中文名稱:牛流行熱病毒PCR檢測試劑盒 | 品牌: 一研 |
產地: 國產 | 保存條件: -20℃ |
產品類別: PCR試劑盒 PCR檢測試劑盒 | |
型號: EY00P202 |
參數(shù)規(guī)格:
產品名稱:牛流行熱病毒PCR檢測試劑盒
型號 : EY00P202
產品規(guī)格:50T
產品運輸:低溫運輸
產品保存:-20℃保存
產品有效期:一年
運輸:低溫
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。
實驗操作過程:
一、 CHO DNA 定量參考品的稀釋及標準曲線的制備
用試劑盒中提供的 DNA dilution buffer 將 CHO control DNA 進行梯度稀釋, 稀釋濃度依 次為 300pg/ul 、30pg/ul 、3pg/ul 、300fg/ul 、30fg/ul 、3fg/ul 。具體操作如下:
1.將試劑盒中的 CHO control DNA 和 DNA dilution buffer 置于冰上融化,待完全融化后,
輕微振蕩混勻,簡短快速離心。
2.取 6 支干凈的 1.5ml 離心管,分別標記為 SD1 ,SD2 ,SD3 ,SD4 ,SD5, SD6。
3,SD1 管中加入 198ul DNA dilution buffer,其余管中分別加入 180ul DNA dilution buffer。
4,取 2ul CHO control DNA 加入 SD1 管中, 然后渦旋振蕩混勻 5- 10s 后短時快速離心 5s,渦旋振蕩和快速離心各重復 3 次。
5,按表 2 依次進行 6 次梯度稀釋操作,稀釋操作同步驟 4。
表 2. CHO control DNA 的稀釋
稀釋管 | 稀釋體積 | 濃度 |
SD1 | 2ul CHO control DNA+198ul DNA dilution buffer | 300 pg/ul |
SD2 | 20ul SD1+180ul DNA dilution buffer | 30 pg/ul |
SD3 | 20ul SD2+180ul DNA dilution buffer | 3 pg/ul |
SD4 | 20ul SD3+180ul DNA dilution buffer | 300 fg/ul |
SD5 | 20ul SD4+180ul DNA dilution buffer | 30 fg/ul |
SD6 | 20ul SD5+180ul DNA dilution buffer | 3 fg/ul |
二、加樣回收質控 ERC 的制備
根據(jù)待測樣本的殘留量設置 ERC 中 CHO control DNA 的加樣濃度 (以制備加 45pg CHO control DNA 的樣本 ERC 為例),操作如下:
1,取待測樣本 100u,加至 1.5ml 干凈的離心管中;
2,加入 1.5ul SD2,混勻,標記為樣本 ERC。
注:樣本 ERC 和同批待測樣本需一起進行樣本前處理。
三、陰性質控 NEG 的制備
根據(jù)實驗設置陰性質控,操作如下:
1,取 100ul 樣本基質溶液(或洗脫液)加至 1.5ml 干凈的離心管中標記為陰性質控 NEG。 注:陰性質控 NEG 樣本和同批待測樣本需一起進行樣本前處理。
四、 qPCR 反應液的制備和加樣
1,根據(jù)所要檢測的標準曲線及待測樣本數(shù)量,計算所需反應孔數(shù),一般做 3 個重復孔/樣。
反應孔數(shù)= (6 個濃度梯度+1 個無模板對照 NTC+1 個陰性質控 NEG+待測樣本×2) ×3 注:待測樣本×2 是為了讓每個待測樣本檢測時都同時做樣本 ERC 。 2,根據(jù)反應孔數(shù)計算本次實驗所需的各組分的所需總量以制備 pre-mix:
2×Taqman master mix=(反應孔數(shù)+2) ×15ul (含有 2 孔的損失量)
10×CHO qPCR mix= (反應孔數(shù)+2) ×3ul
RNase-free H2O= (反應孔數(shù)+2) ×2ul
3,各試劑置于冰上融化,振蕩混勻,按表 3 所示進行加樣:
表 3.各反應孔加樣示例
標準曲線 | 20ul pre-mix+ 10ul SD1/SD2/SD3/SD4/SD5/SD6 |
NTC | 20ul pre-mix+ 10ul DNA dilution buffer |
NEG | 20ul pre-mix+ 10ul NEG |
待測樣本 | 20ul pre-mix+ 10ul 待測樣本 |
ERC 樣本 | 0ul pre-mix+ 10ul ERC 樣本 |
注意事項
1.整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5.試劑盒內所配陰性和陽性對照在次使用前應全部轉移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6.為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
曲匹布通(標準品)質量規(guī)格:UV法含量測定Trepibutone Humanproteinase-aineuophilcytoplasmicaibody,PR3-ANCAELISAKit人蛋白酶3特異性抗中性粒細胞胞質抗體(PR3-ANCA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 倉鼠巨噬細胞遷移抑制因子(MIF)試劑盒 Hamster macrophage migration inhibitory factor,MIF ELISA kit
