產(chǎn)品名稱 : BCA蛋白濃度測定試劑盒
產(chǎn)品簡介
BCA蛋白濃度檢測是一個實驗，是根據(jù)吸光值可以推算出蛋白濃度.堿性條件下，蛋白將Cu2+還原為Cu+， Cu+與BCA試劑形成紫顏色的絡(luò)合物，測定其在562nm處的吸收值，并與標(biāo)準(zhǔn)曲線對比，即可計算待測蛋白的濃度。
常用濃度的去垢劑SDS，Triton X-100，Tween不影響檢測結(jié)果，但受螯合劑(EDTA，EGTA)、還原劑（DTT，巰基乙醇）和脂類的影響。實驗中，若發(fā)現(xiàn)樣品稀釋液或裂解液本身背景值較高，可試用Bradford蛋白濃度測定試劑盒。
操作說明
一. 微孔酶標(biāo)儀法
1. 配制工作液：根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品數(shù)量，按50體積 BCA試劑A 加1體積 BCA試劑B（50:1）配制成 BCA工作液，充分混勻 (混合時可能會有渾濁，但混勻后就會消失)。BCA 工作液室溫 24 小時內(nèi)穩(wěn)定。
2. 稀釋標(biāo)準(zhǔn)品：取 10μL BSA 標(biāo)準(zhǔn)品用 PBS 稀釋至 100μL（樣品一般可用 PBS 稀釋），使終濃度為 0.5mg/ml。將標(biāo)準(zhǔn)品按 0, 2, 4, 6, 8, 12, 16, 20 μL加到 96 孔板的蛋白標(biāo)準(zhǔn)品孔中，加 PBS 補足至 20μL。
3. 將樣品作適當(dāng)稀釋（多做幾個梯度，如作 2 倍、4 倍、8 倍稀釋），加 20μL到 96 孔板的樣品孔中。由于移液器在取小量樣品時誤差偏大，標(biāo)準(zhǔn)線前面的點可能不很準(zhǔn)確，所以盡可能的讓樣品點落在標(biāo)準(zhǔn)線 1/2 后。
4. 各孔加入 200μL BCA 工作液，37℃放置 15-30 分鐘。用酶標(biāo)儀測定 A562nm，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出蛋白濃度。使用溫箱孵育時，應(yīng)注意防止因水分蒸發(fā)影響檢測結(jié)果
關(guān)鍵字： BCA蛋白濃度測定試劑盒;蛋白濃度測定試劑盒;
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