理

（1）.有菌部位的標(biāo)本，如痰液、糞便、各種拭子、創(chuàng)面等可直接涂片。

（2）.無(wú)菌部位的標(biāo)本，如腦脊液、胸水、腹水、膽汁、尿液、關(guān)節(jié)液等，應(yīng)取適量標(biāo)本（最高可達(dá)5-7ml）,經(jīng)3000rpm 離心10min.，取沉渣涂片染色。

2、涂片制作

菌液涂片時(shí)，用接種環(huán)沾取菌液點(diǎn)在載玻片上，標(biāo)本可直接在玻片上涂布；菌落涂片時(shí)，先取生理鹽水一滴，置玻片上，用接種針挑取菌落在鹽水中涂布。制作的涂片應(yīng)自然干燥，并經(jīng)火焰固定，固定的溫度不宜過(guò)高，以玻片背面接觸手背不燙為準(zhǔn)，否則可能使細(xì)菌形態(tài)改變。將固定后的涂片進(jìn)行染色。

3、染色

一般包括初染、媒染、脫色、復(fù)染等四個(gè)步驟，具體操作方法是：

（1）加上結(jié)晶紫后，染色 1 分鐘，水洗。

（2）加上碘液后染色 1 分鐘，水洗。

（3）加上 95%酒精,搖動(dòng)玻片,根據(jù)涂片厚度,脫色約 20-60 秒，水洗，吸去水分。

（4）加上蕃紅后，染色 1 分鐘，水洗。

（5）吸干或在空氣中涼干后，油鏡鏡檢。

注意：革蘭氏染色的關(guān)鍵在于嚴(yán)格掌握酒精脫色程度，如脫色過(guò)度，則陽(yáng)性菌可被誤染為陰性菌；而脫色不夠時(shí)，陰性菌可被誤染為陽(yáng)性菌。此外，菌齡也影響染色結(jié)果，如陽(yáng)性菌培養(yǎng)時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，或已死亡及部分菌體自行溶解，

都常呈陰性反應(yīng)。

4、結(jié)果觀察：革蘭氏陰性菌呈紅色，革蘭氏陽(yáng)性菌呈紫色。以均勻分散開(kāi)的細(xì)菌的革蘭氏染色反應(yīng)為準(zhǔn)，過(guò)于密集的細(xì)菌，常常呈現(xiàn)假陽(yáng)性。