曲匹地爾(標準品)質量規(guī)格:供鑒別用Trapidil 小鼠Ⅲ型前膠原(HPCⅢ)ELISA試劑盒 ,英文名: HPCⅢ ELISA Kit CLIAKitforPYD(HumanPyridinolinecrosslinks)ELISAKit人膠原交聯(lián)規(guī)格:48T/96T
桂美酸(標準品)質量規(guī)格:溶出度檢查CINAMETIC 蛇毒因子(CVF)ELISA檢測試劑盒Cobravenomfactor,CVFELISAKit 96T/48T 石蠟切片脂肪酸費斯克勒(Fischler)直接染色試劑盒50
奧拉米特(標準品)質量規(guī)格:UV法溶出度檢查Orazamide 人CD19分子(CD19)試劑盒 Human CD19 ELISA Kit ELISAKitBMPR-Ⅱ人骨成型蛋白受體Ⅱ規(guī)格:48T/96T
牛流行熱病毒PCR檢測試劑盒尼泊金芐酯質量規(guī)格:美國進口Benzyl Paraben HumanClaracellprotein,CC16ELISA試劑盒人克拉拉細胞蛋白(CC16)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 大鼠胰島素(INS)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
五味子乙素(標準品)質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品Schizandrin B 組蛋白脫乙?;?/span>(HDAC)總活性比色法定量檢測試劑盒20 人心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)試劑盒 Human cTn-ⅠELISA Kit
五味子酯甲(標準品)質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品Schisantherin A Humaotavirusaigen,RVAgELISAKit人輪狀病毒抗原(RVAg)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 谷胱甘肽過氧化物酶(GPX)測試盒 GR法 50管/48樣
西貝母堿(標準品)質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品Sipeimine 小鼠α1-微球蛋白(α1M)ELISA試劑盒 ,英文名: α1M ELISA Kit Ratmaixmetalloproteinase5,MMP-5ELISA試劑盒大鼠基質金屬蛋白酶5(MMP-5)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
舒馬曲坦-d6琥珀酸鹽質量規(guī)格:美國進口Sumatriptan-d6 Succinate 英文名稱RatSerotonin5-HydroxyyptamineELISAKit大鼠5-羥色氨(5-HT)規(guī)格:96T/48T 大鼠血栓調節(jié)蛋白(TM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
雙氯芬酸甲酯質量規(guī)格:美國進口Diclofenac Methyl Ester 裂解液ⅩI非變性細胞蛋白制備 人纖溶酶原(Plg)試劑盒 Human Plg ELISA Kit
雙氯芬酸酰胺質量規(guī)格:美國進口Diclofenac Amide ELISAKitBDNF人腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子規(guī)格:48T/96T 總抗氧化能力(T-AOC)測試盒 可見分光光度法 50管/48樣
芴甲氧羰基-加巴噴丁質量規(guī)格:美國進口Fmoc-Gabapentin 小鼠Sesin小鼠1蛋白(SESN1)ELISA試劑盒 ,英文名: SESN1 ELISA Kit RatNervegrowthfactor,NGFELISA試劑盒大鼠神經(jīng)生長因子(NGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
成立日期 | 2014-06-05 (11年) | 注冊資本 | 100 |
員工人數(shù) | 50-100人 | 年營業(yè)額 | ¥ 100萬以內 |
主營行業(yè) | 生化試劑,抗體,細胞培養(yǎng),分子生物學,免疫安全 | 經(jīng)營模式 | 工廠,試劑 |
產品名稱 | 價格 | 公司名稱 | 報價日期 | |
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¥3490 |
VIP1年
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上海晶風生物科技有限公司
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2024-11-07 | |
¥1200 |
VIP3年
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上海雅吉生物科技有限公司
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2024-11-07 | |
¥2990 |
VIP5年
|
上海澤葉生物科技有限公司
|
2024-11-07 |