服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 型號(hào) |
雙歧桿菌屬通用PCR檢測(cè)試劑盒 | 50T | EY00P170 |
組成及試劑配制
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
實(shí)驗(yàn)外包
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測(cè):DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測(cè):Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測(cè):HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
去甲基鹽酸環(huán)苯扎林質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Desmethyl Cyclobenzaprine humanHepatitisDvirusIgG,HDVIgGELISAKit人丁型肝炎IgG(HDVIgG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T MouseE-SelectinELISAKit小鼠E選擇素(E-Selectin/CD62E)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
δ9(11)-甲基質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Delta9(11)-Methyltestosterone 人血管生成素1(ANG-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 RatVitaminB6,VB6ELISA試劑盒大鼠維生素B6(VB6)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
(+/-)-4'-羥基硫酸心得安質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口(+/-)-4'-Hydroxy Propranolol Sulfate 豬髓過(guò)氧化物酶(MPO)試劑盒 Pig Myeloperoxidase,MPO ELISA kit HumanMacrophageColony-StimulatingFactor,M-CSFELISA試劑盒人巨噬細(xì)胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
4-羥基心得安β-D-葡萄糖苷酸 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口4-Hydroxy Propranolol β-D-Glucuronide HumanCXC-chemokineligand16,CXCL16ELISAKit 人CXC趨化因子配體16(CXCL16)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 HumanPemphigusFoliaceus,PFELISAKit人落葉型天皰瘡抗體(PF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
尼扎替丁Nizatidine質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,USP31 ELISAKitTACE人腫瘤壞死因子α轉(zhuǎn)化酶規(guī)格:48T/96T 纖維蛋白原(Fb)ELISA試劑盒 ,英文名: Fb ELISA Kit
羧甲基纖維素Carboxymethyl cellulose 質(zhì)量規(guī)格:粘度(1%,25℃) ≥500 mpa.s 小鼠輪狀病毒(RV)抗原(Ag)ELISA試劑盒 ,英文名: Ag ELISA Kit MouseIerleukin6,IL-6ELISA試劑盒小鼠白介素6(IL-6)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
氟達(dá)拉賓Fludarabine質(zhì)量規(guī)格:≥99.0%,BR 大鼠(T)ELISA檢測(cè)試劑盒RatTestoterone,TELISAKit 96T/48T ELISAKitCETP兔子膽酯轉(zhuǎn)移蛋白規(guī)格:48T/96T
氨魯米特(標(biāo)準(zhǔn)品)Aminoglutethimide質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 人端粒酶(TE)試劑盒 Human telomerase,TE ELISA Kit Chickenprolactin,PRLELISAKit雞催乳素(PRL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
雙歧桿菌屬通用PCR檢測(cè)試劑盒雙[3,5-二溴-4-(2-羥乙氧基)苯基]砜(>96.0%(GC))Bis[3,5-dibromo-4-(2-hydroxyethoxy)phenyl] Sulfone質(zhì)量規(guī)格:>96.0%(GC) Humanai-gasicparietalcellaibody,AGPA/PCAELISA試劑盒人抗網(wǎng)硬蛋白抗體(ARA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 人百日咳(PT)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
雙[4-(2-羥乙氧基)苯基]砜(>97.0%(GC))Bis[4-(2-hydroxyethoxy)phenyl] Sulfone質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC) 植物賴氨酸(lysine)含量化學(xué)比色法定量檢測(cè)試劑盒20 兔子血小板衍生生長(zhǎng)因子AB(PDGF-AB)試劑盒 Rabbit Platelet-Derived Growth Factor AB,PDGF-AB ELISA Kit
二苯砜-3,3'-二磺酸二鈉鹽(>95.0%(T))Diphenylsulfone-3,3'-disulfonic Di Salt質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(T) HumanVitaminB6,VB6ELISAKit人維生素B6(VB6)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 瘦素受體(Lepti)ELISA試劑盒 ,英文名: Lepti ELISA Kit
5,10-二氫-5,10-二甲基吩嗪(>98.0%(GC)(N))5,10-Dihydro-5,10-dimethylphenazine質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(N) 小鼠甲腺原酸脫酶Ⅲ(DIO3)ELISA試劑盒 ,英文名: DIO3 ELISA Kit PlaVitaminD,VDELISA試劑盒植物維生素D(VD)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
使用方法:
一、樣品DNA的制備用自選方法提取細(xì)菌樣品DNA。注意:DNA純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品DNA,后面的PCR再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備O157:H7標(biāo)準(zhǔn)曲線(以10-10E6這6個(gè)10倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照,只提供沒(méi)有傳染性的、可以直接使用的DNA片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為6,5,4,3,2和1號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入45 μL純水(*用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用TE緩沖液或純水10倍梯度稀釋到10E7拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至10E7拷貝/μL,建議每次稀釋10倍,梯度稀釋至10E7拷貝/μL)。
4. 在6號(hào)管中加入5 μL 10E7拷貝/μL的O157:H7陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋得),充分震蕩1分鐘,得10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。
5. 換槍頭,從6號(hào)管中取5 μL溶液到5號(hào)管中,充分震蕩1分鐘,得10E5拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。6. 換槍頭,從5號(hào)管中取5 μL溶液到4號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。
7. NC管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。
8. 從1-6號(hào)管中分別取5 μL和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量PCR(見(jiàn)下步),每個(gè)樣品做3次重復(fù)。PCR后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光PCR Ct值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
關(guān)鍵字: 雙歧桿菌屬核酸檢測(cè)試劑盒;雙歧桿菌屬PCR試劑盒;雙歧桿菌屬PCR擴(kuò)增試劑盒;雙歧桿菌屬PCR熒光探針試劑盒;雙歧桿菌屬通用型PCR試劑盒;
上海一研生物科技有限公司Shanghai yiyan bio-technology Co. Ltd.主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑等為一體的科研產(chǎn)品銷售企業(yè),公司自成立以來(lái),秉承""全心全意服務(wù)于科研工作者""的企業(yè)理念,立足生物科技領(lǐng)域,運(yùn)用生物技術(shù)和科研試劑,發(fā)展現(xiàn)代生物科技,為各類大中小醫(yī)院及其它醫(yī)療機(jī)構(gòu)、高等院校、科研院所、企事業(yè)單位提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品,服務(wù)生物科技領(lǐng)域的科學(xué)研究人員。
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