參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：產(chǎn)腸毒素性大腸桿菌PCR檢測試劑盒
型號　:　　 EY00P438
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
運輸：低溫
注意事項：1．基礎程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術的基本原理；7．PCR的反應動力學；8．PCR擴增產(chǎn)物；9．PCR反應體系與反應條件。
實驗操作過程：
一、 CHO DNA 定量參考品的稀釋及標準曲線的制備
用試劑盒中提供的 DNA dilution buffer 將 CHO control DNA 進行梯度稀釋， 稀釋濃度依 次為 300pg/ul 、30pg/ul 、3pg/ul 、300fg/ul 、30fg/ul 、3fg/ul 。具體操作如下：
1.將試劑盒中的 CHO control DNA 和 DNA dilution buffer 置于冰上融化，待完全融化后，
輕微振蕩混勻，簡短快速離心。
2.取 6 支干凈的 1.5ml 離心管，分別標記為 SD1 ，SD2 ，SD3 ，SD4 ，SD5, SD6。
3，SD1 管中加入 198ul DNA dilution buffer，其余管中分別加入 180ul DNA dilution buffer。
4,取 2ul  CHO  control  DNA 加入 SD1 管中，  然后渦旋振蕩混勻 5- 10s 后短時快速離心 5s，渦旋振蕩和快速離心各重復 3 次。
5,按表 2 依次進行 6 次梯度稀釋操作，稀釋操作同步驟 4。
                                 表 2. CHO control DNA 的稀釋

二、加樣回收質(zhì)控 ERC 的制備
根據(jù)待測樣本的殘留量設置 ERC 中 CHO  control  DNA 的加樣濃度  (以制備加 45pg  CHO control DNA 的樣本 ERC 為例)，操作如下：
1，取待測樣本 100u，加至 1.5ml 干凈的離心管中；
2，加入 1.5ul SD2，混勻，標記為樣本 ERC。
注：樣本 ERC 和同批待測樣本需一起進行樣本前處理。
三、陰性質(zhì)控 NEG 的制備

根據(jù)實驗設置陰性質(zhì)控，操作如下：
1，取 100ul 樣本基質(zhì)溶液(或洗脫液)加至 1.5ml 干凈的離心管中標記為陰性質(zhì)控 NEG。 注：陰性質(zhì)控 NEG 樣本和同批待測樣本需一起進行樣本前處理。
四、 qPCR 反應液的制備和加樣
1，根據(jù)所要檢測的標準曲線及待測樣本數(shù)量，計算所需反應孔數(shù)，一般做 3 個重復孔/樣。
反應孔數(shù)=  (6 個濃度梯度+1 個無模板對照 NTC+1 個陰性質(zhì)控 NEG+待測樣本×2) ×3 注：待測樣本×2 是為了讓每個待測樣本檢測時都同時做樣本 ERC 。                  2，根據(jù)反應孔數(shù)計算本次實驗所需的各組分的所需總量以制備 pre-mix：
2×Taqman master mix=(反應孔數(shù)+2) ×15ul    (含有 2 孔的損失量)
10×CHO qPCR mix=  (反應孔數(shù)+2) ×3ul
RNase-free H2O=  (反應孔數(shù)+2) ×2ul
3，各試劑置于冰上融化，振蕩混勻，按表 3 所示進行加樣：
                                  表 3.各反應孔加樣示例

注意事項
1.整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在次使用前應全部轉移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
6.為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
 胚腎二倍體細胞;CCC-HEK-1麥芽三糖(標準品)質(zhì)量規(guī)格：供檢查用MALTOTRIOSE

ENG Others Mouse 小鼠 Endoglin / ENG / CD105 細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸丙卡特羅（標準品）質(zhì)量規(guī)格：含量測定Procaterol HCl

心肌成纖維細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)泛酸鈉（標準品）質(zhì)量規(guī)格：含量測定 D-pantothenate

CSF2 Others Mouse 小鼠 GM-CSF / CSF2 細胞裂解液 (陽性對照) 尼達尼布；BIBF 1120質(zhì)量規(guī)格：三重血管激酶抑制劑Nintedanib (BIBF1120)

大鼠嗜堿性粒細胞性白血病細胞;RBL-2H3硫普羅寧,N-(2-丙酰)甘氨酸質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRTiopronin

產(chǎn)腸毒素性大腸桿菌PCR檢測試劑盒更昔洛韋Ganciclovir質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR,可用于細胞培養(yǎng)  Mouseα-galactoyl,GalELISA試劑盒小鼠α半乳糖基抗原(α-Gal)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  胎兒纖連蛋白(fFN)ELISA試劑盒 ，英文名： fFN ELISA Kit

更昔洛韋(標準品)Ganciclovir質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98.5%,標準品  小鼠結蛋白(Des)ELISA試劑盒 ，英文名： Des ELISA Kit  MouseTumornecrosisfactorsolublereceptorⅡ,TNFsR-ⅡELISA試劑盒小鼠壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

ADA單鈉鹽ADA mono salt質(zhì)量規(guī)格：>99%  大鼠前列腺酸性1酸酶(PAP)ELISA檢測試劑盒RatProstaticPhosphatase,PAPELISAKit 96T/48T  Elisa牛結核病抗體檢測試劑盒2*96孔2*96孔

N-（乙酰氨基）亞氨基二乙酸二鈉鹽ADA di salt質(zhì)量規(guī)格：>98%  人促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)試劑盒 human coicoopin releasing hormone,CRH ELISA Kit  HumanAngiopoietin2,ANG-2ELISAKit人血管生成素2(ANG-2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

人促腎上腺皮質(zhì)激素(1-24),替可克肽ACTH (1-24), human質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR  大鼠水通道蛋白5(AQP-5)ELISA檢測試劑盒RatAquaporin5,AQP-5ELISAKit 96T/48T  cit瓜氨酸規(guī)格：96T/48T

緩激肽Bradykinin質(zhì)量規(guī)格：>98%  人催產(chǎn)素(OT)試劑盒 Human oxytocin,OT ELISA Kit  Humanalkalinephosphatase，ALPELISAKit人堿性1酸酶(ALP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

D 13223 (氟吡汀代謝產(chǎn)物)D 13223 (Flupirtine Metabolite)質(zhì)量規(guī)格：美國進口  Raetinol-bindingprotein,RBPELISAKit大鼠視黃醇結合蛋白(RBP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  人超敏前列腺特異性抗原(PSA-U S)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

伊潘立酮-d3Iloperidone-d3質(zhì)量規(guī)格：美國進口  Hollande固著液50毫升  豚鼠內(nèi)皮型合成酶(eNOS)試劑盒 Guinea Pig Endothelial niic oxide syhase,eNOS ELISA Kit