試劑盒組成及試劑配制
1. 酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔）。 
2. 標(biāo)準(zhǔn)品（Standard）：2瓶（凍干品）。
3. 樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4. 生物素標(biāo)記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5. 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6. 生物素標(biāo)記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7. 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8. 底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。 
9. 濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。 
10. 終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。

【產(chǎn)品簡(jiǎn)介】：

中文名稱(chēng)：PTN Elisa Kit
       英文名稱(chēng)：Human pleiotrophin, PTN Elisa Kit
       包裝規(guī)格：液體盒裝 96T/48T
　　保存條件：2-8℃（長(zhǎng)期不使用時(shí)，部分試劑應(yīng)放在-20℃條件下）。
　　有效期：6個(gè)月
　　存儲(chǔ)運(yùn)輸：低溫避光，請(qǐng)勿重壓，輕拿輕放（現(xiàn)貨供應(yīng)，一般為快遞運(yùn)輸，江浙滬隔天到，外地及偏遠(yuǎn)地方三 至五天時(shí)間到貨。）
　　Elisa試劑盒可測(cè)種屬：人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚(yú)等。
　　Elisa試劑盒適用范圍：此試劑盒僅用于科研實(shí)驗(yàn)，禁用于臨床。

試劑和樣本的控制方法：
一、試劑
1.試劑的選擇：國(guó)家明確要求要采用批批檢定的形式對(duì)ELISA試劑嚴(yán)格把關(guān)，我司嚴(yán)格按照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行生產(chǎn)，已獲得國(guó)家承認(rèn)的“三證”，每一個(gè)產(chǎn)品都有對(duì)應(yīng)的生產(chǎn)批號(hào)，只要客戶(hù)提前下單，我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品，不必?fù)?dān)心會(huì)有過(guò)期的試劑。我司的試劑，值得您選擇。
2.試劑的準(zhǔn)備：先將試劑盒先從冰箱中拿出來(lái)，在室溫下放置20-30 min后，再進(jìn)行測(cè)定，使試劑盒在使用前與室溫平衡，這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所需的溫度，以滿足后面的測(cè)定需求。
二、樣本
1.內(nèi)源性干擾因素：包括類(lèi)風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等；
類(lèi)風(fēng)濕因子的控制方法：
①用F(ab)2替代完整的IgG；
②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理；
③檢測(cè)抗原時(shí)，可用2-巰基乙醇加入到標(biāo)本稀釋液中使RF降解
山羊腎上皮樣細(xì)胞;DG-K1N,N-二去甲基鹽酸曲美布汀-d5質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口N,N-Didesmethyl Trimebutine-d5

CDC37 Others Mouse 小鼠 CDC37 / CDC37A 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) N,N-二去甲基鹽酸曲美布汀質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口N,N-Didesmethyl Trimebutine

腮腺細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)N-去甲基鹽酸曲美布汀質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口N-Demethyl Trimebutine

高背鯽魚(yú)尾鰭細(xì)胞;GBJd 人正常皮膚細(xì)胞，TE 353.Sk細(xì)胞 HO-8910(卵巢癌細(xì)胞)柚皮素-4'-O-β-D-葡萄糖苷酸質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Naringenin-4'-O-beta-D-Glucuronide

人神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞;U251N-甲酰伐倫克林質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口N-Formyl Varenicline
獼猴皮膚細(xì)胞;MMS4醋酸鋅（二水） acetate質(zhì)量規(guī)格：AR,>98%

CDH5 Others Rat 大鼠 VE-Cadherin / CD144 / CDH5 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 舒巴坦鈉Sulbactam 質(zhì)量規(guī)格：BR,>99%

嬰兒真皮成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)9-溴芴(>98.0%(T))9-Bromofluorene質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)

THP-1細(xì)胞，人單核細(xì)胞白血病細(xì)胞 BALB/C小鼠肝上皮細(xì)胞,BNL1ME A.7R.1細(xì)胞 角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)添加物(不含動(dòng)物成分)KGS-acf2-溴芴(>98.0%(GC))2-Bromofluorene質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)

NCI-H209(人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×22-溴-9-芴酮(>96.0%(GC))2-Bromo-9-fluorenone質(zhì)量規(guī)格：>96.0%(GC)
PTN Elisa Kit大鼠氣管和支氣管上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL酮基匹格列酮標(biāo)記d4質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Keto-Pioglitazone - Labeled d4

大鼠腎小球系膜細(xì)胞hbzy-1 Rat mesangial cell hbzy-1 DMEM(高糖)+10%FBS(或者EMEM+10%FBS)羥基匹格列酮標(biāo)記d4質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Hydroxy Pioglitazone Labeled d4

NRG1 Protein Human 重組人 NRG1-beta 1 蛋白 (ECD, Fc 標(biāo)簽)匹格列酮標(biāo)記的d4質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Pioglitazone - Labeled d4

NCI-H1975(人肺腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 神經(jīng)元細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)羥基匹格列酮（M-Ⅳ）質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Hydroxy Pioglitazone (M-IV)

少突膠質(zhì)前體細(xì)胞分化培養(yǎng)基OPCDMN-氧基帕洛諾司瓊質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Palonosetron N-Oxide

注意事項(xiàng)：
1加樣：
①實(shí)驗(yàn)樣本過(guò)多時(shí)，可分批次操作，以減少實(shí)驗(yàn)時(shí)間延長(zhǎng)造成的誤差；
②加酶試劑后，用吸水紙吸干孔外試劑；
③作定量試驗(yàn)時(shí)，使用加樣器加注試劑，并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性，此外，要做到一份樣本一個(gè)移液頭，防止交叉污染。
2.溫育：
①如有兩種溫度，盡量使用較低的溫育溫度、較長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間的條件；
②用1個(gè)小溫度計(jì)放置在板孔反應(yīng)液中測(cè)量觀察；
③96孔板周?chē)着c中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會(huì)造成“邊緣效應(yīng)”，因此盡量采用水浴；
3.洗板：
①手工洗板時(shí)，拍板時(shí)要垂直，避免交叉污染，用力不能過(guò)猛，防止抗原抗體復(fù)合物脫離；
②洗板機(jī)洗板時(shí)應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢，若被雜物堵塞時(shí)可用注射器針頭挑出；
③為了洗滌效果好，實(shí)驗(yàn)室可采用機(jī)器與人工洗滌相結(jié)合的方法，在機(jī)器洗滌后再進(jìn)行人工洗板1-2次，或適當(dāng)增加洗板的次數(shù)；
4.顯色：
ELISA試劑盒中，如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物，則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液；如以鄰苯二胺(OPD)為底物，則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑，要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光，但A、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械。
5.判定：
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成，定性測(cè)定用肉眼判讀試驗(yàn)結(jié)果時(shí)，反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm；定量測(cè)定時(shí)用酶標(biāo)儀讀取結(jié)果，酶標(biāo)儀不應(yīng)置于陽(yáng)光或強(qiáng)光照射下，需先預(yù)熱15-30 min再進(jìn)行測(cè)試。