參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：肉毒梭狀芽孢桿菌PCR檢測試劑盒
型號　:　　 EY00P307
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
運輸：低溫
注意事項：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
實驗操作過程：
一、 CHO DNA 定量參考品的稀釋及標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備
用試劑盒中提供的 DNA dilution buffer 將 CHO control DNA 進(jìn)行梯度稀釋， 稀釋濃度依 次為 300pg/ul 、30pg/ul 、3pg/ul 、300fg/ul 、30fg/ul 、3fg/ul 。具體操作如下：
1.將試劑盒中的 CHO control DNA 和 DNA dilution buffer 置于冰上融化，待完全融化后，
輕微振蕩混勻，簡短快速離心。
2.取 6 支干凈的 1.5ml 離心管，分別標(biāo)記為 SD1 ，SD2 ，SD3 ，SD4 ，SD5, SD6。
3，SD1 管中加入 198ul DNA dilution buffer，其余管中分別加入 180ul DNA dilution buffer。
4,取 2ul  CHO  control  DNA 加入 SD1 管中，  然后渦旋振蕩混勻 5- 10s 后短時快速離心 5s，渦旋振蕩和快速離心各重復(fù) 3 次。
5,按表 2 依次進(jìn)行 6 次梯度稀釋操作，稀釋操作同步驟 4。
                                 表 2. CHO control DNA 的稀釋

二、加樣回收質(zhì)控 ERC 的制備
根據(jù)待測樣本的殘留量設(shè)置 ERC 中 CHO  control  DNA 的加樣濃度  (以制備加 45pg  CHO control DNA 的樣本 ERC 為例)，操作如下：
1，取待測樣本 100u，加至 1.5ml 干凈的離心管中；
2，加入 1.5ul SD2，混勻，標(biāo)記為樣本 ERC。
注：樣本 ERC 和同批待測樣本需一起進(jìn)行樣本前處理。
三、陰性質(zhì)控 NEG 的制備

根據(jù)實驗設(shè)置陰性質(zhì)控，操作如下：
1，取 100ul 樣本基質(zhì)溶液(或洗脫液)加至 1.5ml 干凈的離心管中標(biāo)記為陰性質(zhì)控 NEG。 注：陰性質(zhì)控 NEG 樣本和同批待測樣本需一起進(jìn)行樣本前處理。
四、 qPCR 反應(yīng)液的制備和加樣
1，根據(jù)所要檢測的標(biāo)準(zhǔn)曲線及待測樣本數(shù)量，計算所需反應(yīng)孔數(shù)，一般做 3 個重復(fù)孔/樣。
反應(yīng)孔數(shù)=  (6 個濃度梯度+1 個無模板對照 NTC+1 個陰性質(zhì)控 NEG+待測樣本×2) ×3 注：待測樣本×2 是為了讓每個待測樣本檢測時都同時做樣本 ERC 。                  2，根據(jù)反應(yīng)孔數(shù)計算本次實驗所需的各組分的所需總量以制備 pre-mix：
2×Taqman master mix=(反應(yīng)孔數(shù)+2) ×15ul    (含有 2 孔的損失量)
10×CHO qPCR mix=  (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×3ul
RNase-free H2O=  (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×2ul
3，各試劑置于冰上融化，振蕩混勻，按表 3 所示進(jìn)行加樣：
                                  表 3.各反應(yīng)孔加樣示例

注意事項
1.整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實驗服、儀器、耗材應(yīng)獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機(jī)檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨存放。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
 小鼠髖動脈內(nèi)皮細(xì)胞;PIEC 白血病細(xì)胞，RBL-2H3細(xì)胞 ME細(xì)胞，C57小鼠色素瘤瘤株龍膽二糖質(zhì)量規(guī)格：>96%，原裝進(jìn)口Gentiobiose

Sars結(jié)構(gòu)蛋白表達(dá)株;293 001B西洛多辛質(zhì)量規(guī)格：>98%Silodosin

HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/Puerto Rico/8/1934) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 西洛多辛(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：>98.5%，標(biāo)準(zhǔn)品Silodosin

CL-0232TF-1(血液白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×21酸溴莫尼定質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRBrimonidine tartrate

PTK6 Others Human  PTK6 / Brk 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) Bacto酵母浸粉(BD原裝)質(zhì)量規(guī)格：Bacto;BD212750Yeast extract

肉毒梭狀芽孢桿菌PCR檢測試劑盒環(huán)吡酮-d11質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Ciclopirox-d11  大鼠多巴胺D2受體(D2R)ELISA檢測試劑盒RatdopamineD2receptor,D2RELISAKit 96T/48T  Humaninsulin-likegrowthfactorsbindingprotein2,IGFBP-2ELISA試劑盒人胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2(IGFBP2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

環(huán)吡酮β-D-葡萄糖苷酸質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Ciclopirox beta-D-Glucuronide  人CD73分子(CD73)試劑盒 Human cluster of differeiation 73,CD73 ELISA Kit  Humanmethoexate,MTXELISAKit人喋呤(MTX)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

4-羥基纈沙坦（非對映）質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口4-Hydroxy Valsartan (Mixture of Diastereomers)  英文名稱MouseAZTELISAKit小鼠疊氮胸苷(AZT)規(guī)格：96T/48T  大鼠細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1)ELISA試劑盒 ，英文名： ICAM-1 ELISA Kit

雌激素酮醋酸鹽質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Estrone Acetate  冰凍切片茜素紅(ALIZARIEDS)鈣染色試劑盒50  人抗丁型肝炎病毒抗體(ai-HDV)ELISA檢測試劑盒Humanai-hepatitisDvirusaibody,ai-HDVELISAKit 96T/48T

神經(jīng)肽Y（3-36），豬Neuropeptide Y (3-36)(porcine)質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR  人甲酰甲硫氨酸(fMet)試劑盒 Human formylmine,fMet ELISA Kit  人生長激素釋放多肽(GHRP) ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

骨鈣素（7-19），人Osteocalcin (7-19) (human)質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR  RatBigEndothelin,BigETELISAKit大鼠大內(nèi)皮素(BigET)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  小鼠正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子(RAES/CCL5)試劑盒 Mouse regulated on activation in normal T-cell expressed and secreted,RAES ELISA kit

成骨生長肽Osteogenic Growth Peptide質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR  [γ32P]ATP激酶標(biāo)記試劑盒20  西尼羅河病毒(WNV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

頭孢唑啉鈉（標(biāo)準(zhǔn)品）Cefazolin 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>95%,標(biāo)準(zhǔn)品  MouseAialNaiureticPeptide,ANPELISA試劑盒小鼠心肽(ANP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  Humanplateletactivatingfactor,PAFELISA試劑盒人血小板活化因子(PAF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T